FAM19A4甲基化检测在HR-HPV阳性宫颈癌及其癌前病变评估中的临床价值

目的探讨FAM19A4甲基化检测在高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)阳性宫颈癌及其癌前病变评估中的临床价值。方法连续性纳入2020年1-12月该院收治的80例宫颈癌患者(宫颈癌组)及90例宫颈癌前病变患者(癌前病变组),以同期的80例健康体检者作为对照组。采集宫颈脱落细胞,采用杂交捕获法进行人乳头瘤病毒(HPV)的筛查及基因分型;采用双探针荧光定量PCR法检测3组HR-HPV阳性者宫颈脱落细胞中FAM19A4基因甲基化表达情况并进行统计学分析。结果宫颈癌组、癌前病变组及对照组的HR-HPV阳性率分别为92.50%(74/80)、55.56%(50/90)及7.50%(6/80),差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌组HR-HPV阳性者的FAM19A4基因甲基化检出率(97.30%)明显高于癌前病变组(72.00%)与对照组(16.67%),差异有统计学意义(P<0.05),癌前病变组HR-HPV阳性者的FAM19A4基因甲基化检出率明显高于对照组(P<0.05)。宫颈癌组HR-HPV阳性者的宫颈脱落细胞中,HPV16/18阳性者的FAM19A4基因甲基化检出率(100.00%)高于非HPV16/18阳性者(92.00%),差异有统计学意义(P<0.05);癌前病变组中HPV16/18阳性者的FAM19A4甲基化检出率(75.00%)高于非HPV16/18阳性者(68.18%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 FAM19A4基因可能是宫颈细胞癌变的特异性分子标志物,检测PFAM19A4甲基化程度可为临床防治宫颈癌提供参考。

高危HPV阳性宫颈组织中FAM19A4甲基化检测前病变的研究

目的:探究高危HPV阳性宫颈组织中FAM19A4甲基化检测对中国妇女宫颈癌前病变的临床意义。方法:选取自2017年2月至2019年1月在我院经筛查被确定为宫颈癌和宫颈HSIL患者共78例和正常宫颈受试者30例。通过采集三组受试者的宫颈脱落细胞,进行HPV筛选,对于检出的HPV,可采用杂交捕获法进行DNA检测,对HPV基因型作分型检测;采用DNA提取试剂盒提取样品DNA,并采用重亚硫酸盐进行处理;通过RT-PCR和Western Blot方法检测各组样品中FAM19A4、PFAM19A4的mRNA和蛋白表达情况。结果:与正常组相比,癌前病变组HPV的阳性检出率明显提高,且宫颈癌组的阳性检出率比癌前病变组更显著;临床病理检查发现,不同年龄、临床分期、病理类型、淋巴结转移、肿瘤大小状态与FAM19A4甲基化情况之间均无显著性差异;分子实验检测结果显示,与正常组相比,宫颈癌组和癌前病变组的FAM19A4基因mRNA和蛋白表达明显降低,PFAM19A4基因表达明显升高(P<0.01)。同时,宫颈癌组和癌前病变组相比,宫颈癌组PFAM19A4基因的mRNA和蛋白表达上调更显著(P<0.01)。结论:高危HPV阳性宫颈组织中FAM19A4甲基化程度的升高可增加宫颈病变的机率,为临床对于预防和治疗宫颈癌提供参考,对中国妇女宫颈癌前病变观察具有显著意义。

