血脉通颗粒对基因FBXW7α及其下游Toll样受体炎症信号通路的影响

目的探讨血脉通颗粒干预基因FBXW7α及其下游Toll样受体4(TLR4)炎症信号通路对动脉粥样硬化(AS)的作用。方法 22只8周龄ApoE基因敲除小鼠给予高脂饲料喂养13周,确认AS斑块形成后随机分为血脉通组和对照组。血脉通组给予灌胃给予血脉通,1次/d,对照组给予等量生理盐水,6周后处死。RT-PCR检测小鼠主动脉弓部FBXW7α(F框/WD-40域蛋白7)、TLR4、核因子κB(NF-κB)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的相对表达;Western blot检测小鼠主动脉弓部FBXW7α、C/EBPδ、TLR4的表达情况;ELISA检测小鼠血浆IL-6和TNF-α的表达水平。体外应用脂多糖刺激RAW267.4细胞株,同时给予血脉通颗粒含药血清进行干预,应用RT-PCR检测细胞中TLR4信号通路相关因子的表达;应用ELISA法测定培养上清液中炎症因子IL-6和TNF-α的表达。结果无论是体内实验还是体外培养实验,结果均显示血脉通组FBXW7α表达水平明显高于对照组,而C/EBPδ、TLR4、NF-κB、IL-6和TNF-α表达水平均显著低于对照组(P<0.01);血脉通组小鼠血浆和培养上清液中炎症因子IL-6和TNF-α的水平亦显著低于对照组(P<0.01)。结论血脉通颗粒可增强FBXW7α的表达进而抑制TLR4信号通路中相关分子的表达和过度激活,减少炎症因子IL-6和TNF-α的分泌,可能是其抗AS的机制之一。

蛋白Fbxw7α与P53相互作用的研究

Fbxw7α是SCF(SKP1-Cullin 1-F-box)蛋白泛素连接酶复合物的组分,它可以降解肿瘤中的许多原癌基因。在多种类型的癌症中均发现了Fbxw7α的突变,因此Fbxw7α被认为是癌发生中的肿瘤抑制因子。然而,Fbxw7α在细胞周期中的作用仍然有很大的未知性。本文在293T细胞中使用免疫共沉淀偶联LC-MS/MS方法,比较了野生型Fbxw7α和F-box缺失的不能与Cullin1形成SCF复合物的Fbxw7α突变体(?Fbxw7α)的相互作用蛋白,并发现关键细胞周期检查点P53与两种形式的Fbxw7α都具有相互作用。然而,Fbxw7α的异位表达没有抑制P53的表达,表明P53不是用于蛋白酶体降解的Fbxw7α的底物。另外,发现WT Fbxw7α和?Fbxw7α的表达诱导细胞周期停滞在G1期。综上,研究证明了Fbxw7α和P53之间的直接相互作用,并揭示了Fbxw7α调节细胞周期的新机制。

FBXW7α对结直肠癌细胞中热休克转录因子1表达和定位的影响

目的探讨FBXW7对结直肠癌细胞中热休克转录因子1(HSF1)表达和定位的影响。方法Western blot法检测敲除FBXW7及WT的结直肠癌细胞系HCT116和DLD1中HSF1及pHSF1Ser326蛋白的表达;免疫荧光和Western blot检测在热休克及恢复期细胞中pHSF1Ser326的核蛋白表达和定位。结果过表达FBXW7α的DLD1细胞中HSF1蛋白表达显著降低(P<0.01);敲除FBXW7的HCT116和DLD1细胞中HSF1和pHSF1Ser326总蛋白表达显著升高(均P<0.05)。与WT组比较,敲除FBXW7的细胞中HSF1和pHSF1Ser326主要累积在细胞核,而胞质表达较弱;温热刺激后,WT细胞中HSF1及pHSF1Ser326表达恢复至未刺激水平,而敲除FBXW7的细胞中HSF1及pHSF1Ser326在核中有较强表达(均P<0.01)。结论敲除FBXW7的结直肠癌细胞热刺激后,细胞核HSF1水平恢复受阻,可能与缺失FBXW7不能降解胞核HSF1有关。

