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雷公藤红素通过FAK/MEK/ERK信号通路对肝癌细胞耐药性的影响
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作者 罗晓明 曾贤敏 +1 位作者 蔡良韧 郑新 《中国药房》 CAS 北大核心 2024年第20期2477-2481,共5页
目的探究雷公藤红素(CSL)对肝癌细胞耐药性的影响。方法采用仑伐替尼(Len)构建耐药人肝癌细胞Huh7/Len,分为对照组,CSL低、中、高浓度组(1、2.5、5μmol/L),CSL高浓度+Zn27[黏着斑激酶(FAK)激活剂]组(5μmol/L CSL+2 nmol/L Zn27),每组... 目的探究雷公藤红素(CSL)对肝癌细胞耐药性的影响。方法采用仑伐替尼(Len)构建耐药人肝癌细胞Huh7/Len,分为对照组,CSL低、中、高浓度组(1、2.5、5μmol/L),CSL高浓度+Zn27[黏着斑激酶(FAK)激活剂]组(5μmol/L CSL+2 nmol/L Zn27),每组设置6个复孔。检测细胞增殖(以吸光度计)和克隆能力、凋亡率、侵袭数、迁移数,以及细胞中活性氧(ROS)水平和磷酸化FAK(p-FAK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶(p-MEK)、磷酸化胞外信号调节激酶(p-ERK)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达。结果与对照组比较,CSL低、中、高浓度组细胞的吸光度、克隆数、侵袭数、迁移数和p-FAK、p-MEK、p-ERK、Bcl-2蛋白相对表达量均显著降低,细胞凋亡率、ROS水平和Bax、caspase-3蛋白相对表达量均显著升高,且呈浓度依赖性(P<0.05);与CSL高浓度组比较,CSL高浓度+Zn27组细胞中上述指标变化均显著逆转(P<0.05)。结论CSL能增强氧化应激,促进细胞凋亡,抑制肝癌细胞恶性进展和化疗耐药性,其机制可能与抑制FAK/MEK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 雷公藤红素 肝癌 fak/MEK/erk信号通路 恶性进展 耐药性
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JAM-A通过调控FAK/ERK信号通路对宫颈癌细胞进展的影响
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作者 赵晨阳 彭丽秀 +5 位作者 邓赫男 谭琛 张玮 何昌晖 邓美林 李琼 《中国优生与遗传杂志》 2023年第9期1760-1766,共7页
目的 探讨连接黏附分子A(JAM-A)在宫颈癌细胞进展中的作用及其潜在分子机制。方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测JAM-A在宫颈癌患者癌组织中的表达水平。将Vector、pcDNA-JAM-A、NC-siRNA、JAM-A-siRNA质粒分别转染至宫颈癌细胞中,C... 目的 探讨连接黏附分子A(JAM-A)在宫颈癌细胞进展中的作用及其潜在分子机制。方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测JAM-A在宫颈癌患者癌组织中的表达水平。将Vector、pcDNA-JAM-A、NC-siRNA、JAM-A-siRNA质粒分别转染至宫颈癌细胞中,CCK-8检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Western blotting分别检测细胞中JAM-A、PCNA、MMP-2、E-cadherin及FAK/ERK通路蛋白的水平。进行裸鼠皮下成瘤实验,检测JAM-A对宫颈癌细胞体内肿瘤生长的影响。结果 与癌旁组织比较,宫颈癌组织中JAM-A mRNA和蛋白水平均显著上调。过表达JAM-A可显著增强细胞增殖、侵袭和迁移能力,升高JAM-A、PCNA、MMP-2蛋白表达,降低E-cadherin蛋白表达。敲低JAM-A可显著抑制细胞增殖、侵袭和迁移能力,降低JAM-A、PCNA、MMP-2蛋白表达,升高E-cadherin蛋白表达。pcDNA-JAM-A+PF-562271组细胞中p-ERK2蛋白表达较pcDNA-JAM-A+Vehicle组显著降低。pcDNA-JAM-A组裸鼠皮下肿瘤的质量和体积较Vector组显著增加。结论 过表达JAM-A通过调控FAK-ERK2信号通路促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 连接黏附分子A 宫颈癌 侵袭 迁移 fak/erk信号通路