FAM 19A 4、PAX 1及miRNA124-2基因启动子区甲基化在宫颈病变早期诊断中的价值

背景与目的:目前有关宫颈病变的DNA甲基化研究较多,但DNA甲基化作为宫颈病变的诊断及分流指标在临床实践中的报道较少。本研究拟探讨FAM19A4、PAX1及miRNA124-2基因启动子区甲基化在宫颈病变进展中早期诊断的价值。方法:收集2020年3月—2022年3月在郑州大学第三附属医院同时行宫颈液基细胞学(thinprep cytologic test,TCT)和HPV检测的患者的宫颈细胞学标本共129例,采用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测不同宫颈病变中FAM19A4、PAX1及miRNA124-2基因启动子区甲基化改变情况,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估3个基因甲基化改变对宫颈病变的诊断价值。本研究经郑州大学第三附属医院伦理委员会批准(伦理审批编号:2023-135-01)。结果:根据病理学检查结果分为4组:未见上皮内病变或恶性细胞(no intraepithelial lesions or malignant lesions,NILM)组(42例)、低度鳞状上皮内病变(low grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)组(28例)、高度鳞状上皮内病变(high grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)组(36例)和鳞癌(squamous cervical cancer,SCC)组(23例)。随宫颈病变级别的增加,FAM19A4、PAX1及miRNA124-2基因甲基化检出率逐步增高,差异有统计学意义(P均<0.05)。在HSIL组FAM19A4、PAX1、miRNA124-2甲基化检出率分别为81.2%、80.5%和71.8%,在SCC组3种基因甲基化检出率均高达100.0%;细胞学诊断宫颈癌的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.731,诊断灵敏度和特异度分别为65.9%和80.4%;FAM19A4、PAX1及miRNA124-2基因单独诊断HSIL+(HSIL和SCC)时,PAX1甲基化诊断HSIL+的效能最高,AUC为0.925,灵敏度为92.8%,特异度为87.3%;两两联合诊断时,FAM19A4与PAX1联合诊断HSIL+的AUC为0.930,灵敏度为95.7%,特异度为87.1%;FAM19A4与miRNA124-2联合诊断HSIL+,AUC为0.895,灵敏度为97.6%,特异度为85.7%;PAX1联合miRNA124-2诊断HSIL+,AUC为0.928,灵敏度为95.7%,特异度为89.1%;PAX1、FAM19A4及miRNA124-2基因甲基化联合诊断HSIL+,AUC为0.928,灵敏度为100.0%,特异度为81.8%。结论:FAM19A4、PAX1及miRNA124-2基因启动子区甲基化诊断宫颈病变具有较高的灵敏度和特异度,有潜力成为宫颈病变早期诊断的新指标。

高危型人乳头瘤病毒阳性宫颈组织中FAM19A4甲基化检测对宫颈癌前病变的临床意义

目的探究高危型人乳头瘤病毒(HPV)阳性宫颈组织中FAM19A4甲基化检测对宫颈癌前病变的临床意义。方法选择2017年2月至2019年1月在山西省肿瘤医院就诊的115例宫颈疾病患者和65例宫颈正常的体检者。根据宫颈病变情况将受试者分为正常组65例,宫颈癌组50例,癌前病变组99例。采集三组受试者的宫颈脱落细胞进行HPV筛选,对于检出的HPV采用杂交捕获法进行DNA检测,对HPV基因型做分型检测;采用DNA提取试剂盒提取样品DNA,并采用重亚硫酸盐进行处理;通过RT-PCR和Western Blot方法检测各组样品中FAM19A4、PFAM19A4的mRNA和蛋白表达情况。结果三组受试者宫颈组织脱落细胞中HPV检出结果:正常组、癌前病变组和宫颈癌组中HPV检出率分别为7.69%(5/65)、35.35%(35/99)、48.00%(24/50),三组HPV检出率比较,宫颈癌组>癌前病变组>正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。分子实验检测结果显示,与正常组相比,宫颈癌组和癌前病变组FAM19A4基因mRNA和蛋白表达降低,PFAM19A4基因表达升高(P<0.01);与癌前病变组相比,宫颈癌组PFAM19A4基因的mRNA和蛋白表达上调更显著(P<0.01)。结论高危型HPV阳性宫颈组织中FAM19A4甲基化程度的升高可增加宫颈癌变的概率,检测FAM19A4甲基化程度可为临床防治宫颈癌提供参考。

FAM19A4基因启动子甲基化在高危型HPV阴性宫颈癌诊断中的作用

目的探讨FAM19A4基因启动子甲基化在高危型HPV(hr-HPV)阴性宫颈癌诊断中的作用。方法收集2013年6月至2017年12月在广东省妇幼保健院妇科治疗的宫颈癌患者共490例,其中术前宫颈刷液荧光定量PCR检测HPV结果为hr-HPV阴性的患者共25例,提取石蜡包埋标本中的DNA,依次经荧光定量PCR、HC-II、高通量靶向测序3种检测方式检测HPV型别,并评估hr-HPV阴性宫颈癌的临床特征,进一步检测标本中FAM19A4基因甲基化的表达情况。结果 25例样本中经荧光定量PCR及HC-II方法检测结果为hr-HPV阴性共12例(48.0%,12/25),将12例样本进行高通量测序,仍为阴性有9例(36%,9/25);hr-HPV阴性宫颈癌标本的FAM19A4基因甲基化检出率为100%(9/9);hr-HPV阴性宫颈癌与hr-HPV阳性宫颈癌相比,在组织病理学有统计学差异(P <0.05)。结论 hr-HPV阴性宫颈癌一种临床病理较为特殊的宫颈癌,经过更加敏感的检测方法检测后,发病率将进一步下降,结合FAM19A4基因启动子甲基化检测将对hr-HPV阴性宫颈癌的诊断有重要的辅助意义。

