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我国沿海多鳞四指马[鱼友]群体遗传多样性的fAFLP分析
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作者 赵优 张涛 +1 位作者 赵峰 庄平 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2024年第1期53-62,共10页
为了解多鳞四指马[鱼友](Eleutheronema rhadinum)的遗传多样性信息,采用荧光标记扩增片段长度多态性技术(fluorescent amplified fragment length polymorphism,fAFLP)对多鳞四指马[鱼友]8个地理群体214个样本进行扩增和遗传结构分析... 为了解多鳞四指马[鱼友](Eleutheronema rhadinum)的遗传多样性信息,采用荧光标记扩增片段长度多态性技术(fluorescent amplified fragment length polymorphism,fAFLP)对多鳞四指马[鱼友]8个地理群体214个样本进行扩增和遗传结构分析。结果显示:用9对引物组合共扩增位点493条,其中多态性位点为443条,多态性比例为89.86%;8个地理群体观测等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Nei多样性指数(H)、Shannon信息指数(I)平均值分别为1.6790、1.4672、0.2508和0.3631;群体遗传多样性高低依次为舟山>崇明>启东>东山>广州>湛江>琼海>高雄。应用AMOVA对8个群体的遗传变异来源进行分析得出,总的遗传分化指数F_(st)为0.2372,表明23.72%遗传变异来自于群体间。8个地理群体遗传距离(D)在0.0216~0.1944之间;相似系数(H)在0.8234~0.9786之间,UPGMA聚类得出多鳞四指马[鱼友]群体可划分为4个分支。研究结果可为合理评估和保护多鳞四指马[鱼友]资源、开展遗传育种及开发人工养殖技术等提供基础资料。 展开更多
关键词 多鳞四指马[鱼友] faflp 种质资源 遗传多样性 聚类分析
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广西文蛤(Meretrix)的fAFLP及ITS分析 被引量:14
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作者 林志华 黄晓婷 +2 位作者 董迎辉 包振民 胡景杰 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期33-41,共9页
利用fAFLP标记技术和PCR-RFLP技术,对采集于广西的形态和壳色变异很大的2个文蛤群体(G、W)以及山东文蛤(S)群体进行了遗传结构和亲缘关系研究。fAFLP分析显示:在457个总扩增位点中存在53个W群体的特异性位点(其中9个为100%显性)、21个G... 利用fAFLP标记技术和PCR-RFLP技术,对采集于广西的形态和壳色变异很大的2个文蛤群体(G、W)以及山东文蛤(S)群体进行了遗传结构和亲缘关系研究。fAFLP分析显示:在457个总扩增位点中存在53个W群体的特异性位点(其中9个为100%显性)、21个G群体的特异性位点、14个S群体的特异性位点,这些位点可作为群体鉴别的特征性标记;通过计算群体间相对遗传距离和聚类分析,发现S和G间的遗传距离最小(0.0424),在系统树上首先聚在一起,而W与S、G的相对遗传距离均很大(0.2308和0.2305),单独分出一支。对文蛤核糖体ITS的PCR-RFLP结果显示:W的三个不同壳色类群(WX、WC、WH)的酶切结果完全一致,而与G和S群体差别较大;G和S群体基本一致,但也稍有差别。进一步的ITS序列分析显示:W的ITS序列长度为1266—1269bp,而G和S分别为1614bp和1520bp;W群体内部序列比较保守,而与G和S群体之间在ITS1和ITS2开始和结尾处均存在多处插入/缺失;在依据序列构建的系统树上,WX、WC、WH三个类群聚在一起,S和G聚为另一支,两支相距甚远。本研究结果表明,fAFLP标记分析、PCR-RFLP分析和ITS序列分析结果一致,W群体和G、S群体的差异较大,已超出种内群体间的遗传变异,S和G尽管存在遗传分化,但仍应同属Meretrix meretrix一个物种。 展开更多
关键词 文蛤 faflp ITS PCR-RFLP 遗传结构 亲缘关系
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帘蛤科4种养殖蛤群体遗传多样性和种间关系的fAFLP分析 被引量:8
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作者 彭永兴 程汉良 +4 位作者 夏德全 吴婷婷 孟学平 吉红九 董志国 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期45-51,共7页