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悬浮培养GLC-82肺肿瘤细胞积聚体与蛋白激酶FAK、AKT、ERK和SRC活化的关系 被引量:3
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作者 方翼 张星 +1 位作者 张积仁 姜文奇 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1206-1212,共7页
背景与目的:蛋白激酶FAK部分介导肿瘤细胞在悬浮培养下细胞积聚体的形成,从而阻止细胞发生凋亡和促进细胞增殖,但是参与细胞积聚体形成的FAK下游通路尚不清楚。本研究旨在研究蛋白激酶FAK及其可能的下游分子ERK、AKT和SRC活化在悬浮状... 背景与目的:蛋白激酶FAK部分介导肿瘤细胞在悬浮培养下细胞积聚体的形成,从而阻止细胞发生凋亡和促进细胞增殖,但是参与细胞积聚体形成的FAK下游通路尚不清楚。本研究旨在研究蛋白激酶FAK及其可能的下游分子ERK、AKT和SRC活化在悬浮状态肺癌GLC-82细胞积聚中的作用。方法:用polyHEMA悬浮培养观察肺正常细胞HBE和肿瘤细胞GLC-82积聚体形态;细胞凋亡用DNA琼脂糖凝胶电泳检测梯状DNA分析;细胞转化能力用软琼脂糖集落形成实验分析;磷酸化蛋白激酶水平用免疫印迹实验检测;RNA干扰实验降低FAK蛋白水平的表达。结果:GLC-82肺腺癌细胞在polyHEMA悬浮状态下能够存活和形成积聚体,肺正常细胞HBE在polyHEMA悬浮状态下发生凋亡和不形成积聚体。磷酸化FAK、ERK、AKT和SRC的水平和GLC-82积聚体有关。沉默FAK蛋白的表达,能够部分地阻断肿瘤细胞积聚体的形成,降低磷酸化ERK和AKT水平,以及降低软琼脂集落形成能力。FAKRNA干扰前后的GLC-82细胞软琼脂集落形成率分别为(12.2±1.1)%和(3.6±0.7)%(P=0.001)。结论:GLC-82肺癌细胞积聚体的形成部分由FAK信号通路介导,ERK和AKT是FAK的下游通路蛋白。 展开更多
关键词 肺肿瘤 GLC-82细胞株 细胞积聚体 fak erk AKT SRC 信号转导
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淫羊藿素通过调控黏着斑激酶及下游细胞外信号调节激酶/细胞周期蛋白D1和蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素蛋白信号通路抑制肝癌细胞增殖的作用机制研究
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作者 李珍 高寒 +4 位作者 赵永康 王梓萱 王婧筱 王伽伯 宋鑫华 《环球中医药》 CAS 2023年第12期2401-2407,共7页
目的探究淫羊藿素(icaritin,ICA)抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法以Huh7肝癌细胞为研究对象并在体外培养;设置200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μmol/L不同浓度的ICA给药干预72小时之后,采用0.5%结晶紫染色分析ICA对Huh7肝癌细胞... 目的探究淫羊藿素(icaritin,ICA)抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法以Huh7肝癌细胞为研究对象并在体外培养;设置200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μmol/L不同浓度的ICA给药干预72小时之后,采用0.5%结晶紫染色分析ICA对Huh7肝癌细胞生存的影响;将Huh7肝癌细胞给与ICA高(10μmol/L)、中(5μmol/L)、低(2.5μmol/L)三个浓度,每个浓度设置三个复孔,通过克隆形成实验检测ICA对Huh7肝癌细胞增殖能力的影响;Huh7肝癌细胞给与ICA IC 50值浓度,对照孔及ICA给药孔分别在0、6、12、24小时在倒置显微镜下拍照,通过细胞划痕分析ICA对肝癌细胞迁移能力的影响;并且用流式细胞术对细胞周期进行分析。另外,通过蛋白印迹对增殖相关蛋白,如增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、磷酸化黏着斑激酶(phosphorylated focal adhesion kinase,p-FAK)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated protein kinase,p-ERK)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)等蛋白的表达水平进行分析。结果ICA可以明显抑制肝癌细胞的增殖及迁移能力,并且使肝癌细胞的细胞周期在G1期发生阻滞(P<0.05)。另外,研究发现ICA可以下调p-FAK及其下游调节蛋白p-ERK、cyclin D1以及p-Akt、p-mTOR、p-S6的表达水平。结论ICA可能通过调控FAK及下游ERK/cyclin D1和Akt/mTOR信号通路从而抑制肝癌细胞的增殖生长。 展开更多
