重症肌无力患者胸腺细胞凋亡障碍与Fas表达异常的关系

目的 :探讨重症肌无力 (MG)胸腺细胞凋亡异常、Fas表达异常在自身免疫应答形成中的作用。方法 :用手术切除的MG患者的胸腺 ,制备胸腺提取液和胸腺细胞悬液 ,用MTT比色法测定胸腺细胞的增殖 ;用DNA电泳及细胞形态学观察细胞凋亡 ;用流式细胞仪检测细胞表面Fas的表达 ,用RT PCR结合单链多态构象性分析 (SSCP) ,探讨Fas基因的转录及可能存在的Fas基因突变。结果 :MG患者的胸腺提取液 ,能抑制正常胸腺细胞增殖 ,但不能抑制MG患者胸腺细胞增殖。在地塞米松作用下 ,正常人及患者胸腺细胞的增殖均可被抑制 ,细胞增殖抑制率分别为 5 8.33%和 5 4 .2 6 %。MG患者胸腺细胞的DNA电泳可见梯状条带 ,并且胸腺细胞上Fas的表达百分率增加 [(2 0 .38± 6 .0 7) % ],与空白对照组 [(12 .4 3±4 .32 ) % ]相比较P <0 .0 5。对MG患者胸腺细胞FasmRNA进行RT PCR SSCP分析 ,部分MG患者出现异常电泳条带。结论 :MG患者胸腺细胞的凋亡及Fas分子表达均异常 ,而且存在Fas基因突变 ,提示与本病的发生发展有关。

复方辛夷平喘液对哮喘豚鼠肺内LCA及淋巴细胞Fas表达的影响

目的:观察中药复方辛夷平喘液对实验性哮喘豚鼠肺内LCA及淋巴细胞Fas表达的影响,探讨中药治疗哮喘的机理。方法:实验设空白组、哮喘模型组、中药3个剂量组及对照组。免疫组化法检测豚鼠肺内LCA,流式细胞仪检测外周血淋巴细胞Fas表达。结果:(1)免疫组化见模型组肺泡内有阳性细胞,支气管壁及管周见较多阳性细胞,较空白组明显增高;复方辛夷平喘液各组阳性表达较空白组高,但低于模型组。(2)哮喘模型组淋巴细胞的fas表达较空白对照组下降明显(P<0.01),复方辛夷平喘液各组fas表达水平较模型组均显著提高(P<0.01)。结论:哮喘豚鼠存在肺内LCA高表达、血淋巴细胞fas低表达;复方辛夷平喘液下调LCA表达、上调Fas表达可能是其控制哮喘的作用途径之一。

鼠暴发性肝衰竭中Fas表达与肝细胞凋亡的关系

目的:研究Fas表达及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor- α,TNF-α)在暴发性肝衰竭(fulminant hepatic failure, FHF)中与肝细胞凋亡的关系. 方法:采用脂多糖(LPS)和D-氨基半乳糖(D-GAIN)联合用药制备FHF小鼠模型;采用免疫组化方法检测肝组织Fas表达, 分别采用ELISA方法和RT-PCR法检测血清TNF-α水平及肝组织TNF-αmRNA表达;采用肝组织DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL法检测肝细胞凋亡;在用药后2,4,8,12 h 的不同时期动态观察Fas表达、血清TNF-α水平及肝组织TNF-αmRNA表达及肝细胞凋亡的变化,并对模型鼠给予TNF-αmAb,动态观察上述指标的变化. 结果:在FHF模型小鼠中,用药后2 h开始Fas有少量表达,至8 h和12 h表达均很多,二者比较无显著差异, 与2 h组比较P<0.01,与4 h组比较P<0.05.用药后2-4 h 肝组织TNF-αmRNA表达显著增加(0.91±0.75,正常值为0.32±0.10),伴血清TNF-α水平升高(320±87 ng/L,正常值为17±7 ng/L),8h可出现典型的肝细胞凋亡表现,血清ALT和TBil水平显著增加(分别为9352±1 000nkat/L和163.7±34.5 μmoL/L,正常值分别为393±134 nkat/L 和14.9±4.8 μmoL/L),12 h肝细胞坏死和凋亡同时存在, 血清ALT和TBil水平达最高峰(分别为11141±1312nkat/L 和203.2±19.9 μmoL/L).给予TNF-αmAb后LPS/D-GalN 介导的肝细胞凋亡和损伤被阻断,Fas表达亦被阻断. 结论:在FHF中,TNF-α对肝细胞凋亡及肝损伤起重要的作用,肝细胞凋亡的发生与Fas的表达增加有关.