利用荧光标记扩增片段长度多态性(fAFLP)技术对文蛤(Meretrix meretrix)、青蛤(Cyclina sinensis)、菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)和硬壳蛤(Mercenaria mercenaria)4种帘蛤科贝类的群体遗传多样性和种间关系进行了研... 利用荧光标记扩增片段长度多态性(fAFLP)技术对文蛤(Meretrix meretrix)、青蛤(Cyclina sinensis)、菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)和硬壳蛤(Mercenaria mercenaria)4种帘蛤科贝类的群体遗传多样性和种间关系进行了研究。选择EcoRⅠ/MseⅠ进行酶切,使用6个E+3/M+3引物组合进行扩增,共获得1096个位点,多态位点比率95.1%,片段长度50-456bp。其中,文蛤、青蛤、菲律宾蛤仔和硬壳蛤分别得到681,715,702和694个位点,相应的多态位点比率为76.8%,81.7%,83.0%和75.1%,得到17个种特异性位点,可作为4物种特征标记。分析了群体遗传相似系数和遗传多样性指数以及种间遗传相似系数。结果表明,硬壳蛤群体遗传相似系数最高(0.6709),遗传多样性指数最低(0.2360);菲律宾蛤仔群体遗传相似系数最低(0.5925),遗传多样性指数最高(0.2618);根据遗传相似系数采用UPGMA法构建了4物种32个体的聚类图,表明文蛤与菲律宾蛤仔遗传关系最近,青蛤与其他3物种遗传关系较远。 展开更多
关键词 荧光标记扩增片段长度多态性(faflp) 遗传多样性 帘蛤科(Veneridae) 分子标记 系统发育分析 物种鉴定
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大黄鱼(Larimichthys crocea)fAFLP方法的建立 被引量:1
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作者 杨洁 武祥伟 +2 位作者 刘贤德 谢仰杰 王志勇 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第1期1-7,共7页
以大黄鱼为材料,探索及优化了影响荧光标记AFLP(fAFLP)分析体系的主要因素.结果表明:内切酶EcoRⅠ与MseⅠ各0.35 U,双酶切350 ng大黄鱼基因组DNA,依次反应4 h可得最佳效果;T4DNA连接酶2.5 U,16℃过夜连接3μL酶切产物与接头时效果最佳;... 以大黄鱼为材料,探索及优化了影响荧光标记AFLP(fAFLP)分析体系的主要因素.结果表明:内切酶EcoRⅠ与MseⅠ各0.35 U,双酶切350 ng大黄鱼基因组DNA,依次反应4 h可得最佳效果;T4DNA连接酶2.5 U,16℃过夜连接3μL酶切产物与接头时效果最佳;以1μL连接产物作底物,EcoRⅠ与MseⅠ预扩引物分别为0.3μmol/L与1.5μmol/L时预扩效果最佳;预扩产物稀释超过100倍作为选择性扩增的模板时致使某些样品的电泳条带缺失.使用该体系分析了一个野生大黄鱼群体的AFLP片段的多态水平,结果证明该方法简便有效,可用于群体遗传多态性分析. 展开更多
关键词 大黄鱼 faflp 反应体系 优化
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企鹅珍珠贝不同地理群体遗传多样性的fAFLP分析 被引量:13
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作者 彭敏 陈秀荔 +2 位作者 蒋伟明 杨春玲 李咏梅 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期102-108,共7页
为阐明企鹅珍珠贝(Pteria penguin)不同地理种群的遗传多样性机制,采用荧光标记扩增片段长度多态性(fAFLP)技术分析了企鹅珍珠贝广西涠洲岛、广东流沙湾和海南黎安3个不同地理群体的遗传多样性。选取7对引物组合对90个个体(每个群体30个... 为阐明企鹅珍珠贝(Pteria penguin)不同地理种群的遗传多样性机制,采用荧光标记扩增片段长度多态性(fAFLP)技术分析了企鹅珍珠贝广西涠洲岛、广东流沙湾和海南黎安3个不同地理群体的遗传多样性。选取7对引物组合对90个个体(每个群体30个)进行fAFLP扩增,结果发现每个个体均能扩增出清晰的、可重复的扩增条带,每对引物的扩增位点数在100—163之间,共得到895个扩增位点,多态位点数为865个;涠洲岛、流沙湾和黎安群体的多态位点比例分别为70.73%、63.13%、66.82%。Nei遗传多样性指数为0.1634、0.1558、0.1783,Shannon遗传多样性指数为0.2635、0.2474、0.2932。3个群体间遗传相似度在0.9722—0.9824之间,遗传距离在0.0177—0.0282之间。根据遗传距离绘制UPGMA聚类图,但Mantel检验结果显示企鹅珍珠贝三群体间的遗传距离与地理距离之间无显著相关。Shannon遗传多样性指数和AMOVA分析,结果均显示企鹅珍珠贝的遗传变异主要来源于群体内个体间,7.91%的遗传变异来自群体间,92.09%的遗传变异来自群体内。分析群体的显性基因型频率分布和基因流Nm发现3个群体有基本相同的遗传结构,有明显的基因交流。研究结果表明北海涠洲岛群体、湛江流沙湾群体和海南黎安群体的企鹅珍珠贝种质有较高的多态位点比例,但未发生显著地理分化。这一结果为我国企鹅珍珠贝的良种选育以及种质资源保护措施的制定提供了参考依据。 展开更多
