老年胃癌患者血清整合素β6和组织中Prox-1、FAT4表达变化及意义

目的探讨老年胃癌患者血清整合素β6和组织中同源异型盒基因转录因子(Prox)-1、脂肪非典型钙黏蛋白(FAT)4表达变化及对淋巴结转移的预测价值。方法选取老年胃癌患者80例为胃癌组,老年健康志愿者48例为对照组。采集空腹肘静脉血4 ml,双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测血清整合素β6浓度;术中采集老年胃癌患者的胃癌组织标本和癌旁正常组织标本,免疫组化法检测Prox-1、FAT4表达。结果胃癌组血清整合素β6浓度明显高于对照组(P<0.01)。胃癌组织中Prox-1表达阳性率明显高于癌旁正常组织,FAT4表达阳性率明显低于癌旁正常组织(P<0.01)。肿瘤淋巴结转移分类(TNM)分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径>4 cm、分化程度未分化或低分化、有淋巴结转移的老年胃癌患者血清整合素β6浓度明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径>4 cm、分化程度未分化或低分化、有淋巴结转移的老年胃癌患者Prox-1阳性率明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者,FAT4阳性率明显低于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤4 cm、分化程度中分化或高分化、无淋巴结转移的患者(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清整合素β6及组织中Prox-1、FAT4表达水平单独和联合检测对老年胃癌患者淋巴结转移均具有较高的预测价值(P<0.05),其中血清整合素β6及组织中Prox-1、FAT4表达水平联合检测的预测价值最高[曲线下面积(AUC)=0.941],特异度和阳性预测值明显高于各指标单独检测(P<0.05)。结论老年胃癌患者血清整合素β6浓度升高,组织中Prox-1高表达、FAT4低表达,且与病理指标相关,联合检测可用于对患者淋巴结转移的预测。

FAT4的表达对人卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响

目的研究FAT4在上皮性卵巢癌组织中表达及其对人上皮卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响。方法采用免疫组化方法检测上皮性卵巢癌及正常卵巢上皮组织FAT4蛋白表达。FAT4-siRNA转染人上皮卵巢癌细胞A2780、qRT-PCR和Western blot方法检测FAT4基因沉默效果,CCK-8及Transwell实验分析FAT4基因敲除后细胞增殖及侵袭能力的改变。结果上皮性卵巢癌组织中FAT4为胞质和核分布,明显高于正常卵巢上皮组织(P<0.01),FAT4表达与患者年龄、月经情况和病理类型无明显相关性(P>0.05),而与上皮性卵巢癌肿瘤大小(P=0.020)、FIGO分期(P=0.002)以及病理分级(P=0.029)有明显相关性(P<0.05);FAT4干扰可显著抑制人卵巢癌细胞A2780增殖及侵袭能力(P<0.01)。结论FAT4高表达与肿瘤临床分期及分化程度相关,体外实验证实FAT4与卵巢癌细胞增殖及侵袭相关,为上皮性卵巢癌治疗提供了新的靶点。

FAT4表达水平与胃癌临床病理因素和远期生存率相关性分析

目的观察FAT4在胃癌中的表达水平,以及其与胃癌病理因素和远期生存率的关系。方法胃癌手术病人的新鲜组织标本30例,采用qRT-PCR和Western blotting检测胃癌组织及其配对癌旁组织FAT4表达水平和蛋白含量;收治满5年的胃癌手术病人的石蜡包埋组织样本160例,采用免疫组化检测胃癌标本FAT4表达,以及与胃癌临床因素和5年生存率的相关性。结果30例新鲜胃癌组织中FAT4 mRNA表达下调,胃癌组织中FAT4 mRNA表达水平低于癌旁组织(P<0.05),胃癌组织中FAT4 mRNA蛋白含量低于癌旁组织(P<0.05)。160例胃癌组织免疫细化检测FAT4的表达下调,其中FAT4表达阴性122例(76.25%),FAT4的阴性表达与肿瘤的大小、分化程度、TNM分期、肝转移无关(P>0.05),与淋巴转移和远期生存率有关(P<0.05),FAT4阴性表达病人5年总体生存率差(P<0.05)。结论 FAT4在胃癌组织中呈低表达,其低表达与淋巴转移和不良预后密切相关。

