基于Fas/Fas L通路探讨象皮生肌膏对肛瘘术后模型大鼠创面细胞凋亡的影响

目的探究象皮生肌膏对肛瘘术后模型大鼠创面愈合及凋亡相关Fas/Fas L通路的影响。方法36只SD大鼠采用钢丝挂线留置30天造模的方法构建肛瘘模型,造模成功后随机选取27只肛瘘大鼠行“瘘管切除术”构建肛瘘术后创面模型。术后创面模型大鼠随后被随机分为3组,每组9只,为象皮生肌膏组、凡士林组、模型组。剩余9只肛瘘大鼠则为假手术组。象皮生肌膏组采用象皮生肌膏纱条外敷、凡士林组采用凡士林纱条外敷,模型组仅消毒冲洗,假手术组无特殊处理。观察药物干预后第3、5、7、10天创面愈合情况,计算创面愈合率。连续干预10天后,从各组取创面组织,采用HE染色法、TUNEL染色法、免疫组化法分别观察创面组织病理学变化、创面组织中细胞凋亡数目、创面组织中Fas、Fas L、caspase-8、cyto-c的表达,RT-PCR法检测创面组织中Fas、Fas L、cyto-c的mRNA表达。结果与模型组相比,象皮生肌膏组及凡士林组在干预后7、10天时显著促进创面愈合(P<0.01),且象皮生肌膏组创面愈合率明显高于凡士林组(P<0.01)。药物干预10天后,与假手术组相比,象皮生肌膏组、凡士林组、模型组的细胞凋亡率明显升高(P<0.01),创面组织中Fas、Fas L、cyto-c mRNA相对表达量及Fas、Fas L、caspase-8、cyto-c蛋白表达水平均显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,象皮生肌膏组、凡士林组细胞凋亡率显著下降(P<0.01),Fas、Fas L、cyto-c mRNA相对表达量及Fas、Fas L、caspase-8、cyto-c蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01);与凡士林组相比,象皮生肌膏组细胞凋亡率显著下降(P<0.01),Fas、Fas L、cyto-c mRNA相对表达量及Fas、Fas L、caspase-8、cyto-c蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论象皮生肌膏能抑制Fas/Fas L通路的激活,减少创面组织细胞的凋亡,促进肛瘘术后创面愈合。

基于Fas/FasL信号通路探究调控miR-214-3p对帕金森病大鼠的干预效果

目的研究基于Fas/Fas配体(FasL)信号通路探究调控微小RNA(miR)-214-3p对帕金森病模型大鼠的干预效果。方法选取36只清洁级SD雄性大鼠,其中8只为正常组,其余28只建立帕金森病模型,建模成功24只大鼠分为上调miR-214-3p组、下调miR-214-3p组、模型组各8只,各组脑组织中miR-214-3p表达采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测,对各组步幅距离、悬挂时间进行观察,各组脑组织中炎症因子的表达采用酶联免疫吸附试验检测,采用Western印迹检测Fas/FasL信号通路相关蛋白表达。结果与正常组相比,上调miR-214-3p组、下调miR-214-3p组、模型组miR-214-3p、甲状腺激素(TH)表达明显降低,Fas、FasL表达明显升高(P<0.05);与模型组相比,上调miR-214-3p组miR-214-3p、TH表达较高,Fas、FasL表达较低,下调miR-214-3p组miR-214-3p、TH表达较低,Fas、FasL表达较高,差异有统计学意义(P<0.05);与下调miR-214-3p组相比,上调miR-214-3p组miR-214-3p、TH表达较高,Fas、FasL表达较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组相比,上调miR-214-3p组、下调miR-214-3p组、模型组肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、IL-6表达较高,步幅距离较小,悬挂时间较短,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,上调miR-214-3p组TNF-α、IL-1、IL-6表达较低,步幅距离较大,悬挂时间较长,下调miR-214-3p组步TNF-α、IL-1、IL-6表达较高,幅距离较小,悬挂时间较短,差异有统计学意义(P<0.05);与下调miR-214-3p组相比,上调miR-214-3p组TNF-α、IL-1、IL-6表达较低,步幅距离较大,悬挂时间较长,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调miR-214-3p可有效改善大鼠帕金森病,其作用机制可能与Fas/FasL通路有关。