关键词 肝细胞癌 淫羊藿素 黏着斑激酶 细胞外信号调节激酶 细胞周期蛋白D1 蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
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整合素α5β1介导的粘着斑激酶和细胞外信号调节激酶信号传导通路对K562细胞增殖的影响 被引量:5
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作者 牛志云 成志勇 +3 位作者 刘英杰 索晓惠 张学军 潘崚 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期728-732,共5页
【目的】分析整合素α5β1介导的粘着斑激酶(FAK)和细胞外信号调节激酶(ERK)信号转导通路对K562细胞增殖的影响,并初步探讨其作用机制。【方法】应用四甲基偶氮唑蓝染色法(MTT)检测抗整合素α5β1单抗(Anti-α5β1)对K562细胞增殖的抑... 【目的】分析整合素α5β1介导的粘着斑激酶(FAK)和细胞外信号调节激酶(ERK)信号转导通路对K562细胞增殖的影响,并初步探讨其作用机制。【方法】应用四甲基偶氮唑蓝染色法(MTT)检测抗整合素α5β1单抗(Anti-α5β1)对K562细胞增殖的抑制作用,应用反转录PCR(RT-PCR)和蛋白印迹(western blot)方法检测FAK和ERK的mRNA和蛋白表达水平的改变。【结果】Anti-α5β1明显抑制K562细胞的增殖,下调细胞内总FAK及ERK的mRNA和蛋白表达,并抑制其磷酸化水平。【结论】整合素α5β1介导的FAK-ras-ERK信号转导通路可能参与了K562细胞的增殖调控,阻断此通路可明显抑制K562细胞的增殖。 展开更多
关键词 整合素 K562细胞 粘着斑激酶 细胞外信号调节激酶
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黄芩素对人口腔鳞癌细胞增殖和侵袭的作用及其机制 被引量:5
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作者 王根桃 黄松 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期536-540,共5页
目的:研究黄芩素(BAI)抑制口腔鳞癌细胞(TCA8113)增殖与侵袭及与ERK-FAK的可能关系。方法:本研究分为两次实验,每次实验有4个组:control,20μmol/L BAI,40μmol/L BAI,80μmol/L BAI; control,40μmol/L BAI,MEK抑制剂(0.33 nmol/L),ME... 目的:研究黄芩素(BAI)抑制口腔鳞癌细胞(TCA8113)增殖与侵袭及与ERK-FAK的可能关系。方法:本研究分为两次实验,每次实验有4个组:control,20μmol/L BAI,40μmol/L BAI,80μmol/L BAI; control,40μmol/L BAI,MEK抑制剂(0.33 nmol/L),MEK抑制剂(0.33 nmol/L)+40μmol/L BAI。每组3个复孔,各组分别处理24 h和48 h。利用CCK8实验检测黄芩素对口腔鳞癌细胞的增殖抑制作用;半定量PCR及Western blot分析黄芩素对E-cadherin和Vimentin的影响;利用Western blot分析黄芩素对ERK,p-ERK,FAK以及p-FAK的调节作用;采用MEK抑制剂(U0126),利用Western blot分析其对黄芩素的调控作用。结果:黄芩苷处理组的细胞增殖率明显低于对照组(P<0.01);黄芩素处理组对E-cadherin的mRNA和蛋白水平的上调作用明显高于对照组,对Vimen-tin的mRNA和蛋白水平的下调作用也明显低于对照组(P<0.01);黄芩素处理组的p-ERK和p-FAK的蛋白水平明显低于对照组(P<0.01),但总的ERK与FAK的蛋白水平与对照组相比没有明显的差别(P<0.05); MEK抑制剂处理组的E-cadherin的蛋白水平明显高于对照组(P<0.01),Vimentin,p-ERK和p-FAK的蛋白水平明显低于对照组(P<0.01),但总的ERK与FAK的蛋白水平与对照组相比没有明显的差别(P<0.05)。结论:黄芩素能够抑制口腔鳞癌细胞的增殖以及侵袭,其机制可能与黄芩素抑制ERK-FAK信号通路有关。 展开更多