胃癌4q28位点杂合性缺失的研究与候选基因FAT4表达的验证

目的:研究胃癌组织中4q28位点杂合性缺失(LOH)的频率,并验证该位点候选基因FAT4mRNA表达情况。方法:在4q28位点选择与FAT4连锁的2个微卫星标记D4S2975和D4S1644,应用PCR产物毛细管电泳法分析68例手术切除的胃癌标本中这2个微卫星位点的LOH频率;应用RT-PCR法验证9个胃癌细胞株及39例新鲜胃癌加配对正常组织中该位点FAT4mRNA的表达水平。将相关检测结果与多种临床病理参数进行比较分析。结果:68例胃癌组织中D4S2975和D4S1644位点的LOH频率分别为35.56%(16/45)和40.74%(11/27),2个微卫星位点平均LOH频率为38.15%。检测39例新鲜胃癌及配对正常组织的FAT4mRNA表达水平,其中12例(30.77%)胃癌组织的FAT4mRNA表达较其配对正常组织明显下降。经与多种临床病理参数比较分析发现,FAT4mRNA表达下调与胃底贲门部胃癌密切相关(P=0.029),40岁以下青年型胃癌有FAT4表达丢失倾向,但差异无统计学意义(P=0.095)。结论:胃癌中4q28位点存在较高频率的LOH,对该位点内候选抑癌基因FAT4mRNA表达验证显示,部分胃癌组织存在FAT4表达下调,该基因下调与胃癌的发生部位及患者年龄间可能存在一定关系。

FAT4、CUL4、YAP在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨胃癌细胞侵袭过程中FAT4、CUL4、YAP在调控Hippo通路的作用及机制。方法免疫组织化学法检测胃癌组织及正常胃组织中FAT4、CUL4及YAP的表达情况,分析其表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系;Western blot法测定胃癌组织及正常胃组织中FAT4、CUL4及YAP蛋白表达情况。结果胃癌细胞中FAT4、CUL4和YAP在性别、病理类型阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05),在胃癌的分化程度及淋巴结转移之间比较,差异有统计学意义(P<0.05),且淋巴结无转移、分化程度较高的FAT4、CUL4和YAP阳性表达率高;免疫组织化学发现胃癌组织中CUL4和YAP表达量较正常胃组织增多,胃癌组织中FAT4表达量较正常胃组织减少;胃癌组织中CUL4及YAP蛋白表达量高于正常胃组织,差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中FAT4蛋白表达量低于正常胃组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论FAT4通过调控Hippo-YAP信号通路抑制胃癌细胞侵袭过程,CUL4通过调控Hippo-YAP信号通路促进胃癌细胞侵袭过程。

FAT4基因功能性单核苷酸多态性和中国江苏人群胃癌易感性相关

目的：探讨FAT4基因单核苷酸多态性与江苏人群胃癌遗传易感性的关系。方法：采用人群为基础的病例对照研究对来自江苏的783例经组织病理学确诊的胃癌新发病例和按照性别年龄匹配的855例健康对照,利用实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法对FAT4基因上非同义氨基酸多态性位点进行基因分型,比较各位点不同基因型与胃癌发病风险的关系。结果：利用Logistic回归模型在相加模型中进行了分析的结果显示,在调整性别。年龄。吸烟和饮酒等因素后,携带rs1039808 A等位基因的个体胃癌发病风险显著低于携带野生纯合子（GG）的个体（OR = 0.74,95%CI：0.62-0.88,P = 0.001）。分层分析显示,在各亚组间rs1039808不同基因型与胃癌发病风险的关联强度没有显著差异。结论：FAT4基因单核苷酸多态性rs1039808 A等位基因能显著降低胃癌发病风险。

YAP1、FAT4蛋白在卵巢癌组织中的表达特点及临床意义

目的探讨Yes相关蛋白(YAP1)、FAT4蛋白在卵巢癌组织中的表达及其相互之间的关系。方法选取该院2015年1月至2017年6月收集的术后卵巢癌组织80例(恶性组)、卵巢良性肿瘤组织80例(良性组)为研究对象,采用免疫组织化学染色检测2组标本中的YAP1、FAT4蛋白表达水平,采用Spearman秩相关分析法探讨二者间的关系,并分析两类蛋白与卵巢癌的病理类型、分化程度、临床分期、淋巴结转移之间的关系。结果恶性组患者的YAP1蛋白、FAT4蛋白阳性表达率分别为61.25%、71.25%,均显著高于良性组(18.75%、26.25%),差异有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌组织中的YAP1蛋白与FAT4蛋白阳性表达呈显著正相关性(r=0.629,P=0.000)。卵巢癌组织中的YAP1蛋白阳性表达与肿瘤分化程度、临床分期有关(P<0.05);FAT4蛋白阳性表达与卵巢癌患者的肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结是否转移有关(P<0.05)。结论卵巢癌组织中的YAP1蛋白、FAT4蛋白表达上调,相互间呈正相关关系,与卵巢癌的发生发展关系密切。