环孢菌素A对再生障碍性贫血患者骨髓细胞Fas表达及凋亡率的影响

目的研究环孢菌素A(Cs A)联用方案对再生障碍性贫血患者骨髓细胞Fas表达及单个核细胞(MNC)凋亡率的影响。方法选择医院2010年2月至2014年2月确诊为再生障碍性贫血患者48例,分为重型再生障碍性贫血(SAA)组和慢性再生障碍性贫血(CAA)组,各24例。两组患者均予以常规十一酸睾酮、丙种球蛋白及环孢菌素A治疗,SAA组加用抗人T细胞猪免疫球蛋白(ATG)治疗。结果 SAA组总有效率为66.67%,与CAA组的87.50%相比,差异无统计学意义(P>0.05);但SAA组明显缓解率显著低于CAA组(P<0.05)。两组治疗前CD34+Fas+细胞百分率相比,差异无统计学意义(P>0.05),但治疗后SAA组明显高于CAA组(P<0.05)。SAA组治疗后MNC凋亡率为(2.92±1.20)%,显著低于治疗前(P<0.05);CAA组治疗后MNC凋亡率为(2.27±0.74)%,显著低于治疗前的(6.46±2.17)%及SAA组治疗后的(2.92±1.20)%(P<0.05)。结论细胞Fas异常表达和再生障碍性贫血发病有一定联系,采用环孢菌素A联用方案治疗,可明显降低其骨髓MNC凋亡率。

平喘灵对哮喘大鼠血浆环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷含量及气道炎症细胞Fas表达的影响

目的探讨平喘灵对哮喘大鼠血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量及气道黏膜炎症细胞Fas表达的影响。方法用卵蛋白复制大鼠哮喘模型。采用放射免疫法检测各组大鼠血浆cAMP、cGMP含量;用免疫组织化学法检测气道黏膜炎症细胞Fas的表达。结果模型组大鼠较空白对照组大鼠血浆中cAMP含量、cAMP/cGMP比值明显降低,cGMP含量明显升高,气道黏膜炎症细胞Fas表达明显升高(P<0.05),组织形态学病变明显;经平喘灵治疗后,上述指标均得到改善(P<0.05)。结论平喘灵治疗支气管哮喘可能与其调节机体cAMP、cGMP含量及气道黏膜炎症细胞Fas表达,稳定cAMP/cGMP比值有关,且平喘灵与激素在治疗哮喘中有协同效应。

开肺化痰解毒法对人胚肺成纤维细胞Fas表达的影响

目的 :研究开肺化痰法对腺病毒作用后的人胚肺成纤维细胞Fas表达的影响。方法 :用 31、7b 型腺病毒攻击人胚肺成纤维细胞后 ,分别加入清肺口服液含药血清及利巴韦林注射液 ,用流式细胞仪检测各组细胞FAS蛋白的表达。结果 :经 31、7b 型腺病毒攻击后 ,病毒组Fas(CD95)的表达较正常组明显降低 ,含药血清组、利巴韦林组与病毒组比较 ,Fas(CD95)的表达均明显升高 ,空白血清组与病毒组比较无显著性差异 ,含药血清组与利巴韦林组比较无显著性差异。腺病毒 31型攻击后 ,含药血清组、利巴韦林组与正常细胞组比较有显著性差异。腺病毒 7b 型攻击后 ,含药血清组、利巴韦林组与正常细胞组比较无显著性差异。结论 :31、7b 型腺病毒对人胚肺成纤维细胞Fas的表达有一定的影响 ,腺病毒可能通过此机制延长其在细胞内的存活时间 ,以利于自身复制。清肺口服液含药血清对Fas的表达具有一定的调节作用 ,此作用可能是其清除病毒在体内的感染 。