FBXW7通过抑制c-Myc/SOX2/SLC7A11促进头颈鳞癌细胞铁死亡

目的探究FBXW7对头颈鳞状细胞癌铁死亡的影响。方法体外培养头颈鳞癌细胞系HN4和HN6,构建FBXW7,SOX2过表达质粒,将质粒稳定转染细胞系培养,采用qRT-PCR和Western blot实验分别在转录水平和蛋白水平验证过表达转染效率。通过检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和活性氧(ROS)水平来验证过表达FBXW7后头颈鳞癌细胞的脂质过氧化水平。用铁死亡抑制剂Fer-1处理细胞后进一步检测细胞活力变化验证FBXW7对铁死亡的影响。通过Western blot检测转染过表达质粒后对细胞通路的影响。结果HN4和HN6细胞系在过表达FBXW7后表现出脂质过氧化水平增加,铁死亡抑制剂Fer-1能够有效逆转过表达FBXW7引起的细胞铁死亡。Western blot实验结果显示过表达FBXW7降低了c-Myc、SOX2和SLC7A11的表达。结论FBXW7通过降解c-Myc来调控SOX2-SLC7A11的表达,从而有效调控头颈鳞状细胞癌铁死亡。

miR-424靶向FBXW7对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨miR-424靶向F-box和WD重复结构域7(F-Box and WD repeat domain containing 7,FBXW7)轴对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞增殖、凋亡的影响。方法以实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测人正常骨髓浆细胞与MM细胞系MM.1S、RPMI 8226、U266中miR-424及FBXW7表达。体外培养U266细胞并随机分为对照组、miR-424抑制剂组(转染miR-424抑制剂)、FBXW7过表达组(转染FBXW7过表达质粒)、阴性对照组(转染miR-424阴性对照和空载质粒)、miR-424抑制剂+FBXW7敲低组(转染miR-424抑制剂和FBXW7siRNA)。以RT-qPCR实验检测miR-424及FBXW7表达;以Edu染色、TUNEL染色分别检测增殖、凋亡;以蛋白质印迹实验检测增殖相关蛋白(Cyclin D1、PCNA)、凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)与FBXW7蛋白表达。在裸鼠右腋皮下接种转染后的各组U266细胞来构建多发性骨髓瘤移植瘤裸鼠模型,检测其移植瘤生长情况并比较其21 d移植瘤体积。以双荧光素酶报告实验验证miR-424对U266细胞FBXW7的靶向调控作用。结果与人正常骨髓浆细胞相比,MM.1S、RPMI 8226、U266细胞miR-424表达升高(P<0.05),FBXW7 mRNA表达降低(P<0.05)。与对照组相比,miR-424抑制剂组、FBXW7过表达组细胞增殖率、Cyclin D1、PCNA及Bcl-2蛋白表达、21 d移植瘤体积降低(P<0.05),FBXW7mRNA表达、凋亡率、FBXW7和Bax蛋白表达升高(P<0.05);阴性对照组细胞各指标无显著差异(P>0.05)。与miR-424抑制剂组相比,miR-424抑制剂+FBXW7敲低组细胞增殖率、Cyclin D1、PCNA及Bcl-2蛋白表达、21 d移植瘤体积增大(P<0.05),FBXW7 mRNA表达、凋亡率、FBXW7和Bax蛋白表达降低(P<0.05)。miR-424可靶向下调U266细胞FBXW7表达。结论下调miR-424可通过上调FBXW7表达而抑制MM细胞增殖及在裸鼠体内生长,促使其凋亡。

