BD FACSCalibur流式细胞仪故障1例

流式细胞仪是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器,可以对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数、快速定量分析和分选[1]。

基于流式细胞仪提高乳制品商业无菌检验时效性的研究

目的基于流式细胞仪探究提高乳制品商业无菌检验项目时效性。方法以地衣芽孢杆菌CMCC(B)63552和蜡样芽孢杆菌CMCC(B)63303菌株制备定量参考品。以4种灭菌乳为基质,制备染菌浓度分别为800、8000、80000 CFU/mL的菌悬液,测试流式细胞仪法灵敏度。制备染菌浓度为8 CFU/样品和80 CFU/样品的灭菌乳和调制乳样品,经(36±1)℃保温(24±2)h后,按照GB 4789.26法和流式细胞仪法进行检测,并分析比较两种方法检测结果。结果在灭菌乳基质中,染菌浓度为800 CFU/mL时,流式细胞仪法对人工污染地衣芽孢杆菌样品的阳性检出率为75%,而对人工污染蜡样芽孢杆菌的样品均未检出阳性;染菌浓度为8000 CFU/mL和80000 CFU/mL时,流式细胞仪法对地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌污染样品的阳性检出率均为100%。对人工污染8 CFU和80 CFU地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的灭菌乳和调制乳样品,经保温处理后,流式细胞仪法检出率为100%,GB 4789.26法中未见样品膨胀,但是镜检和培养结果检出率为100%。结论当样品中染菌浓度≥8000 CFU/mL时,流式细胞仪法可稳定检出。人工污染地衣芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的灭菌乳和调制乳样品经保温处理(24±2)h后,流式细胞仪法和GB 4789.26法检出率均为100%。

流式细胞仪平台支撑本科细胞生物学实验课教学改革的实践

在流式细胞术检测细胞凋亡实验中,借助流式细胞仪平台,从教学模式、实验内容、仪器准备、教学素材等方面对细胞生物学实验课进行改革,取得了较好的教学效果。这种仪器平台与教学团队共同探索教学改革的模式,充分发挥大型仪器设备在人才培养方面的潜能,可为其他高校仪器平台建设提供参考。

流式细胞仪样品预处理系统的设计与实现

根据流式细胞仪对样品“均一化”的需求,研制了一套基于微流控细胞分选技术的流式细胞仪样品预处理系统,装置可以实现对粒径小于100µm细胞或微粒的驱动和分选.系统主要包含微流控分选芯片和样品驱动模块两部分,通过聚焦不同位置,实现了对不同粒径细胞/颗粒的有效分离.系统无需对细胞进行标记处理,经分选的细胞便于后续流式细胞仪检测.经验证,系统能够有效去除牡蛎血淋巴细胞样品中的大粒子杂质,提高细胞样品的稳定性和均一性,增加流式细胞仪检测结果的准确性.

基于流式细胞仪的激光器驱动系统研究与设计

为获得适用于流式细胞仪的功率稳定、波长稳定、低噪声的激光光源,设计了一款恒功率控制的半导体激光器驱动系统。系统采用多量子阱激光二极管,以STM32为主控核心,以MAX8521芯片为温度控制核心,采用双闭环功率控制,实现对激光器输出光功率的高精度低噪声控制。实验结果表明,该系统的温度波动在±0.016℃范围内,温度控制不稳定度为±0.055%,输出光功率长期不稳定度为±0.078%,光噪声率为0.109%,输出光波长稳定在637~638 nm,仪器分辨率的全峰宽变异系数均小于等于1.70%,优于YY/T0588-2017流式细胞仪行业标准的要求。所设计的半导体激光器驱动系统温控精度高、输出长期稳定、光噪声小、成本低,能够有效满足流式细胞仪检测的需求。

流式细胞仪在大白菜倍性育种中的应用

为建立一套能够快速准确鉴定四倍体大白菜倍性的流式细胞术应用方法,以12种已知倍性的蔬菜作物验证流式细胞仪倍性检测结果,同时以二倍体大白菜‘冀白4号’和四倍体大白菜‘多维462’、‘多505’和‘多育2号’为材料,对不同时期、不同部位取材并进行倍性鉴定,最终筛选出合适的取样时期与部位。结果表明,12种已知倍性的蔬菜验证了本研究所用流式细胞仪鉴定结果的准确性与可靠性;‘冀白4号’、‘多维462’、‘多505’和‘多育2号’在子叶期取幼嫩子叶的倍性检测结果均与已知倍性相符。因此,子叶期的幼嫩子叶为大白菜鉴定倍性取材的最佳时期与部位。