左旋精氨酸对兔肺缺血/再灌注损伤时Fas/FasL表达的影响

目的探讨左旋精氨酸对肺缺血/再灌注损伤(PIRI)时Fas/FasL表达的影响。方法采用在体兔单肺原位缺血/再灌注模型。实验兔30只,随机分为假手术对照组(C组)、肺缺血/再灌注组(I/R组)和肺缺血/再灌注加左旋精氨酸组(L-Arg组),每组10只。分别于再灌注3h取左肺组织,观察Fas/Fas配体(Fas/FasL)mRNA定位表达、凋亡指数(AI)、肺组织湿干质量比(W/D)、肺损伤组织学定量评价指标(IQA)及光镜、电镜下的组织形态学改变。结果L-Arg组Fas/FasL mRNA在肺小动脉内(外)膜、肺小静脉内膜、肺泡上皮及肺支气管上皮呈弱阳性表达,明显低于L/R组(P＜0．05)；AI、W/D和IQA值显著低于L/R组(P＜0．01和P＜0．05)；肺组织形态学异常改变不同程度减轻。结论左旋精氨酸可下调肺组织Fas/FasL mRNA的表达而减轻细胞凋亡,对PIRI发挥积极的防治作用。

葛根素对肺缺血-再灌注损伤时Fas/FasL表达的影响

目的:探讨葛根素对肺缺血-再灌注损伤(PIR I)时Fas/FasL表达的影响。方法:采用在体兔单肺原位缺血-再灌注模型。实验兔70只,随机分为假手术对照组(sham,10只)、肺缺血-再灌注组(I-R,30只)和肺缺血-再灌注加葛根素组(LGT,30只)。每组又分为再灌注1 h、3 h、5 h 3个亚组,每个亚组10只,分别于再灌注1 h、3 h、5 h 3个时点取左肺组织,观察Fas/Fas配体(Fas/FasL)mRNA定位表达、凋亡指数(AI)、肺组织湿干重比(W/D)、肺损伤组织学定量评价指标(IQA)及光镜、电镜下的组织形态学改变。结果:肺再灌注1 h、3 h、5 h,LGT组Fas/FasL mRNA在肺小动脉内(外)膜、肺小静脉内膜、肺泡上皮及肺支气管上皮呈弱阳性表达,明显低于同一时点I-R组(P<0.05);AI、W/D和IQA值显著低于I-R组(P<0.01和P<0.05);肺组织形态学异常改变不同程度减轻。结论:葛根素可下调肺组织Fas/FasL mRNA的表达而减轻细胞凋亡,对PIR I发挥积极的防治作用。

氟美松对急性肝损伤大鼠肝细胞Fas/Fas配体表达和细胞凋亡的影响

目的 :观察内毒素急性肝损伤后肝细胞凋亡和Fas/Fas配体 (FasL)表达的变化 ,以及氟美松对其影响 ,探讨急性肝损伤早期作用机制 .方法 :采用免疫组化和原位杂交技术检测各时相点肝细胞Fas/FasL蛋白和mRNA的表达 ;应用原位末端标记技术对各时相点肝细胞凋亡进行检测 .结果 :内毒素急性肝损伤各时相点大鼠肝细胞Fas/FasL蛋白和mR NA的表达较对照组明显上调 (P <0 .0 5 ) ,且与肝细胞凋亡的增加相一致 ;氟美松可明显减轻炎症反应 ,抑制脂多糖 (LPS)诱导的肝细胞凋亡 ,并使肝细胞Fas/FasL蛋白和mRNA的表达明显下调 (P <0 .0 5 ) .结论 :肝细胞凋亡和Fas/FasL系统活化可能参与内毒素急性肝损伤早期的发病机制 ,而且加重早期肝损伤 ;氟美松可抑制Fas/FasL系统活化 ,阻断和调控凋亡 。

Fas/FasL在急性胰腺炎肝损伤中的作用

Fas/FasL介导的凋亡参与急性胰腺炎肝损伤的发生发展,急性胰腺炎上调肝内的促凋亡通路并且促使肝细胞损伤和肝细胞凋亡.急性胰腺炎时通过上调Kupffer细胞内FasL生成的信号使FasL表达增加,FasL激活Fas相关的死亡域和暴露死亡效应结构域,随后活化Caspase级联反应和下游的效应Caspases,最终导致DNA裂解和肝细胞凋亡,从而介导肝损伤.本文就Fas/FasL结构、分布、功能及介导急性胰腺炎肝损伤的机制作一综述.

