FAM3C通过激活Akt促进口腔鳞癌细胞活力

目的:探讨FAM3C (family with sequence similarity 3, member C)蛋白在口腔鳞癌细胞中的表达和作用。方法:通过RT-qPCR及Western blot法检测人口腔鳞癌癌前病变细胞DOK和口腔鳞癌细胞WSU-HN6中FAM3C的mRNA及蛋白表达水平。在WSU-HN6细胞中分别使用siFAM3C和抗FAM3C抗体处理,在DOK细胞中使用腺病毒过表达FAM3C,分别在处理后24、48和72 h使用CCK-8和Western blot法检测FAM3C对细胞活力及蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)激活的影响。结果:(1)与DOK细胞相比,WSU-HN6细胞中FAM3C的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);(2)siFAM3C在转染后48 h和72 h均可抑制WSU-HN6细胞的活力(P<0.05),同时抑制Akt的激活(P<0.05);(3)抗体封闭FAM3C蛋白48 h和72 h也能抑制WSU-HN6细胞的活力,并抑制Akt的激活(P<0.05);(4)过表达FAM3C 48 h和72 h可促进DOK细胞的活力,并激活Akt(P<0.05)。结论:FAM3C可能通过激活Akt促进口腔鳞癌细胞的活力。

小鼠FAM3C基因重组腺病毒载体的构建及其在肾系膜细胞中的表达

目的:利用Ad Easy TMsystem构建携带小鼠FAM3C基因的重组腺病毒,转染至人胚肾细胞系HEK293细胞,检测外源FAM3C在细胞中的表达。方法:取小鼠肾脏提取RNA,创建c DNA文库,用PCR的方法扩增FAM3C基因,将其克隆到p EASY-1载体中,T3连接酶连接。经Bgl II单酶切后,接入p Ad Tra Ck-CMV穿梭载体,T4连接酶连接,构建重组腺病毒的穿梭质粒p Ad Tra Ck-CMV-FAM3C。将经Pme I线性化的p Ad Track-CMFAM3C电穿孔共转化入BJ5183重组细菌,获取重组腺病毒质粒Ad-FAM3C,再将经Pac I线性化的Ad-FAM3C重组病毒骨架质粒转染人胚胎肾细胞系HEK293细胞,包装并扩增病毒。用Ad-FAM3C感染小鼠肾系膜细胞,Western blot法检测FAM3C在小鼠肾系膜细胞中的表达。结果:DNA序列分析和琼脂糖凝胶电泳结果表明,已构建表达FAM3C基因的重组腺病毒,该腺病毒在体外能有效感染小鼠肾系膜细胞,且高表达FAM3C蛋白。结论:成功地构建了携带小鼠FAM3C基因的重组腺病毒,为进一步阐明FAM3C的功能及作用机制奠定实验基础。

细胞因子FAM3C在携带人突变型α-突触核蛋白A53T纯合子小鼠黑质区表达的研究

目的探讨细胞因子FAM3家族成员FAM3C在帕金森病(PD)模型小鼠黑质(SN)区的表达及其意义。方法选取3及6月龄携带人突变型α-突触核蛋白A53T纯合子(α-SynA53T^(+/+))小鼠和同窝野生型(WT)小鼠,提取SN区蛋白,采用Western Blot方法检测FAM3C蛋白的表达水平。结果 3月龄α-SynA53T^(+/+)小鼠SN区FAM3C蛋白表达水平与WT小鼠相比差异无显著意义(t=1.245,P>0.05),6月龄α-SynA53T^(+/+)小鼠SN区FAM3C蛋白表达水平与WT小鼠相比明显升高,差异有统计学意义(t=8.865,P<0.05)。结论 3月龄小鼠SN区FAM3C蛋白表达水平不变,而6月龄小鼠SN区FAM3C蛋白表达水平升高,说明SN区FAM3C蛋白随PD病情进展表达增加,可能参与了PD的发病过程。

FAM3C蛋白与结肠癌临床病理相关性

[目的]研究FAM3C在结肠癌中的表达及其与结肠癌临床病理的相关性。[方法]用免疫组织化学法检测结肠癌组织芯片FAM3C的蛋白表达,分析其与临床病理相关性,Kaplan-Meier生存分析及Cox回归模型分析其预后。[结果 ]FAM3C蛋白在结肠癌中表达水平与肿瘤TNM分期及淋巴结转移具有显著性相关;Kaplan-Meier生存分析显示FAM3C蛋白表达阳性组生存率显著低于阴性组,Cox回归模型行多因素分析显示FAM3C蛋白不是结肠癌独立预后的因子。[结论]FAM3C高表达可能参与了结肠癌转移过程,甚至促使结肠癌的恶性进展;其高表达可能与结肠癌患者的生存及预后不良具有相关性。