流式细胞仪对甘蓝花粉倍性的测定

利用流式细胞仪测定甘蓝(Brassica oleracea var.capitata)花粉的倍性,以甘蓝GL21028的花粉为材料,以叶片为对照,比较花粉2种处理方式、3种不同细胞裂解液、2种核酸染料的效果差异。通过B缓冲液处理后获取的花粉细胞可以直接染色,为最简便处理方式;采用“Aru”buffer和Y 2种裂解液,染色剂DAPI,处理甘蓝叶片和花粉,通过流式细胞仪检测,样本细胞DNA成峰集中,细胞碎片很少;配制的Y裂解液能够适用甘蓝材料流式细胞仪的观察。甘蓝花粉通过B缓冲液处理后,可以直接作为流式细胞仪倍性鉴定的材料,不再需要其他处理,配制的Y裂解液可以得到较好的试验结果。

流式细胞仪在微生物学实验教学中的应用与实践

基于高校大型分析仪器面临使用效益的挑战,不仅细胞生物学实验使用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,根据流式细胞仪的操作简单、分析速度快、精确度高等特点,微生物学实验课程也将其融入。通过设计“酵母菌死活细胞鉴定及计数”实验项目,实现现代生命科学仪器分析技术与微生物学实验的有效融合。在实验教学中通过新技术方法与传统实验方法进行对比,不仅提高了大型仪器的使用效益也丰富了实验教学内容,从而使得实验教学效果得到显著提升。

荧光显微镜与流式细胞仪融入医学实验技术专业实验教学探究

针对构建多层次实验教学平台、改进实验教学方法以及丰富实验教学内容等教学改革问题,将大型仪器的使用与医学实验技术专业本科生实验教学相融合,优化实验教学模式的同时,提升大型仪器在实验技术人才培养上的作用。以探究“H2O2诱导RAW264.7细胞系细胞凋亡”为出发点,学生利用研究级倒置荧光显微镜观察细胞核Hoechst 33258染色情况,利用流式细胞术检测细胞凋亡情况,并自行查阅文献分析实验结果,完成开放性实验教学。通过这种模式,提高医学实验技术专业学生对细胞凋亡知识和大型仪器实践操作的掌握水平,为学生未来胜任实验技术工作打下良好基础。

流式细胞仪及光学系统设计

本文设计了流式细胞仪和光学系统,以实现对细胞的高效分析和检测。首先,介绍流式细胞仪的原理和结构,重点讨论设计参数的选择与优化。其次,对鞘流系统进行仿真设计,以保证流体的稳定流动和样本的准确检测。再次,设计激发光源和光束成形系统并进行验证,保证光源的稳定性和光束的精准成形。最后,对散射光探测光路进行设计和验证,以准确捕获和分析样本散射光。本文研究可为流式细胞仪和光学系统设计提供参考。

CytoFLEX流式细胞仪的常见故障诊断与处理措施

流式细胞术普遍应用在肿瘤学、细胞生物学、免疫学等诸多领域中,是临床疾病的重要诊疗手段,也是科研工作中常用的一种技术方法。CytoFLEX流式细胞仪是我国研发的一种新型仪器,运用了“Clear Focus”技术与专利的WDM收集模块,大幅缩减了仪器的体积及成本,与传统的流式细胞仪有着明显的区别。本文简述CytoFLEX流式细胞仪的常见故障,介绍其相应的处理措施,以期让更多的仪器使用者能够更好地应对突发故障,促进仪器高效运行。