幽门螺杆菌感染与胆囊癌组织中Ki67、MMP2及Fas表达的关系

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）已被世界卫生组织列为Ⅰ类致癌物,与胃癌和原发性肝癌等的发生密切相关[1].为探讨Hp感染与肿瘤增殖、凋亡及侵袭的关联,本研究就Hp感染与胆囊癌组织中Ki67、MMP2及Fas表达的关系进行研究.1 资料与方法1.1 资料：收集青海大学附属医院2010年5月至2013年8月原发性胆囊癌手术切除病理组织石蜡标本124例,所有患者术前未经放化疗治疗.男性73例,女性51例,平均年龄56.7岁.另选择同期进行肝脏手术切除或胆囊手术常规切除胆囊30例作为对照组,标本均为正常组织,其中男性18例,女性12例,平均年龄51.2岁.两组在年龄、性别方面无显著性差异.所有标本均经10％甲醛溶液固定,常规脱水、透明、浸蜡和石蜡包埋,并均经HE染色后确认病理诊断,临床资料完整.本研究经医院伦理委员会批准,实施前签定患者知情同意书.

干扰素对肿瘤细胞Fas表达的上调作用及与细胞凋亡的关系

目的研究干扰素(IFN)对肿瘤细胞表面Fas表达的调控,探讨其致凋亡机制。方法通过流式细胞仪测定肿瘤细胞的Fas表达,应用ELISA及Annexin V 染色检测细胞凋亡。对干扰素及抗Fas单克隆抗体诱导的肿瘤细胞凋亡进行评价。结果胃癌细胞系Kato-Ⅲ、AGS、肺癌细胞A549及喉癌细胞Hep-2均有不同程度的Fas表达,上述细胞与IFN-酌作用后Fas表达升高(P<0.05);IFN- 酌单独即可引起肿瘤细胞凋亡,同时可增加肿瘤细胞对抗Fas抗体的敏感性;IFN- 酌致凋亡及调节Fas表达的作用有时间依赖性,但不同细胞系对这两种因素致凋亡的敏感性不同。结论IFN治疗肿瘤的作用机制之一是增加肿瘤细胞Fas表达而致其凋亡,表明该药在肿瘤生物治疗中应用的合理性。

生活干预对ACS患者心理状态及sFas表达水平影响的研究

近年来，冠心病无论在发病机制、诊断、治疗还是预防方面都得到了长足的进步，但它还是威胁人类健康的第一大杀手。急性冠脉综合征（ACS）是20世纪80年代提出的新的诊断概念，代表冠状动脉病变程度不同的一组疾病，是严重心脏缺血事件，根据美国心脏病学会标准，ACS分为不稳定型心绞痛、非ST段抬高性心肌梗死、

结肠癌组织中Fas表达的定量分析

目的 :探讨Fas在结肠癌中的表达及其与肿瘤发生、发展及肿瘤分化程度的关系。方法 :用直接免疫荧光 -流式细胞技术对 5 0例结肠腺癌组织及手术切缘的正常结肠黏膜组织中Fas的表达进行定量检测 ,分析Fas表达与肿瘤大体类型、浸润深度、分化程度及淋巴结转移的关系。结果 :Fas在结肠癌组织中的平均阳性率及平均荧光指数均低于其手术切缘的正常结肠黏膜组织 ,在 12例伴有转移的结肠癌组织中Fas的平均阳性率及平均荧光指数均低于 38例没有转移的结肠癌 ;9例肿瘤限于肌层以内的结肠癌组织中Fas平均阳性率及平均荧光指数均高于 41例肿瘤侵及肌层以外的结肠癌病例。不同分化程度、不同大体类型的结肠癌组织中Fas的平均阳性率及平均荧光指数差异无显著性。结论 :结肠腺癌组织中Fas的表达受到了抑制 ,Fas的表达与肿瘤的转移及浸润深度呈负相关 。

