FBLN5在前列腺癌组织中的表达及对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨扣针蛋白5(FBLN5)在前列腺癌组织中的表达及对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响。方法 收集2019年9月至2021年9月于本院就诊的45例前列腺癌患者,采用实时定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测患者癌组织及癌旁组织、正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)、前列腺癌细胞系(C4-2B、DU145、PC-3)中FBLN5表达水平;以前列腺癌细胞DU145为研究对象,设置空白对照组、FBLN5小干扰RNA(si FBLN5)组、小干扰阴性对照(si NC)组、FBLN5过表达(PCMV FBLN5)组、PCMV阴性对照(PCMV NC)组。Transwell实验检测各组细胞侵袭、迁移数;CCK-8法检测各组细胞增殖能力;Western blot检测各组细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、FBLN5、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、细胞周期素D1(Cyclin D1)蛋白表达水平。结果 与癌旁组织相比,前列腺癌患者癌组织中FBLN5 mRNA表达显著下降(P<0.05);与RWPE-1细胞相比,C4-2B、DU145、PC-3细胞中FBLN5 mRNA表达显著下降,以DU145细胞变化最为显著(P<0.05);与空白对照组、PCMV NC组相比,PCMV FBLN5组细胞侵袭数、迁移数、A450值(24 h、48 h)、MMP-2、Cyclin D1蛋白表达显著下降,E-cadherin、FBLN5、p21蛋白表达显著增加(P<0.05);与空白对照组、si NC组相比,si FBLN5组细胞侵袭数、迁移数、A450值(24 h、48 h)、MMP-2、Cyclin D1蛋白表达显著增加,E-cadherin、FBLN5、p21蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论 FBLN5在前列腺癌组织中表达下降,FBLN5过表达可抑制前列腺癌细胞的增殖、侵袭与迁移。

梅花鹿Fibulin 5编码区cDNA的克隆及功能研究

为研究梅花鹿扣针蛋白5(Fibulin 5, FBLN5)在鹿茸再生过程中的作用,本研究通过RT-PCR获得了梅花鹿FBLN 5的cDNA编码区,并对其进行生物信息学分析。同时利用RNA干扰技术(RNA interference, RNAi)下调了梅花鹿角柄骨膜致敏区(Potentiated pedicle periosteum, PPP)细胞中FBLN5基因表达,并研究了基因表达下调后PPP细胞条件培养液对HUVEC细胞增殖的影响。结果显示:(1)梅花鹿FBLN5 cDNA编码区长1 347 bp,编码448个氨基酸;(2)生物信息学软件分析显示,梅花鹿FBLN5蛋白含有一个跨膜区,一段23个氨基酸的信号肽序列,vWA_Matrilin、cEGF和EGF_CA等重要的功能结构域;(3)构建了梅花鹿FBLN5基因的RNAi重组质粒并获得了一条能有效下调目的基因效率达88.72%的靶序列pLVTHM-FBLN2,MTT结果显示PPP细胞FBLN5基因表达量下调后,所获细胞条件培养液可显著促HUVEC细胞增殖,推测FBLN5可能参与了鹿茸再生过程中的血管生成及稳态维持等过程。