FAM19A4基因启动子甲基化检测在宫颈癌组织中的临床意义

目的探讨FAM19A4基因启动子甲基化状态在不同病变级别的宫颈石蜡组织中的差异及其临床价值。方法随机选取31例、22例及23例经病理确诊为宫颈癌、宫颈HSIL及正常宫颈的石蜡包埋标本,采用双探针荧光定量PCR检测三组标本中FAM19A4基因甲基化的表达差异及进行分析。结果 FAM19A4基因甲基化阳性检出率在宫颈癌、宫颈HSIL及正常宫颈组织中分别为96.8%(30/31)、72.7%(16/22)和8.7%(2/23),三组间差异具有统计学意义(P<0.05);且随着宫颈病变严重程度增加,FAM19A4甲基化检出率也升高(P<0.05);宫颈癌不同临床病理特征与FAM19A4基因甲基化阳性检出率间均无统计学差异(P>0.05)。结论 FAM19A4基因启动子甲基化可能是宫颈癌变的特异性分子标志物,可能在宫颈癌的发生发展中起着一定作用,但可能不参与宫颈癌的侵袭转移。

FAM19A4基因启动子甲基化检测在宫颈癌组织中的临床价值

目的:探讨FAM19A4基因启动子甲基化检测在宫颈癌组织中的临床价值。方法:选取2017年1月至2018年12月广东医科大学顺德妇女儿童医院病理科采集的宫颈病理样本,其中宫颈癌样本32例,高度鳞状上皮内病变(HSIL)样本28例,正常宫颈样本24例,通过荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测对三组样本中FAM19A4基因启动子甲基化检出情况进行分析。结果:宫颈癌甲基化检出率高于HSIL组以及正常宫颈组,差异具有统计学意义(P < 0.05),HSIL组甲基化检出率高于正常宫颈组,差异具有统计学意义(P < 0.05);在患者年龄、组织学类型、临床分期、肿瘤大小以及淋巴结转移等方面,FAM19A4基因启动子甲基化检出情况差异无统计学意义(P > 0.05)。结论:FAM19A4基因启动子甲基化可能是宫颈癌特异性诊断标志物,可能与宫颈癌的发生以及发展存在一定相关性。

鼻咽癌癌变前后ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC4甲基化研究

目的:研究鼻咽癌变前后ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC4甲基化特征。方法:12例鼻咽癌10例鼻咽炎作为研究对象,抽提鼻咽组织DNA,以特异识别5-甲基胞嘧啶的抗体免疫沉淀DNA,实时荧光定量PCR分别检测5个基因含量,并设置不用5-甲基胞嘧啶抗体(非MeDIP-qPCR实验)及使用非特异性抗体IgG进行免疫沉淀作为双重对照。结果:无论鼻咽癌还是鼻咽炎患者,5个基因在使用非特异性抗体IgG实验时均未检验到甲基化,非MeDIP-qPCR实验显示5个基因在鼻咽癌及鼻咽炎荧光定量值无明显差异(P>0.05);MeDIP-qPCR实验显示,鼻咽癌5个基因均呈现明显的甲基化,ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC45在鼻咽癌校正值分别为:3.39±2.28、6.03±3.93、3.68±1.81、7.12±3.17、3.10±1.94,在鼻咽炎分别为0.00±0.00、0.01±0.01、0.25±0.49、0.20±0.20、0.00±0.00(均P<0.01)。结论:ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC4 5个基因甲基化为鼻咽癌变的重要特征。

FAM19A4基因启动子DNA甲基化对宫颈病变的诊断价值研究

目的探讨序列相似家族19成员A4(FAM19A4)基因启动子DNA甲基化水平在不同宫颈病变中的差异以及对宫颈癌和癌前病变的诊断价值。方法收集188例不同阶段宫颈病变的宫颈细胞样本,其中正常宫颈组65例,低度鳞状上皮内病变(LSIL)组33例,高度鳞状上皮内病变(HSIL)组56例,宫颈癌组34例。用靶向二代测序法检测FAM19A4基因启动子DNA甲基化的表达水平,分析不同组别甲基化水平差异及对宫颈病变的诊断价值。结果宫颈癌组、HSIL组、LSIL组及正常宫颈组FAM19A4基因启动子DNA甲基化水平的中位数分别为18.89、11.39、9.72、8.89,宫颈癌组明显高于HSIL组、LSIL组及正常宫颈组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。FAM19A4基因启动子DNA甲基化水平与宫颈病变程度呈正相关,相关系数为0.521(P<0.05)。FAM19A4基因启动子DNA甲基化诊断宫颈癌的灵敏度为82.35%,特异度为86.15%,ROC曲线下面积为0.91。结论宫颈癌和HSIL患者的FAM19A4基因启动子DNA甲基化水平异常增高,该指标对宫颈癌具有一定诊断价值。