关键词 企鹅珍珠贝野生群体 荧光标记扩增片段长度多态性 遗传多样性
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肉牛屠宰过程中分离出沙门氏菌的FAFLP分子溯源分析 被引量:4
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作者 董鹏程 张一敏 +5 位作者 毛衍伟 梁荣蓉 牛乐宝 李玉林 朱立贤 罗欣 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第9期31-37,共7页
为确定沙门氏菌在宰前、屠宰过程中的污染情况,明确沙门氏菌在厂内发生污染的主要环节,为工厂中沙门氏菌的控制提供数据支持,本研究采用荧光扩增长度多态性(FAFLP)的方法对屠宰过程中7个工序分离出的7种不同血清型共计83株沙门氏菌进行... 为确定沙门氏菌在宰前、屠宰过程中的污染情况,明确沙门氏菌在厂内发生污染的主要环节,为工厂中沙门氏菌的控制提供数据支持,本研究采用荧光扩增长度多态性(FAFLP)的方法对屠宰过程中7个工序分离出的7种不同血清型共计83株沙门氏菌进行分子分型。结果显示83株沙门氏菌在0.83的相似度下划分为6个大群,与血清型呈现一定的联系。以0.86的相似度进行溯源,发现FAFLP较血清分型具备更高的灵敏度,与前期的流行率的调查数据吻合。溯源结果表明沙门氏菌在肉牛皮毛、粪便中存在较为严重的交叉污染现象,同时部分粪便、皮毛分离出的沙门氏菌穿过了屠宰企业的防控屏障,对工厂内部的胴体造成了污染。肉牛屠宰加工企业应注重宰前动物的规范化管理,减少宰前交叉污染对工厂内部干预措施的压力,同时应增加必要的危害控制点,以降低沙门氏菌检出的风险。 展开更多
关键词 沙门氏菌 faflp 溯源分析 肉牛屠宰
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出口特产果品京东板栗遗传多样性fAFLP分析
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作者 赵优 李家侨 张娜 《中国口岸科学技术》 2023年第10期79-84,共6页
本文采用荧光标记扩增片段长度多态性技术(fluorescent amplified fragment length polymorphism,fAFLP)对燕山地区出口特产果品京东板栗的10个群体269个样本进行遗传多样性分析。结果显示,共扩增位点383个,位点大小在70~500 bp范围内,... 本文采用荧光标记扩增片段长度多态性技术(fluorescent amplified fragment length polymorphism,fAFLP)对燕山地区出口特产果品京东板栗的10个群体269个样本进行遗传多样性分析。结果显示,共扩增位点383个,位点大小在70~500 bp范围内,其中多态性位点为314个,多态性比例为81.89%;10个群体观测等位基因数、有效等位基因数、Nei’s多样性指数、Shannon信息指数平均值分别为1.4573±0.0905、1.3101±0.0611、0.1702±0.0297和0.2514±0.0487;10个地理群体遗传距离在0.0454~0.1563之间,相似系数在0.8234~0.9786之间,UPGMA聚类得出京东板栗亲缘关系图谱。研究我国主要出口京东板栗群体的遗传结构,以期为合理评估和保护其种质资源、开展遗传育种以及提升产品品质维护板栗国际市场声誉提供基础资料。 展开更多
关键词 京东板栗 荧光标记扩增片段长度多态性技术 遗传多样性 聚类分析
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FAFLP技术及其在细菌学研究中的应用 被引量:1
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作者 裴德翠 杨瑞馥 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2003年第5期377-380,共4页