流式细胞仪在恶性淋巴瘤患者外周血T细胞亚群中的检测价值

目的 探讨流式细胞仪在恶性淋巴瘤患者外周血T细胞亚群中的检测价值。方法 选取2019年4月至2023年4月于南昌市一人民医院住院的82名恶性淋巴瘤患者作为试验组,另选择同期82名健康体检者作为对照组,均采用流式细胞术测定外周血T细胞亚群(CD3^(+),CD4^(+),CD8^(+),CD4^(+)/CD8^(+))。比较所有受检者外周血T细胞亚群的变化。结果 试验组CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);两组CD4^(+)、CD8^(+)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。根据肿瘤类型将试验组分为霍奇金淋巴瘤组和非霍奇金淋巴瘤组,两组间各项外周血T细胞亚群指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组的CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);三组CD4^(+)、CD8^(+)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。根据肿瘤分期将试验组分为Ⅰ~Ⅱ期组和Ⅲ~Ⅳ期组,Ⅰ~Ⅱ期组CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均高于Ⅲ~Ⅳ期组,差异均有统计学意义(P <0.05)。Ⅰ~Ⅱ期组CD3^(+)水平低于对照组,CD8^(+)高于对照组;Ⅲ~Ⅳ期组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平低于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论 采取流式细胞仪检测恶性淋巴瘤患者外周血T细胞亚群水平,可以有效诊断患者病情、分期和免疫状态,应用效果显著。

流式细胞仪在肾移植术后慢性肾衰竭患者免疫功能监测中的应用价值分析

目的分析流式细胞仪在肾移植术后慢性肾衰竭患者免疫功能监测中的应用价值,为临床治疗提供参考。方法选取2021年10月至2022年10月益阳市中心医院收治的45例行肾移植手术的慢性肾衰竭患者,将其纳入手术组;将同期未行肾移植手术的45例慢性肾衰竭患者纳入非手术组,进行回顾性分析。比较两组患者T淋巴细胞亚群(CD4^(+)T淋巴细胞百分比、CD3^(+)T淋巴细胞百分比、CD4^(+)/CD8^(+)比值)水平、自然杀伤细胞(NK)水平及不良反应发生情况。结果手术组患者CD4^(+)T淋巴细胞百分比、CD3^(+)T淋巴细胞百分比、NK水平均低于非手术组,CD4^(+)/CD8^(+)比值水平高于非手术组(均P<0.05)。两组患者不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论流式细胞仪在肾移植术后慢性肾衰竭患者免疫功能监测中具有积极意义,能够有效对患者的免疫情况进行预警和提示,从而指导临床后续治疗,值得临床应用。

流式细胞仪用于监测HIV/AIDS患者CD4+T淋巴细胞计数的临床应用

本项探究专注于流式细胞仪对HIV/AIDS病例中CD4+ T淋巴细胞数量的有效监测。方法 借助流式细胞仪科技,对HIV/AIDS病例中CD4+ T淋巴细胞亚群进行逐一剖析。样本涵盖了40位身心健康的人士,25位患有轻度至中度HIV/AIDS的病例以及25位深受重度HIV/AIDS影响的病例。结果 无差别于病例的严重程度,轻中度或重度HIV/AIDS病例的CD4+ T细胞估计数均比健康个体有明显下降,尤其在CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+亚群,这种差距表现得更为明显。统计分析结果中,参照组与重度组在CD8+CD45RA+(t=6.571, p<0.001)和CD8+CD45RO+(t=9.581, p<0.001)亚群中的差异具有统计学意义。结论 流式细胞仪技术能有效监测HIV/AIDS患者的CD4+ T淋巴细胞计数,对不同病情程度的患者提供精确的细胞亚群分析,有助于医生更好地理解病情进展和治疗响应,从而为患者提供更合适的治疗方案。

流式细胞仪共享平台建设与标准化管理探索

生物学国家级实验教学示范中心利用现代化预约管理系统,将学院的流式细胞仪纳入统一管理,探讨流式细胞仪共享平台建设及其标准化管理。实践表明,流式细胞仪数据的准确性和可重复性得到有力保障,仪器利用率提升和使用寿命延长,有助于学生掌握流式技术和研究方法,充分发挥了流式细胞仪对科研和教学的支撑作用。