FOXC1、FAT4及YAP1蛋白在上皮性卵巢癌组织表达水平及意义研究

目的探讨FOXC1、FAT4及YAP1蛋白在上皮性卵巢癌组织表达水平及意义。方法收集了72例上皮性卵巢癌组织标本进行研究,同时选取正常卵巢组织标本60例,采用免疫组化染色法检测FOXC1、FAT4及YAP1蛋白表达。结果上皮性卵巢癌组织FOXC1蛋白阳性表达率为41.67%,明显低于正常卵巢组织(P<0.05),而FAT4蛋白阳性表达率为80.56%,YAP1为76.39%,明显高于正常卵巢组织(P<0.05);Ⅲ期、中低分化及有淋巴结转移患者FOXC1蛋白阳性表达率分别为14.29%、20.00%和18.52%,明显低于Ⅰ~Ⅱ期、高分化及无淋巴结转移患者(P<0.05);中低分化及有淋巴结转移患者FAT4、YAP1蛋白阳性表达率分别为95.00%和100.00%,90.00%和96.30%,明显高于高分化及无淋巴结转移患者(P<0.05);Ⅲ期患者YAP1蛋白阳性表达率为100.00%,明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05);FOXC1蛋白与FAT4、YAP1蛋白呈负相关(γs=-0.297和-0.294,P<0.05),FAT4蛋白与YAP1蛋白呈正相关(γs=0.471,P<0.05)。结论上皮性卵巢癌组织FOXC1蛋白呈低表达,FAT4及YAP1蛋白呈高表达,三者的表达与患者临床病理特征有一定相关性,值得深入研究。

上皮性卵巢癌中FAT4、YAP1表达及临床意义

目的探讨上皮性卵巢癌中FAT4、YAP1的表达意义。方法以该院检验科室2018年2月—2020年2月保存的92例卵巢癌组织标本为研究对象,将其纳入观察组。同时,选取同时期的90例卵巢良性肿瘤标本作为对照组。两组分别通过免疫组化染色法对样本的FAT4、YAP1表达进行检测。结果观察组FAT4和YAP1蛋白阳性表达率分别为73.91%和76.09%,明显高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=16.374、25.791,P<0.05);病理分级低分化患者FAT4和YAP1蛋白阳性表达率分别为80.28%和81.69%,明显高于高分化+中分化患者,差异有统计学意义(χ^(2)=6.543、5.367,P<0.05);浆液性癌患者蛋白YAP1阳性表达率为87.04%,明显高于黏液性癌患者,差异有统计学意义(P<0.05);卵巢癌组织FAT4与YAP1表达呈正相关(rs=0.479,P<0.05)。结论上皮性卵巢癌中FAT4、YAP1表达明显升高,与患者临床病理特征有一定关联,值得进一步研究。

大肠癌组织中FAT4和YAP的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的探讨脂肪非典型钙黏蛋白4(FAT4)和Yes相关蛋白(YAP)在大肠癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组化En Vision法检测80例大肠癌组织及对应癌旁正常组织中FAT4和YAP的表达情况,并分析大肠癌组织中FAT4和YAP表达的相关性及其与临床病理特征和预后的关系。结果大肠癌组织中FAT4阳性表达率为32.50%,明显低于癌旁正常组织的66.25%,差异有统计学意义(P<0.01)。大肠癌组织中YAP阳性表达率为61.25%,明显高于癌旁正常组织的13.75%,差异有统计学意义(P<0.01)。FAT4阳性表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和TNM分期均有关(均P<0.01),YAP阳性表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移均有关(均P<0.01)。大肠癌组织中FAT4的表达和YAP的表达呈负相关(r=-0.434,P<0.01)。FAT4表达阳性者3年生存率为84.62%,明显高于FAT4表达阴性者的48.15%,差异有统计学意义(P<0.01);YAP表达阳性者3年生存率为44.89%,明显低于YAP表达阴性者的83.87%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论大肠癌组织中FAT4表达降低,而YAP表达升高,两者异常表达可能与大肠癌的发生、发展及预后密切相关。