重症肌无力患者胸腺组织中Bcl-2和Fas表达水平的研究

目的探讨凋亡相关基因Bcl-2、Fas(又称Apo-1抗原,CD95)在重症肌无力患者胸腺组织中的表达及其临床意义。方法通过免疫组化法,检测经手术治疗的56例重症肌无力患者的胸腺组织(31例胸腺增生、25例胸腺瘤)中Bcl-2、Fas的表达水平,并以25例正常胸腺组织(取自先天性心脏病手术中因显露视野需要而切除的胸腺组织)作为对照组。结果Bcl-2在胸腺瘤、胸腺增生组织中的表达均高于对照组,差别有显著性意义(均P<0.01),胸腺瘤和胸腺增生两组之间的Bcl-2表达水平差别无显著性意义(P>0.05);Fas在胸腺瘤中的表达上升,明显高于胸腺增生组和对照组(均P<0.01),胸腺增生组与对照组Fas表达水平差别无显著性意义(P>0.05)。结论Bcl-2的高水平表达导致胸腺免疫异常,在重症肌无力的发生中起重要作用,而Fas在胸腺瘤的发生中起重要的作用。

顺铂诱导的肝癌细胞凋亡与Fas表达的临床研究

探讨顺铂 (CDDP)在人体内诱导肝癌细胞凋亡及其与Fas表达的关系。将 30例肝细胞性肝癌 (HCC)患者随机分成两组 :CDDP治疗组患者在术前行顺铂诱导治疗 (30mg/d ,静脉滴注 ,连续 4天 ) ;对照组则未给予任何化疗药物。流式细胞仪检测两组HCC患者手术标本的细胞凋亡 (APO) ;免疫组化 (SP法 )检测肿瘤组织Fas蛋白及p5 3蛋白的表达 ;并作相关性分析。CDDP组APO为 (7 72± 6 6 6 ) %较对照组明显增高 (t=4 0 9,P <0 0 1) ;CDDP组Fas的表达 (10 / 16 )明显高于对照组 (3/ 14 ,P <0 0 5 ) ;p5 3的表达在两组间无差异 (CDDP组 5 / 16例 ,对照组 4 / 14例 ,P >0 0 5 ) ;CDDP组中Fas与p5 3的表达无相关性 (P >0 0 5 )。CDDP在人体内能够诱导肝癌细胞凋亡而起治疗作用 ;

研究环孢菌素A对再障病患骨髓细胞Fas表达及凋亡率的影响

目的:研究环孢菌素A(CsA)对再生障碍病患骨髓细胞Fas表达及凋亡率的影响。方法:从2010年2月-2013年2月,本院共计48例病患被确诊为再障。以数字法随机分成观察组24例和对照组24例,对照组以注射用丹参治疗,观察组在此基础上另以CsA治疗。对比两组疗效,分析CsA对于再障病患骨髓Fas表达情况和对MNC有关凋亡率影响。结果:观察组总有效率为83.33%(20/24),显著高于对照组的37.50%(9/24),比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组在治疗前后CD34+Fas+的细胞百分率相比,差异无统计学意义。观察组病患骨髓CD34-细胞的Fas表达和对照组相比,差异无统计学意义。观察组治疗后MNC有关凋亡率为(2.27±0.74)%,显著低于治疗前的(6.58±2.33)%,以及对照组治疗后的(2.92±1.20)%,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:细胞Fas异常表达和再障发病情况有一定联系,以CsA治疗再障病患,可明显降低其骨髓MNC凋亡率,疗效显著,值得临床推荐。