荧光素标记的选择性扩增片段长度多态性 (fluorescentamplifiedfragmentlengthpolymorphism ,FAFLP)分析是一种用荧光素标记引物扩增已知酶切位点和接头DNA片段的指纹图技术 ,具有快速、简便、价廉、分辨率高、重复性好和污染少的特点... 荧光素标记的选择性扩增片段长度多态性 (fluorescentamplifiedfragmentlengthpolymorphism ,FAFLP)分析是一种用荧光素标记引物扩增已知酶切位点和接头DNA片段的指纹图技术 ,具有快速、简便、价廉、分辨率高、重复性好和污染少的特点。该方法已被成功地应用于植物学、动物学、法医学、微生物学等领域 ,是目前微生物流行病学调查、鉴定、分型和遗传分析中较为理想的分子生物学方法。本文主要介绍了FAFLP技术的原理、方法及其在微生物学中的应用。 展开更多
关键词 faflp技术 细菌学 荧光素标记 DNA指纹法
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采用FAFLP对屠宰场鸡胴体分离的空肠弯曲菌的分子分型和溯源分析 被引量:2
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作者 胡冬梅 王明忠 +5 位作者 曲萍 孙雨 董浩 赵柏林 王晓英 孙爱萍 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期94-98,共5页
目的对中国部分省份屠宰场鸡胴体分离的空肠弯曲菌进行分子分型和溯源分析。方法采用荧光标记扩增片段长度多态性技术(FAFLP),对72株空肠弯曲菌分离株进行分子分型,选用HindⅢ和HhaⅠ限制性内切酶进行双酶切,电泳结果经Gene Marker V1.8... 目的对中国部分省份屠宰场鸡胴体分离的空肠弯曲菌进行分子分型和溯源分析。方法采用荧光标记扩增片段长度多态性技术(FAFLP),对72株空肠弯曲菌分离株进行分子分型,选用HindⅢ和HhaⅠ限制性内切酶进行双酶切,电泳结果经Gene Marker V1.80处理后,导入Bio Numerics软件进行聚类分析,所得结果收入溯源分析数据库。结果 72株空肠弯曲菌分离株共产生241条多态性片段,多数在80~100条;72株菌共产生72种带型,分辨率为100%;以70%相似度为界,可以分为11个群,群间最低相似度为56.9%,群内最高相似度为94.9%。以80%相似度为界,可将A群分为5个亚群,B群分为15个亚群,多个亚群所包含菌株显示有完全地域同源性。结论 FAFLP方法分辨率高,聚类分析显示有一定同源性,适用于空肠弯曲菌的分子分型和溯源分析。 展开更多
关键词 荧光标记扩增片段长度多态性技术 空肠弯曲菌 屠宰场 鸡胴体分子分型和溯源
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兔荧光扩增片段长度多态性分析体系的建立 被引量:2
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作者 郭雄明 任文陟 张嘉保 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2007年第3期199-200,共2页
目的:建立兔荧光扩增片段长度多态性(fluorescent amplification fragment length polymorphism,fAFLP)分析方法并对其在实验动物科学中应用进行探讨。方法:本实验以5个品种(系)兔为实验材料,对DNA提取、预扩增和选择性扩增等步骤进行... 目的:建立兔荧光扩增片段长度多态性(fluorescent amplification fragment length polymorphism,fAFLP)分析方法并对其在实验动物科学中应用进行探讨。方法:本实验以5个品种(系)兔为实验材料,对DNA提取、预扩增和选择性扩增等步骤进行优化并对结果进行检测。结果:5个品种(系)兔的扩增片段数均在120条以上,各品种(系)特异性条带均能找出,5个品种(系)兔能据此进行区分。结论:fAFLP是一种以PCR为基础的DNA指纹技术,为兔的指纹分析提供了一种快速高效的方法,可用于兔的遗传质量检测。 展开更多
关键词 AFLP faflp DNA指纹法
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鼠疫耶尔森氏菌荧光标记扩增片段长度多态性分型方法 被引量:5
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作者 裴德翠 庞昕 +6 位作者 宋亚军 翟俊辉 陈泽良 刘海洪 郭兆彪 王津 杨瑞馥 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期258-261,共4页
目的建立荧光标记扩增片段长度多态性(FAFLP)技术平台,探讨鼠疫菌基因分型。方法用5种核酸限制性内切酶消化鼠疫菌基因组DNA,选择最佳内切酶组合,酶切片段经接头连接后,用荧光素标记的5条EcoRⅠ引物和9条MseⅠ引物组成的引物配对扩增,... 目的建立荧光标记扩增片段长度多态性(FAFLP)技术平台,探讨鼠疫菌基因分型。方法用5种核酸限制性内切酶消化鼠疫菌基因组DNA,选择最佳内切酶组合,酶切片段经接头连接后,用荧光素标记的5条EcoRⅠ引物和9条MseⅠ引物组成的引物配对扩增,选择最佳引物组合,进行系列PCR条件的优化。扩增产物经ABI PRISM 3100 Genetic Analyzer(遗传分析仪)检测,GeneScan等软件进行分析。结果成功建立FAFLP技术平台。结论FAFLP具有快速、简便、廉价、分辨率高、重复性好和污染少的优点,可用于鼠疫菌的基因分型分析。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森氏菌 荧光标记扩增片段长度多态性 基因分型 聚合酶链反应
