乳腺癌中FBX022基因通过HIF-1α对血管形成的影响

目的探讨FBXO22基因在乳腺癌血管形成中的作用及分子生物学机制。方法使用FBXO22-siRNA转染人乳腺癌MDA—MB-231和BT-549细胞，体外血管形成实验观察2种乳腺癌细胞中干扰FBXO22后使人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）血管形成数量的变化；Western blot检测FBXO22-siRNA对2种乳腺癌细胞中FBX022、缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1，HIF—1α）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）蛋白表达的影响；Real time—PCR检测干扰FBXO22对2种乳腺癌细胞中HIF-1α和VEGF的mRNA水平的影响。结果在MDA—MB-231和BT-549细胞中干扰FBXO22后分为FBXO22-Ctrl组和FBXO22-si组。与FBX022-Ctrl组相比，MDA—MB-231和BT-549细胞FBX022-si组血管形成数目分别增加了107．1％和181．8％；FBXO22蛋白表达量分别减少了55．5％和51．9％；HIF-1α蛋白表达量分别上升了39．3％和68．4％；VEGF蛋白表达量分别上升了40．7％和21．7％；HIF-1α和VEGF的mRNA水平无明显变化。结论在乳腺癌中FBX022作为抑癌基因对血管形成发挥着重要作用，干扰FBX022后能够通过HIF-1α通路导致VEGF蛋白表达量提高并促进血管形成。

FBXO22基因在肾癌细胞侵袭中的作用及相关机制研究

目的：观察小干扰RNA（siRNA）沉默FBXO22基因对人肾癌细胞株（786－O、ACHN）细胞迁移、侵袭能力的影响。方法分别用siRNA－Ctrl和siRNA－FBXO22小干扰RNA转染人肾癌细胞株786－O和ACHN细胞；Western blot实验检测FBXO22蛋白表达量，CCK－8实验检测FBXO22基因对肾癌细胞增殖的影响，Transwell细胞迁移实验和侵袭实验检测沉默FBXO22基因后对786－O和ACHN肾癌细胞迁移能力和细胞侵袭能力的影响，明胶酶谱实验检测细胞分泌基质金属蛋白酶（ MMPs）的能力。结果转染FBXO22 siRNA后肾癌786－O及ACHN细胞的FBXO22表达下调，迁移和侵袭能力提高，分泌MMP－9的能力升高，但对肾癌细胞增殖无影响。结论沉默FBXO22基因后，可以增加MMP－9的分泌，从而激活MMP－9信号通路增强肾癌786－O细胞及ACHN细胞的迁移和侵袭的能力。

FBXO22对结肠癌细胞侵袭迁移的影响及相关机制

目的 :探讨结肠癌细胞FBXO22基因表达沉默后对细胞侵袭迁移的影响及其相关分子机制。方法 :利用siRNA-Ctrl和siRNA-FBXO22小干扰片段转染结肠癌SW620和HCT116细胞,干扰FBXO22基因表达,Western blot检测细胞转染效率,Transwell细胞迁移实验分析干扰FBXO22对细胞侵袭迁移的影响,Western blot检测细胞侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9和MDM2水平的变化。结果 :转染FBXO22 siRNA后,结肠癌SW620和HCT116细胞FBXO22的表达量明显下降、细胞侵袭转移能力降低,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低,而MDM2蛋白表达水平上调。结论:FBXO22与结肠癌细胞侵袭迁移相关,其机制可能通过调节MMP-2和MMP-9表达而实现。