miRNA-93-5p通过调控FBXW7基因参与宫颈癌进展

目的:探究miRNA-93-5p是否可通过调控FBXW7基因影响宫颈癌进展。方法:收集20例临床宫颈癌患者组织,分组为癌旁组织、宫颈癌组织,RT-qPCR检测宫颈组织中miRNA-93-5p、FBXW7 mRNA水平,并检测人正常宫颈上皮细胞H8、宫颈癌细胞Caski、HeLa、C33A细胞miRNA-93-5p、FBXW7 mRNA水平。选择宫颈癌细胞C33A,分为对照组(正常培养)、miRNA-93-5p抑制组(转染低表达miRNA-93-5p),FBXW7激活组(转染高表达FBXW7),转染48h后收集细胞,RT-qPCR检测各组细胞中miRNA-93-5p、FBXW7 mRNA水平,Western blotting检侧C33A细胞中FBXW7蛋白水平,流式细胞术检测C33A细胞凋亡率,平板克隆检测C33A细胞克隆能力,划痕实验检测C33A细胞迁移能力,Transwell实验检测C33A细胞侵袭能力。结果:与癌旁组织相比,宫颈癌组织中miRNA-93-5p mRNA水平增加、FBXW7 mRNA水平减少(P<0.001)。与H8细胞相比,Caski、HeLa、C33A细胞中miRNA-93-5p mRNA水平增加、FBXW7 mRNA水平减少(P<0.05),后续实验中选择C33A宫颈癌细胞株进行研究。与对照组相比,miRNA-93-5p抑制组C33A细胞中miRNA-93-5p mRNA水平显著降低(P<0.001),细胞凋亡率增加(P<0.001),克隆能力下降(P<0.01),细胞迁移距离减少(P<0.01),侵袭能力下降(P<0.01),FBXW7蛋白及mRNA水平显著增加(P<0.01)。与对照组相比,FBXW7激活组C33A细胞中FBXW7 mRNA水平显著增加(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.001),克隆能力下降(P<0.001),迁移距离减少(P<0.01),侵袭能力下降(P<0.01)。结论:miRNA-93-5p可通过调控FBXW7基因影响宫颈癌细胞的凋亡、增殖、迁移、侵袭水平。

Fbxw7在肝癌中的表达及与肝癌细胞增殖相关性研究

目的:探讨Fbxw7在肝癌中的表达及其与肝癌细胞增殖能力的相关性。方法:收集40例肝细胞癌组织及对应的癌旁组织,运用RT-PCR、免疫组化技术检测Fbxw7在肝癌及对应癌旁组织中的表达情况;real time RT-PCR技术检测正常肝细胞株LO2、肝癌细胞株Hep3B和SMMC-7721中Fbxw7 mRNA的表达水平;平板克隆形成实验与裸鼠皮下成瘤实验检测不同Fbxw7 mRNA表达水平的细胞株体内外增殖能力。结果:Fbxw7 mRNA及蛋白在肝癌组织中表达水平显著低于对应癌旁组织(P<0.05);Fbxw7蛋白低表达与高Edmonson分级和高TNM分期具有显著的相关性(P<0.05);正常肝细胞株LO2中Fbxw7 mRNA的表达水平显著高于肝癌细胞株Hep3B和SMMC-7721(P<0.05);Fbxw7表达较低的细胞株形成的克隆数较多,且裸鼠皮下成瘤体积较大,结果均具有统计学差异(P<0.05)。结论:Fbxw7低表达与肝癌的恶性临床病理特征相关,并与肝癌细胞增殖能力相关。

FBXW7在成人T细胞性急性淋巴细胞白血病中的突变研究

背景:F-Box和WD40蛋白7(F-Box and WD40 domain protein 7,FBXW7)是E3泛素连接酶复合物的组份,控制NOTCH1,c-MYC和Cyclin E等多种蛋白的降解。目的:研究成人T细胞性急性淋巴细胞白血病(T-ALL)中FBXW7基因突变。方法:通过对54例成人T-ALL患者FBXW7外显子5-12进行扩增、克隆和测序,分析FBXW7突变的发生率、突变位点和类型、与NOTCH1突变的相关性及其临床预后意义。结果:本组成人T-ALL中FBXW7突变率11.1%,共发现4种点突变(R465H,R465L,R479P和R505C)和1个插入/缺失突变,FBXW7突变全部位于WD40结构域。研究还发现,FBXW7突变患者中83.3%同时存在NOTCH1突变,与FBXW7突变并存的NOTCH1突变均发生于HD结构域,包括点突变(L1574P,L1596H和L1600P),和缺失/插入突变。此外,研究还显示,FBXW7单独突变组患者的总生存时间比无突变组延长(P=0.049)。结论:FBXW7突变可能在NOTCH1介导的TALL发病机制有重要作用。