关键词 黄芩素 人口腔鳞癌细胞 侵袭 增殖 erk-fak
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达沙替尼体外抗鼻咽癌细胞增殖与转移的作用 被引量:1
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作者 李玉洁 何义富 胡冰 《安徽医药》 CAS 2013年第10期1773-1775,共3页
目的 SRC作为酪氨酸蛋白激酶在多种实体肿瘤中存在高表达,通过激活RAS/RAF/MEK/ERK、PI3K/AKT通路促进肿瘤细胞的生长与增殖,并通过激活FAK促进肿瘤细胞的转移。此外,SRC还参与了EGFR抑制剂耐药的发生。本研究旨在研究SRC的抑制剂达沙... 目的 SRC作为酪氨酸蛋白激酶在多种实体肿瘤中存在高表达,通过激活RAS/RAF/MEK/ERK、PI3K/AKT通路促进肿瘤细胞的生长与增殖,并通过激活FAK促进肿瘤细胞的转移。此外,SRC还参与了EGFR抑制剂耐药的发生。本研究旨在研究SRC的抑制剂达沙替尼在体外对鼻咽癌细胞的抑制作用。方法采用MTT方法绘制细胞生长曲线,并计算达沙替尼对鼻咽癌细胞的半数抑制浓度(IC50值);PI/AnnexinV双染法检测达沙替尼诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用;Western Blot检测达沙替尼引起鼻咽癌细胞中信号通路的改变;Transwell实验检测达沙替尼对鼻咽癌细胞迁移的影响。结果达沙替尼能明显在体外抑制鼻咽癌细胞的增殖,诱导鼻咽癌细胞的凋亡,并且呈浓度依赖性;应用达沙替尼处理CNE2后发现,能明显抑制RAS/RAF/MEK/ERK、PI3K/AKT通路活性表现为phospho-AKT、Phospho-MEK、Phospho-ERK的表达水平明显减低;达沙替尼还能明显抑制CNE2的迁移能力和Phospho-FAK的表达水平。结论 SRC的抑制剂达沙替尼能在体外明显抑制鼻咽癌细胞中RAS/RAF/MEK/ERK、PI3K/AKT通路的活性和FAK蛋白的表达,进一步抑制鼻咽癌细胞的增殖与转移,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 鼻咽癌 达沙替尼 CNE2 P13K AKT RAS RAF MEK erk fak
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睿臻对肺癌的抑制作用及其机制 被引量:1
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作者 黄璐璐 杜倩倩 +5 位作者 闫辰 刘春霞 李芋润 高林 李燕 赵青 《世界中医药》 CAS 2018年第6期1510-1517,共8页
目的:初步探讨由山楂、沙棘和枸杞三味中药为主,并添加虫草素、虫草多糖、β-葡聚糖和番茄红素等制备而成的天然药物组方睿臻的体内外抗肺癌活性及其机制。方法:采用MTT法检测睿臻体外抗肿瘤活性,小鼠Lewis移植瘤模型观察单独使用睿臻... 目的:初步探讨由山楂、沙棘和枸杞三味中药为主,并添加虫草素、虫草多糖、β-葡聚糖和番茄红素等制备而成的天然药物组方睿臻的体内外抗肺癌活性及其机制。方法:采用MTT法检测睿臻体外抗肿瘤活性,小鼠Lewis移植瘤模型观察单独使用睿臻及联合紫素的抗肺癌活性及对荷瘤小鼠生存时间的影响。FCM实验检测其对肿瘤细胞凋亡的影响,重组基质膜侵袭实验观察对肿瘤细胞侵袭能力的影响,Western blot方法初步探讨该化合物的作用机制。结果:睿臻对肺癌细胞具有较好的增殖抑制活性,其作用于A549细胞株、NCI-H460细胞株和NCI-H1975细胞株120 h后的IC_(50)值分别为98.42μg/mL、60.02μg/mL和60.41μg/mL;睿臻也可显著抑制小鼠Lewis肺癌的生长,9.0 g/kg睿臻对小鼠Lewis肺癌的生长抑制率达70.0%,且可在增强紫素的抗肿瘤活性的同时升高胸腺指数及外周血中红细胞数量和血红蛋白水平。睿臻可延长Lewis肺癌小鼠的生存时间。睿臻可诱导肺癌细胞A549和NCI-H460发生凋亡。在96.0μg/mL和192.0μg/mL剂量下,可显著抑制肺癌细胞穿过重组基底膜的数量。Western blot结果显示睿臻可抑制Raf/MEK/ERK、FAK/p38等信号通路。结论:睿臻在体内外均具有一定的抗肺癌活性,其作用机制可能与阻断Raf/MEK/ERK信号转导通路有关,有望开发成为肺癌治疗的天然药物制剂。 展开更多
关键词 睿臻 肺癌 增殖 凋亡 侵袭 增效减毒 Raf/MEK/erk fak/p38