苯妥英钠对大鼠脑缺血再灌注后脑内Fas表达的抑制作用

目的观察脑缺血再灌注后Fas基因在脑内的表达及苯妥英钠对其的影响。方法采用夹闭大鼠双侧颈总动脉的急性前脑缺血再灌注模型和免疫组织化学染色法。结果脑缺血再灌注后神经细胞过度地表达Fas,尤以缺血半暗带明显,且Fas表达分布广泛;苯妥英钠给药组(30、60mg/kg)Fas阳性细胞的表达数显著低于不给药的生理盐水对照组(P<0.01),且两剂量组之间差异无统计学意义。结论①苯妥英钠对缺血再灌注脑损伤有保护作用;②苯妥英钠拮抗缺血再灌注脑损伤的机制与其抑制Fas表达从而减少缺血诱导的神经细胞凋亡有关。

移植胰腺再灌注后细胞凋亡及Fas表达的实验研究

目的 探讨胰腺移植再灌注后胰腺细胞凋亡发生的过程及凋亡相关基因Fas的表达。方法 将60只SD大鼠随机分成7组:假手术组(5只),冷缺血2小时组(I组,5只),冷缺血2小时再灌注1、3、6、9、12小时组(I/R1组、I/R3组、I/R6组、I/R9组、I/R12组,各10只)。HE染色后光镜及电镜观察各组胰腺组织的病理变化;流式细胞仪检测各组胰腺细胞的凋亡百分比;采用免疫组织化学方法检测各组胰腺组织中Fas蛋白的表达。结果胰腺移植后早期即可观察到细胞凋亡的典型改变,胰腺冷缺血再灌注后发生凋亡的高峰期为再灌注后3小时[凋亡率(AR)为(12.61％±2.94％),P<0.01],再灌注6小时较3小时细胞凋亡有所减少[AR为(6.35％±2.19％),P<0.01),再灌注9小时及12小时细胞凋亡进一步减少[AR分别为(3.67％±1.44％)及(3.33％±1.03％),P<0.05]。假手术组与I/R3组均未见Fas蛋白表达,I/R1组Fas(+);至I/R3组Fas表达增强为(++),以后各组表达有所下降。结论 细胞凋亡是胰腺移植后的早期事件,移植胰腺冷缺血再灌注后的凋亡高峰发生在再灌注后3小时;移植胰腺的细胞凋亡受基因调控,Fas基因可促进胰腺细胞的凋亡。

舒筋Ⅰ号对退变腰椎间盘细胞Fas表达的影响

目的:探讨舒筋Ⅰ号对退变腰椎间盘细胞Fas表达的影响。方法:采用纤维环针刺法复制腰椎间盘退变动物模型。造模成功后,将30只大鼠随机分为舒筋Ⅰ号(Shu Jin No1,SJ)、活血方(Huoxue Decoction,HD)、模型对照组(model control group,MC)3组,给药2周。采用免疫组化法检测椎间盘细胞Fas表达情况。结果:舒筋Ⅰ号、活血方均可抑制间盘细胞Fas的表达。结论:舒筋活血药物抑制Fas表达可能是其治疗椎间盘退变的机理之一。

鼻咽非角化性癌Fas表达与癌细胞增生和凋亡的关系

目的检测正常鼻咽组织以及鼻咽非角化性癌癌细胞Fas的表达,探讨其表达与癌细胞增生和凋亡的关系。方法收集中山大学附属第一医院病理科37例未治疗的非角化性鼻咽癌活检组织标本。应用免疫组化法检测鼻咽癌组织中Fas和癌细胞PCNA的表达;应用原位细胞凋亡检测法(TUNEL)计数癌细胞的凋亡(Apoptosis Count,AC)。结果正常鼻咽粘膜表面及隐窝的假复层纤毛柱状上皮细胞、鳞状化生上皮、部分小涎腺的导管上皮细胞的胞膜和胞浆Fas阳性表达。45.9%(17/37)的鼻咽非角化性癌的少数癌细胞Fas弱阳性。癌细胞表达Fas与癌细胞凋亡计数AC无关(P>0.05)。Fas阴性病例癌细胞增生指标显著高于Fas阳性病例(P<0.01)。结论Fas对鼻咽非角化性癌癌细胞的自发性凋亡不起主导作用,鼻咽非角化性癌细胞大多处于细胞增生周期是导致癌细胞自发性凋亡非Fas途径的主要原因之一。