FAT4通过调节乳腺癌耐药蛋白表达调节结直肠癌对5-FU的耐药性研究

[目的]研究FAT4通过上调乳腺癌耐药蛋白(BCRP)影响结直肠癌对5-FU的耐药性。[方法]采用RT-PCR检测50例结直肠癌患者中癌组织以及相应癌旁组织和正常组织中FAT4表达量;采用免疫组化检测手术组以及手术+新辅助化疗组中FAT4以及BCRP的相对表达量,并采用Pearson相关性分析FAT4与BCRP表达水平间的相关性;采用RT-PCR检测各结直肠癌细胞系(SW48、HT-29、HCT-116、SW620、DLD1、SW480、CaCO2、LOVO)中FAT4和BCRP mRNA的表达量;构建过表达FAT4或敲降FAT4的直肠癌细胞系,用RT-PCR以及Western blot检测FAT4表达水平的变化;进一步使用5-FU刺激过表达FAT4或敲降FAT4的直肠癌细胞系,MTT检测其增殖能力的变化。[结果]与正常组织以及癌旁组织比较,FAT4以及BCRP在癌组织中表达量较高(P<0.001),5-FU刺激结直肠癌细胞后,与对照组比较,FAT4过表达可以增加其细胞增殖能力(P<0.01),FAT4敲减可以降低细胞增殖能力(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,结直肠癌患者中FAT4和BCRP表达水平存在明显的正相关(P<0.001)。在HT-29细胞中FAT4过表达能促进BRCP的表达,在SW480细胞中FAT4敲减后会抑制BRCP的表达;在过表达FAT4的结直肠癌细胞中转染shBCRP会降低其对5-FU的耐药性。[结论]FAT4通过上调耐药基因BCRP,使直肠癌细胞对5-FU的耐药性增加。

MUC1、FAT4、EGFR在食管癌中的表达变化及临床意义

[目的]比较食管癌患者食管黏膜组织黏蛋白1(MUC1)、钙黏蛋白FAT4和表皮生长因子受体(EGFR)表达水平,并探讨其联合检测的临床意义。[方法]选择院2015年12月至~2017年10月收治的70例食管癌患者为研究对象,并选择同期30例健康患者为对照,采用免疫组化方法检测组织MUC1、FAT4、EGFR的表达,并分析其临床意义。[结果]研究组患者MUC1、EGFR表达阳性率显著高于对照组,FAT4表达阳性率显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);FAT4表达阳性率与MUC1、EGFR负相关(r=-0.683,-0.714),MUC1表达阳性率与EGFR正相关(r=0.806),差异均有统计学意义(P<0.05)。MUC1、FAT4、EGFR表达阳性率与淋巴结转移、肿瘤分期密切相关,差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论]食管癌患者食管黏膜组织MUC1、EGFR表达阳性率升高,FAT4表达阳性率降低,MUC1、FAT4、EGFR表达密切相关,与肿瘤转移、侵袭相关,可作为食管癌的诊断标志物。

过表达脂肪非典型钙黏蛋白4对结直肠癌化疗耐药的影响

目的探讨过表达脂肪非典型钙黏蛋白4(fat atypical cadherin 4,FAT4)对结直肠癌化疗耐药的影响。方法取正常人类肠黏膜上皮细胞系FHC、人结直肠癌HCT116细胞进行培养,用实时荧光定量(real-time fluorescence quantitative analysis,RT-PCR)检测FAT4 mRNA的表达水平;过表达人结直肠癌HCT116细胞中的FAT4,细胞转染48 h后,用RT-PCR检测HCT116细胞中FAT4 mRNA的表达水平;用蛋白质印迹法检测FAT4蛋白的相对表达量;用CCK-8法检测FAT4过表达对人结直肠癌HCT116细胞增殖活性的影响,计算药物半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC;)、化疗耐药倍数(resistance fold,RF);用流式细胞仪检测细胞凋亡率;用免疫共沉淀(co-immuoprecipiated,Co-IP)检测FAT4与p53、鼠双微粒体基因2(murine double minute2,MDM2)蛋白的相互关系;用蛋白质印迹法检测p53、磷酸化p53(phosphorylate-p53,p-p53)和MDM2蛋白的相对表达量。结果人结直肠癌HCT116细胞中FAT4 mRNA的相对表达量为(0.36±0.12),正常人类肠黏膜上皮细胞中FAT4 mRNA的相对表达量为(1.02±0.35)(P<0.05);FAT4在结直肠癌HCT116细胞中呈低表达;对照组转染效率为89.58%,实验组为90.05%;各组细胞的增殖活性均随奥沙利铂质量浓度的增加而降低(P<0.05);与空白组、对照组比较,实验组FAT4 mRNA的相对表达量、FAT4蛋白的相对表达量升高,IC;值降低,细胞凋亡率升高(P<0.05);空白组、对照组和实验组RF分别为5.65、5.75和2.18倍;Co-IP实验结果显示,FAT4与p53、MDM2均存在特异的相互作用;与空白组、对照组比较,实验组p-p53蛋白的相对表达量升高,MDM2蛋白的相对表达量降低(P<0.05)。结论FAT4过表达可抑制结直肠癌HCT116细胞的增殖,促进细胞的凋亡,降低化疗耐药性,该作用可能通过调节MDM2-p53通路实现。