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Effect of magnesium ions/Type I collagen promote the biological behavior of osteoblasts and its mechanism 被引量:12
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作者 Xiaojing Nie Xirao Sun +1 位作者 Chengyue Wang Jingxin Yang 《Regenerative Biomaterials》 SCIE 2020年第1期53-61,共9页
Type I collagen(Col I)is a main component of extracellular matrix(ECM).Its safety,biocompatibility,hydrophilicity and pyrogen immunogenicity make it suitable for tissues engineering applications.Mg2t also control a my... Type I collagen(Col I)is a main component of extracellular matrix(ECM).Its safety,biocompatibility,hydrophilicity and pyrogen immunogenicity make it suitable for tissues engineering applications.Mg2t also control a myriad of cellular processes,including the bone development by enhancing the attachment and differentiation of osteoblasts and accelerating mineralization to enhance bone healing.In our studies,Mg2t bind collagen to promote the proliferation and differentiation of osteoblasts through the expression of integrins and downstream signaling pathways.In order to clarify the biological behavior effect of 10mM Mg2t/Col I coating,we performed 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT),alkaline phosphatase(ALP),406-diamidino-2-phenylindole(DAPI),Alizarin red staining and Rhodamine B-isothiocyanate(RITC)-labeled phalloidin experiments and found that 10mM Mg2t group,Col I-coating group,10mM Mg2t/Col I-coating group,respectively,promoted the proliferation and differentiation of osteoblasts,especially 10mM Mg2t/Col I-coating group.We detected the mRNA expression of osteogenic-related genes(Runx2,ALP and OCN,OPN and BMP-2)and the protein expression of signaling pathway(integrin a2,integrin b1,FAK and ERK1/2),these results indicated that 10mM Mg2t/Col I coating play an critical role in up-regulating the MC3T3-E1 cells activity.The potential mechanisms of this specific performance may be through activating via integrin a2b1-FAK-ERK1/2 protein-coupled receptor pathway. 展开更多
关键词 magnesium ion INTEGRIN Type I collagen fak/erk
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