Fbxw7通过降解c-Myc和Cyclin E诱导胃癌细胞凋亡和生长阻滞

目的:检测Fbxw7在胃癌组织中的表达并探讨其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:免疫组织化学染色技术检测Fbxw7在20例胃癌及对应癌旁组织中的表达;应用Fbxw7过表达质粒和Fbxw7 shRNA分别转染人胃癌细胞系MGC-803和AZ521,Western blot技术检测Fbxw7及其靶蛋白c-Myc和Cyclin E表达变化,通过MTT和流式细胞术检测Fbxw7对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。结果:Fbxw7在胃癌组织中的表达显著低于对应的癌旁组织(P<0.05);Fbxw7过表达的MGC-803细胞中c-Myc和Cyclin E蛋白表达明显减少,Fbxw7过表达诱导细胞凋亡和生长阻滞(P<0.05);敲低AZ521细胞中Fbxw7表达引起c-Myc和Cyclin E蛋白蓄积,导致细胞凋亡减少和增殖能力增强(P<0.05)。结论:Fbxw7在胃癌组织中低表达,其可能通过泛素化降解c-Myc和Cyclin E诱导胃癌细胞凋亡和生长阻滞,提示Fbxw7在胃癌中可能作为关键抑癌因子发挥功能。

脑胶质瘤中Fbxw7蛋白的表达

目的探究F框/WD-40域蛋白7(F-Box and WD40 domain protein 7,Fbxw7)与异柠檬酸脱氢酶1 ( isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)在胶质瘤组织中的表达情况。方法用免疫组织化学法,蛋白质印迹法观察86例胶质瘤患者的胶质瘤组织和30例头颅外伤去骨瓣内减压患者(对照组)脑组织中Fbxw7、IDH1的表达与分布,其中低级别胶质瘤48例(WHOⅠ-Ⅱ)、高级别胶质瘤(WHO Ⅲ-Ⅳ)38例,分析免疫组化、蛋白质印迹中Fbxw7、IDH1的表达的差异,分析Fbxw7的表达与可能的临床病理参数(年龄、性别、肿瘤直径、病理分级、头晕病史、癫痫情况、术前KPS评分、胶质瘤细胞成分、IDH1蛋白表达、肿瘤部位)之间的关系。结果胶质瘤组织中Fbxw7的表达明显高于对照组(t=-13.251, P<0.01),且Fbxw7在胶质瘤组织中随着病理级别的升高而表达降低(χ2=8.017, P<0.01);胶质瘤组织中IDH1的表达高于对照组(t=-10.838, P<0.01), IDH1在胶质瘤组织中随着病理级别的升高而升高(χ2=4.282, P=0.036);Fbxw7的表达与胶质瘤直径,病理级别、癫痫发作、IDH1表达有关(χ2=10.994、8.017、14.918、30.454,P<0.05)。结论 Fbxw7蛋白在不同级别胶质瘤组织表达的差异,可能为了解胶质瘤分子学机制提供新思路。