HPV DNA与FAM19A4基因启动子甲基化检测在宫颈癌筛查中的应用探讨

目的探讨高危型HPV(hr-HPV)与FAM19A4基因启动子甲基化检测在筛查宫颈癌中的临床应用价值。方法选取2016—2018年在咸宁市中心医院就诊的210例患者拭子样本,其中正常及良性宫颈炎65例,CIN147例、CIN232例、CIN346例、宫颈癌20例。所有患者样本均接受高危型HPV检测及FAM19A4甲基化检测,对比单独HPV检测、单独甲基化检测以及两者联合检测在宫颈癌筛查中的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果在正常及良性宫颈炎、CIN1、CIN2、CIN3及宫颈癌患者中,hr-HPV检测、FAM19A4基因启动子甲基化检测在不同程度宫颈病变患者阳性率均逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);FAM19A4基因启动子甲基化检测在宫颈癌早期病变诊断中的灵敏度低于hr-HPV检测,差异有统计学意义(P<0.05),特异度高于hr-HPV检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论hr-HPV检测具有高灵敏度和低特异度的特点,FAM19A4基因启动子甲基化具有低灵敏度和高特异度的特点,两者联合在宫颈癌早期病变筛查中具有较高的应用价值,可为宫颈癌早期病变筛查诊断提供参考依据,提高诊断准确性,改善疾病预后。

宫颈脱落细胞中FAM19A4基因启动子甲基化的检测分析

目的探讨宫颈脱落细胞中FAM19A4基因启动子甲基化检测在宫颈癌筛查中的临床价值。方法收集2017年8至12月间在广东省妇幼保健院就诊,经病理学确诊为不同宫颈病变的高危型HPV(HR-HPV)感染患者,共162例。采取双探针荧光定量PCR检测不同级别宫颈病变的宫颈脱落细胞中的FAM19A4基因启动子甲基化表达情况,并通过诊断试验计算该基因甲基化在预测宫颈HSIL及以上病变的价值。结果(1)宫颈脱落细胞中FAM19A4甲基化阳性率随着宫颈病变严重程度增加,在正常宫颈/宫颈炎、宫颈低度鳞状上皮内病变(LSIL)、宫颈高分化鳞状上皮内病变(HSIL)和宫颈癌中分别为:7.69%(4/52),34.62%(9/26),55.56%(20/36),95.83%(46/48)(P<0.05)。(2)FAM19A4甲基化检出率在宫颈癌不同年龄段、病理学类型、临床分期、肿瘤大小及淋巴结转移状态间差异均无统计学意义(均P>0.05)。(3)FAM19A4甲基化在检测宫颈HSIL和≥HSIL病变时的特异度及阳性预测值最佳,曲线下面积分别为0.69和0.84;联合HPV16/18分型检测明显提高灵敏度。结论宫颈脱落细胞FAM19A4基因启动子甲基化检测在发现宫颈≥HSIL病变中具有较高的临床价值;当联合HPV16/18分型检测后,能更灵敏地检测出宫颈≥HSIL病变。

FAM19A4基因启动子甲基化检测在宫颈癌及其癌前病变筛查的研究

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一。目前人乳头瘤病毒(HPV)检测及细胞学检查是宫颈癌及其癌前病变(CCPL)的主要筛查手段。由于上述传统筛查方法,仍然存在对CCPL漏诊的风险,因此寻找有效识别CCPL的特异性分子标志物,具有重要临床意义。对具有序列相似性家族19成员A4(FAM19A4)基因启动子甲基化定量检测,可有效检出CCPL组织,较传统筛查方法有较高特异度,有望成为CCPL筛查的特异性分子标志物。笔者拟就FAM19A4基因启动子甲基化定量检测,在CCPL筛查中应用的最新研究现状进行阐述,旨在为进一步推进CCPL筛查方法的开发,提供思路。