姜黄素通过Fas/FasL信号通路调控胶质瘤细胞增殖和凋亡

目的探讨姜黄素通过Fas/Fas L信号通路对胶质瘤细胞的增殖及凋亡产生影响。方法以人胶质细胞瘤U87细胞为研究对象,采用细胞毒性试验检测姜黄素对U87胶质瘤细胞的细胞毒性作用。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、平板克隆实验(colony formation assay)观察姜黄素对胶质瘤增殖能力的影响;流式细胞术(FCM)及Caspase-3活性检测细胞凋亡;流式细胞术检测胶质瘤细胞周期;实时定量PCR、Western blot法检测细胞内Fas、Fas L m RNA和蛋白的表达水平。结果随着姜黄素浓度增加,胶质瘤细胞系的细胞毒性作用也增强(P<0.05),24 h的IC50为14.28μmol/L。流式细胞术检测姜黄素阻滞胶质瘤细胞周期于G2/M期。姜黄素作用胶质瘤后Fas和Fas L在m RNA和蛋白表达水平上升(P<0.05)。姜黄素对胶质瘤细胞的增殖及细胞集落形成有抑制作用,并呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。结论姜黄素可能通过上调Fas/Fas L通路抑制胶质瘤细胞增殖并促进凋亡。

肾气丸对非酒精性脂肪性肝炎大鼠Bcl-2/Bax、Fas/FasL信号通路的影响

目的:观察Bcl-2/Bax、Fas/Fas L介导的信号转导通路在高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎大鼠的作用及肾气丸对其的影响。方法:采用高脂饲料连续喂养12周建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型,同时以肾气丸进行干预12周。HE染色观察大鼠肝组织病理组织学变化,免疫组织化学检测肝组织中Fas、Fas L、Bcl-2、Bax、Caspase-8蛋白的表达;Realtime-PCR法检测肝组织Caspase-8 mRNA表达。结果:模型组大鼠肝组织Bcl-2、Bax、Fas、Fas L蛋白以及Caspase-8 mRNA和蛋白表达均较正常组显著增加(P<0.01),Bcl-2/Bax比值较正常组明显的降低(P<0.05);大鼠肝组织Caspase-8蛋白表达与Fas、Fas L蛋白表达均呈明显正相关(r分别为0.907、0.804,P均<0.01);予以肾气丸干预后,Bax、Fas、Fas L蛋白的表达以及Caspase-8 mRNA和蛋白的表达均较模型组明显的降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比值较模型组明显的增加(P<0.05),Bcl-2蛋白的表达与模型组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:肾气丸可能通过影响Bcl-2/Bax、Fas/Fas L信号转导通路,下调Bax、Fas、Fas L、Caspase-8表达,减少肝细胞的脂性凋亡,从而防治大鼠非酒精性脂肪性肝炎的发生发展。

参麦注射液对肺缺血-再灌注损伤时Fas/FasL表达的影响

目的:探讨参麦注射液对肺缺血-再灌注损伤(PIRI)时Fas/FasL配体(Fas/FasL)表达的影响。方法:采用在体兔单肺原位缺血-再灌注模型。实验兔30只,随机分为假手术对照组(sham,n=10)、肺缺血-再灌注组(I-R,n=10)和肺缺血-再灌注加参麦注射液组(SM,n=10)。分别于再灌注3h取左肺组织,观察Fas/FasLmRNA定位表达、凋亡指数(AI)、肺组织湿干重比(W/D)、肺损伤组织学定量评价指标(IQA)及光镜、电镜下的组织形态学改变。结果:SM组Fas/FasLmRNA在肺小动脉内(外)膜、肺小静脉内膜、肺泡上皮及肺支气管上皮呈弱阳性表达,明显低于I-R组(P<0.05);AI、W/D和IQA值显著低于I-R组(P<0.01和P<0.05);肺组织形态学异常改变程度减轻。结论:参麦注射液可下调肺组织Fas/FasLmRNA的表达而减轻细胞凋亡,对PIRI发挥积极的防治作用。

β-榄香烯通过Fas/FasL信号通路调控胶质瘤细胞增殖和凋亡

目的探讨β-榄香烯通过Fas/Fas L信号通路对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法以人胶质母细胞瘤U87细胞系为研究对象,分为空白对照组和β-榄香烯实验组。采用细胞毒性试验分析β-榄香烯对U87胶质瘤细胞的细胞毒性作用;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测β-榄香烯对胶质瘤的增殖能力的影响;流式细胞仪(FCM)及Caspase活性试剂盒检测细胞凋亡;流式细胞术检测胶质瘤细胞周期;实时定量PCR、Western blot法检测细胞内Fas、Fas L的表达水平。结果胶质瘤细胞系的细胞毒性作用随着β-榄香烯浓度增加而增强,IC50为45.73μg/m L;流式细胞仪分析β-榄香烯作用于U87细胞,阻滞周期于G1/S期;β-榄香烯作用于U87胶质瘤后Fas和Fas L的mRNA和蛋白表达水平上升;β-榄香烯作用于胶质瘤细胞有抑制增殖作用,并呈浓度和时间依赖性。结论β-榄香烯可能通过上调Fas/Fas L通路的表达水平,抑制胶质瘤细胞增殖并诱导凋亡。