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利用OneMap软件构建鲤遗传连锁图谱 被引量:6
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作者 高国强 常玉梅 +1 位作者 匡友谊 梁利群 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期649-655,共7页
首次使用R环境中的OneMap软件包,以荷包红鲤抗寒品系(♂)和云南大头鲤(♀)为祖父母本所培育的110个F2个体为作图群体,以荧光扩增片段长度多态性(fluorescent amplification fragment length polymorphism,fAFLP)为主要分子标记,采用远... 首次使用R环境中的OneMap软件包,以荷包红鲤抗寒品系(♂)和云南大头鲤(♀)为祖父母本所培育的110个F2个体为作图群体,以荧光扩增片段长度多态性(fluorescent amplification fragment length polymorphism,fAFLP)为主要分子标记,采用远交全同胞家系模型构建鲤的遗传连锁图谱。结果显示,110个F2个体中共产生1513个清晰的fAFLP标记,其中多态性标记911个;另开发多态性的EST标记12个,最后总计923个标记用于构建遗传连锁图谱;采用OneMap软件包构建的遗传图谱含有238个fAFLP标记和8个EST标记分布在50个连锁群上,总图距为2876.64cM,标记间平均间距为14.68cM,图谱覆盖率为66.56%。 展开更多
关键词 遗传连锁图谱 荧光扩增片段长度多态性 OneMap
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Molecular Genetic Diversity in Iranian Populations of <i>Puccinia triticina</i>, the Causal Agent of Wheat Leaf Rust 被引量:1
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作者 Seyed Taha Dadrezaie Samer Lababidi +5 位作者 Kumarse Nazari Ebrahim Mohammadi Goltapeh Farzad Afshari Fida Alo Masoud Shams-Bakhsh Naser Safaie 《American Journal of Plant Sciences》 2013年第7期1375-1386,共12页
Wheat leaf rust caused by Puccinia triticina, is the most common and widely distributed wheat rust in the world. In order to study the genetic structure of leaf rust population 14 pairs of AFLP and 6 pairs of FAFLP pr... Wheat leaf rust caused by Puccinia triticina, is the most common and widely distributed wheat rust in the world. In order to study the genetic structure of leaf rust population 14 pairs of AFLP and 6 pairs of FAFLP primers evaluated on 86 isolates samples collected in Iran during spring of 2009. Results showed that almost all investigated isolates were genetically different and special pattern of AFLP allele’s that confirm high genetic diversity within leaf rust population was observed. Analyses showed, all provinces were classified into three major groups particularly