流式细胞仪检测香花油茶、越南油茶基因组大小方法的建立及应用

为香花油茶(Camellia osmantha)、越南油茶(C. vietnamensis)优良品系基因组大小遗传多样性分析及特异种质筛选、倍性差异分析提供参考,针对解离液种类、内参植物、试验材料组织器官等关键环节,以细胞核解离情况、次生代谢物质降解情况、细胞峰出峰稳定情况、主峰清晰程度、主杂峰分离程度、取材容易程度、内参与待测样品基因组大小差异情况、基因组大小测定准确性及变异系数等方面为评价指标,构建基于香花油茶良种义禄(Camellia osmantha var. Yilu)、越南油茶优良品系鸿鸪23(C. vietnamensis var. Hongu 23)为试材的流式细胞术基因组大小检测技术体系,并用于香花油茶、越南油茶优良品系的测定。结果表明:研究发现4种常见的解离液WPB、Tris-MgCl2、OTTO、mGb中WPB、mGb解离效果较好,内参植物以豌豆、玉米为优先,试验材料组织器官以嫩叶或根尖为宜;香花油茶优良品系基因组大小在5.12~9.31 Gb之间变化,均值为7.60 Gb,1号、37号、45号种质在基因组大小分布上存在极端性,推测其存在倍性差异或其亲本间存在种间杂交;越南油茶优良品系基因组大小在9.17~9.85Gb之间变化,均值为9.47 Gb。香花油茶与越南油茶优良品系群体间在基因组大小上存在明显差异。

流式细胞术检测荧光素标记结核杆菌的方法

目的:建立流式细胞术检测荧光素标记结核杆菌(M.tb)的方法。方法:以异硫氰酸荧光素(FITC)、二乙酸荧光素(FDA)、PKH26和碘化丙啶(PI)标记M.tb,应用流式细胞仪检测M.tb标记率。结果:FITC标记M.tb,在PBS缓冲液中,不同浓度FITC(10~40μg/ml)标记率随浓度增加而增高,FITC浓度10μg/ml标记率为85%,FITC浓度增加到40μg/ml标记率可达到93%,差异具有统计学意义(P<0.05);而在CB缓冲液中,不同浓度FITC(10~40μg/ml)标记M.tb标记率均在90%左右,差异无统计学意义(P>0.05)。FDA标记M.tb标记率均达到92%以上。PKH26标记M.tb标记率均达到90%以上。PI标记M.tb,酒精作用1 min标记率在47%左右,酒精作用2 min标记率达到97%左右,且标记率随时间增加而增高(P<0.05)。结论:建立流式细胞术检测荧光素标记M.tb的方法可为结核病基础研究提供实验思路。创新性建立应用荧光素FITC、FDA、PKH26、PI标记M.tb,并利用流式细胞术检测标记率,可为结核病基础研究提供实验思路。

流式细胞分选仪研究进展与展望

流式细胞技术一直是生物细胞研究的重要手段,近年来流式细胞分选仪在细胞富集、筛选后再利用等方面的应用使得对能够满足高通量、高细胞信息提取、高细胞活性要求的流式细胞分选仪的需求增加。本文阐述基于光学探测方法的流式细胞分选仪结构、工作原理及其发展现状出发;提出在光学流式细胞分选仪研究领域出现无标记化和微流控芯片化两种新的发展趋势。在两种发展趋势下,无标记成像方法、微流控片上分选系统和片上压电致动器集成分选等新兴技术越来越多地应用到光学流式细胞分选仪的研发设计中,本文从技术特性、性能优势、应用前景等方面对这些技术的研究进展以及面临的挑战进行了总结和展望,供流式细胞分选技术的使用者及研究者参考。

流式细胞仪在细胞绝对计数方法中的应用及其进展

细胞绝对计数是一项重要的实验参数,对于医学研究以及临床检验等方面具有重要的作用。细胞绝对计数的发展从使用血细胞计数板到应用流式细胞仪,已衍生出多种方法。本文将阐述不同的细胞绝对计数方法,比较不同方法的原理及优缺点,为医学研究以及临床检验等方面选择适宜的绝对细胞计数方法提供参考。

流式细胞仪(BD FACSCalibur)的管理和维护

本文主要通过对流式细胞仪的结构和工作原理的介绍,了解流式细胞仪在科研和临床各个领域的应用,通过新、老流式细胞仪对同样样品检测,简明扼要地论述了对仪器的精心管理和维护,延长仪器的使用寿命,确保科研的准确性。