白细胞介素-1受体拮抗剂对急性排斥期大鼠角膜移植物Fas/FasL表达的影响

目的 研究白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)对急性排斥反应期角膜移植物Fas／FasL蛋白表达的影响。方法 建立大鼠同种异体穿透角膜移植模型,设生理盐水组和IL-1ra治疗组。急性排斥期随机取角膜植片,用免疫组织化学(SABC)法检测植片Fas／FasL蛋白表达。并以正常大鼠角膜作对照。 结果 在正常角膜,Fas和FasL蛋白主要表达于上皮层及内皮层;基质层中仅有少量Fas蛋白表达,未见FasL蛋白表达。急性排斥期角膜植片全层Fas和FasL蛋白表达增高,且植片周边(距伤口边缘0.5 mm范围内)增高显著;IL-1ra治疗组Fas和FasL蛋白表达均低于生理盐水组。结论 IL-1ra可通过调节Fas／FasL蛋白的表达抑制角膜移植免疫排斥反应的发生。

平目汤含药血清对非活动期Graves眼病眼眶脂肪细胞fas/fas L表达的影响

目的:通过观察平目汤含药血清对Graves眼病眼眶脂肪细胞fas/fas L表达的影响,探讨平目汤治疗非活动期Graves眼病的可能作用机制。方法:SD大鼠给予平目汤灌胃,2次/d,连续给药3 d后制备平目汤含药血清。体外常规培养眼眶脂肪细胞,实验分为空白对照组,地塞米松组(30μg/mL),平目汤低剂量组(5%)、平目汤中剂量组(10%)、平目汤高剂量组(20%)。干预12 h后采用RT-qPCR检测各组细胞的fas/fasL mRNA表达,干预48 h后Western Blot法检测各组细胞的fas/fasL蛋白表达。结果:与空白对照组比较,平目汤中剂量组fas mRNA的表达量升高(P<0.05),平目汤各组fas L mRNA的表达量均升高(P<0.05),地塞米松组无统计学差异(P>0.05);与空白对照组相比,平目汤各组fas、fas L蛋白表达均上调,差异有统计学意义(P<0.05),地塞米松组则无统计学差异(P>0.05)。结论:平目汤治疗非活动期Graves眼病的作用可能与上调眼眶脂肪细胞fas/fas L的mRNA和蛋白表达有关。

川芎嗪对家兔肺缺血/再灌注损伤时Fas/FasL基因表达的影响

目的:探讨川芎嗪对肺缺血/再灌注损伤(PI/RI)时Fas/FasL基因表达的影响。方法:采用在体兔单肺原位缺血-再灌注模型。实验兔90只,随机均分为假手术对照组(Sham)、肺缺血/再灌注组(I/R)和肺缺血/再灌注加川芎嗪治疗组(LGT)。每组又分为再灌注1h3、h、5 h三个亚组,每个亚组10只,分别于再灌注1 h3、h、5 h三个时点取左肺组织,观察Fas/Fas配体(Fas/FasL)mRNA定位表达、凋亡指数(AI)、肺组织湿、干重比(W/D)、肺损伤组织学定量评价指标(IQA)及光镜、电镜下的组织形态学改变。结果:肺再灌注1 h、3 h、5 h,LGT组Fas/FasLmRNA在肺小动脉内(外)膜、肺小静脉内膜、肺泡上皮及肺支气管上皮弱阳性表达,与I/R组同一时点比较阳性表达明显减弱;AI、W/D和IQA值显著低于I/R组(P<0.01和P<0.05);肺组织形态学异常改变不同程度减轻。结论:川芎嗪可下调肺组织Fas/FasL mRNA的表达而减轻细胞凋亡,对PI/RI发挥积极的防护作用。

依曲替酸(R_O10-1670)对培养的正常人角质形成细胞Fas/Fasl系统表达及凋亡的研究

目的 通过研究依曲替酸作用于培养的正常人KC前后Fas/Fasl的表达及其与凋亡的关系 ,进一步探讨其治疗银屑病的作用机理。方法 依曲替酸作用培养的正常人KC后 ,进行免疫细胞化学研究 ,观察其对KC表达Fas/Fasl蛋白的影响。用流式细胞仪 (FACS)对依曲替酸处理后的KC进行凋亡检测。结果 ①正常人KC几乎不表达Fas和Fasl ;②依曲替酸作用 16h时KC的Fasl表达最强 ,40h时表达Fas最强 ;相同条件下 ,KC表达Fasl比Fas弱 ;③依曲替酸刺激后引起KC凋亡。结论 培养的正常人KC中Fas/Fasl系统不参与其凋亡 ;依曲替酸作用于培养的正常人KC后 ,上调Fas/Fasl系统表达 ,并促进KC凋亡 ,拮抗KC良性增生 ,Fas/Fasl介导的凋亡可能是维甲酸治疗银屑病的重要原因。