similar clusters were found between then neighboring provinces. Rust spore can follow the migration pattern in short and long distances to neighbor in provinces. Results indicated that the greatest variability was revealed by 97% of genetic differentiation within leaf rust populations and the lesser variation of 3% was observed between the rust populations. These results suggested that each population was not completely identical and high gene flow has occurred among the leaf rust population of different provinces. The highest differentiation and genetic distance among the Iranian leaf rust populations was detected between leaf rust population in Sistan and Baluchistan and highest similarity was observed between in Ardabil provinces. The high pathogenic variability of leaf rust races in Ardabil and Northern Khorasan may be an indication that these two regions are the center of origin of pathogenic arability. Present study shows that leaf rust population in Iran is highly dynamic and variable. 展开更多
关键词 Leaf RUST Gene Resistance Genetic Diversity PUCCINIA triticina AFLP and faflp MARKERS
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椰毒假单胞菌酵米面亚种荧光标记扩增片段长度多态性分型方法的建立 被引量:3
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作者 王岗 郭云昌 +6 位作者 杜春明 付萍 李薇薇 赵悦 刘秀梅 杨大进 裴晓燕 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2013年第2期125-131,共7页
目的建立椰毒假单胞菌酵米面亚种荧光标记扩增片段长度多态性(FAFLP)分型方法,并对4株模式菌株和19株分离菌株进行分型。方法选用4种低频限制性内切酶(ApaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和PstⅠ)和2种高频限制性内切酶(MseⅠ和TaqⅠ)进行组合,对FA... 目的建立椰毒假单胞菌酵米面亚种荧光标记扩增片段长度多态性(FAFLP)分型方法,并对4株模式菌株和19株分离菌株进行分型。方法选用4种低频限制性内切酶(ApaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和PstⅠ)和2种高频限制性内切酶(MseⅠ和TaqⅠ)进行组合,对FAFLP预扩增和选择性扩增体系进行优化,用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析,并与VITEK 2 GN生化结果和16S rDNA序列分析进行比较。结果 ApaⅠ-G/TaqⅠ-G组合将19株椰毒假单胞菌酵米面亚种分为7个群,菌株间最低相似度为80.85%,最高相似度为98.77%。PstⅠ-T/TaqⅠ-G组合将19株椰毒假单胞菌酵米面亚种分为10个群,菌株间最低相似度为48.68%,最高相似度为99.67%。两种FAFLP组合均能将菌株进行完全区分,而VITEK 2 GN和16S rDNA序列分析无法将菌株进行完全区分。结论 ApaⅠ-G/TaqⅠ-G组合与PstⅠ-T/TaqⅠ-G组合FAFLP对椰毒假单胞菌酵米面亚种具有足够的分辨率,本研究建立的FAFLP分型方法可应用于椰毒假单胞菌酵米面亚种的分子分型和溯源。 展开更多
关键词 椰毒假单胞菌酵米面亚种 荧光标记扩增片段长度多态性(faflp) 分子分型 食源性致病菌 食品安全
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