Fas/FasL表达与人黑色素瘤恶性程度及细胞凋亡关系的研究

目的探讨Fas和Fas配体(Fas/FasL)在人黑色素瘤中的表达及其与黑色素瘤恶性程度和细胞凋亡的关系。方法按不同病理分级,将标本分为恶性黑色素瘤(malignant melanoma,MM)伴淋巴结转移组(A组)、MM无转移组(B组)、良性黑素细胞痣组(C组)和良性黑素细胞痣旁正常组织对照组(D组),应用免疫组化SP法,检测Fas/FasL在4组标本中的表达情况;用DNA末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测其细胞凋亡指数(AI)。结果Fas/FasL在不同组织中的表达强度有明显差异,Fas在A、B、C、D 4组中表达率分别为31.25%、57.89%、76.19%、92.85%(P<0.01),而FasL在上述组织中表达率分别为75.0%、52.63%、19.04%、3.57%(P<0.01)。AI比较:C组明显高于D组(t=3.054,P<0.01),B组高于D组(t=2.018,P<0.05),同时C组高于A组(t=2.051,P<0.05)。结论Fas/FasL表达情况反映黑色素瘤恶性程度,细胞凋亡的异常与黑色素瘤发展等过程有密切联系。

五味子多糖对lewis肺癌细胞株凋亡及FAS/FASL表达的影响

目的:探讨五味子多糖对lewis肺癌细胞增殖的影响,探究FAS/FASL在lewis肺癌细胞中的表达变化以及其对lewis肺癌细胞株凋亡的影响机制。方法:采用MTT法检测五味子多糖对lewis肺癌细胞增殖的抑制作用,收取细胞总蛋白并利用蛋白免疫印迹法检测其对FAS/FASL表达的影响。结果:五味子多糖能够抑制lewis肺癌细胞的增殖。五味子多糖能够促进lewis肺癌细胞FAS蛋白的表达,其中高剂量组为0.664+0.003,低剂量组为0.286+0.017,且两组间的差异具有统计学意义(P<0.05)。五味子多糖能够抑制lewis肺癌细胞FASL蛋白的表达,其中高剂量组为0.358+0.022,低剂量组为0.724+0.006,且两组间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:五味子多糖能够抑制lewis肺癌细胞的增殖,其作用机制可能与调控Fas/FasL系统有关。

辛伐他汀对单肾切除糖尿病老龄鼠肾组织Fas/Fas-L基因表达的影响

目的:探讨辛伐他汀对单肾切除糖尿病老龄SD大鼠肾脏凋亡相关基因Fas/Fas-L表达的影响。方法:单肾切除老龄SD大鼠分为肾切除对照组(C组)、糖尿病模型组(D组)、糖尿病辛伐他汀治疗组(S组)。12周后采用原位末端标记法检测各组肾组织细胞凋亡指数,使用实时荧光定量PCR和免疫荧光法,从转录和翻译水平观察各组大鼠肾皮质中凋亡相关基因Fas及Fas-L的变化规律。结果:D组相对C组细胞凋亡指数、Fas及Fas-L的蛋白表达水平和相对应的mRNA拷贝数均明显增高,S组相对D组减弱(P<0.05),Fas、Fas-L蛋白主要在肾小管表达。结论:Fas及Fas-L系统与DN发生发展相关,辛伐他汀可在分子水平调控Fas及Fas-L基因的转录和翻译,抑制细胞凋亡,发挥肾脏保护作用。

Fas/Fas L与Survivin在乳腺癌中的研究进展

乳腺癌作为一种激素依赖性实体瘤,它的发生与肿瘤细胞凋亡受阻有关。Fas/Fas L在乳腺癌细胞凋亡中起重要作用,它们在乳腺癌的诊断、治疗及预后方面有很高的临床应用价值。生存素Survivin是凋亡抑制蛋白(inhibitors of apoptosis proteins,IAPs)家族的新成员,参与调控细胞的增殖和凋亡,在人类多种恶性肿瘤中,Survivin高表达并提示预后不良。奉研究对Fas/Fas L和Survivin与乳腺癌的关系研究进展加以综述。