FBXW7与NOTCH1突变对成人急性T淋巴细胞白血病患者生存的影响

目的:探讨FBXW7、NOTCH1突变在成人T-ALL中的突变率以及突变特征,并研究其2个突变对成人T-ALL的临床特征和预后的影响。方法:通过对106成人T-ALL的FBXW7和NOTCH1基因进行基因测序,确定FBXW7和NOTCH1在106例患者中的突变率及突变特征,并对比突变组与非突变组的临床特征和预后情况。结果:在106例成人T-ALL中,FBXW7突变共有21例(19.8%),NOTCH1突变有66例(62.3%),FBXW7/NOTCH1双突变有18例(17.0%)。单独FBXW7或NOTCH1突变对预后的影响不大,但FBXW7/NOTCH1双突变组患者的2年累计总体生存率和无事件生存率皆低于无突变组,分别为(27.8%vs 70.3%)(P <0.01)、(16.7%vs 48.6%)(P <0.01),复发率高于非突变组(77.8%vs43.2%)(P=0.02)。结论:单独的FBXW7或NOTCH1突变尚不能作为预测预后的因素,但FBXW7/NOTCH1双突变可能提示预后不良。

FBXW7调控非小细胞肺癌上皮间质转化的作用机制

目的:研究FBXW7在非小细胞肺癌上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)过程中发挥的作用。方法:收集100对非小细胞肺癌组织和对应的癌旁组织,利用免疫组化检测FBXW7在癌组织和癌旁组织中的表达。利用Western blot检测FBXW7在细胞系中的表达及FBXW7对EMT部分标志蛋白的影响。利用Transwell实验检测FBXW7对NSCLC细胞迁移能力的影响。免疫共沉淀实验和泛素化的Western blot验证FBXW7与Snail1的关系。结果:FBXW7在NSCLC组织中的表达明显低于对应癌旁组织中的表达。FBXW7在正常肺上皮细胞中的表达也明显高于4种非小细胞肺癌细胞系中的表达。FBXW7过表达显著抑制A549细胞的迁移能力。FBXW7过表达也明显抑制NSCLC细胞的EMT。机制研究发现,FBXW7可以直接结合并泛素化降解Snail1蛋白,并且Snail1部分逆转FBXW7对NSCLC细胞EMT标志蛋白的影响。结论:FBXW7对NSCLC细胞EMT的调控部分依赖于泛素化降解Snail1蛋白。

FBXW7基因点突变对结直肠癌HCT-116细胞的增殖、迁移、侵袭和抗凋亡能力的影响

目的:探讨FBXW7基因点突变对结直肠癌细胞株HCT-116增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:通过构建FBXW7基因野生型及突变型过表达的重组载体,并将其转染HCT-116细胞,应用Western blotting检测转染后FBXW7蛋白表达情况。CCK-8检测细胞增殖能力,平板细胞克隆形成实验(HTCA)检测肿瘤细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕及Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果:转染野生型FBXW7基因的HCT-116细胞中FBXW7蛋白表达水平高于对照组(转染突变型FBXW7基因的HCT-116细胞)、阴性对照组(转染空质粒载体p EZ-M90的HCT-116细胞)及空白对照组(未进行任何特殊处理的HCT-116细胞)(均P<0.05)。转染野生型FBXW7的HCT-116细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力相较于其余各组均显著下降(均P<0.05),且细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论:FBXW7基因点突变可使其蛋白表达水平降低,从而促进结直肠癌HCT-116细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制其凋亡。

抑癌基因FBXW7与恶性肿瘤相关研究进展

F框/WD-40域蛋白7(F-box and WD-40 domain protein 7,FBXW7)基因,又称FBW7或h CDC4,是泛素蛋白酶体降解途径的重要识别因子之一,参与靶向降解多种癌蛋白,进而调控恶性肿瘤的发生发展过程,目前已被认为是一种抑癌基因。本综述着重探索FBXW7基因在恶性肿瘤发生发展中的作用,旨在为肿瘤治疗提供新的切入点和诊疗思路。

FBXW7与KLF5在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:研究FBXW7与KLF5在乳腺癌病变组织中的表达程度及两个因子同临床相应病理学特征之间的联系以及两者内在联系,并阐明其在人类乳腺癌形成过程中的作用机制。方法:选取经佳木斯大学附属第一医院确诊为乳腺癌并行手术治疗的患者病理蜡块,且再次由资深病理科医生证实,通过采用Elivision TM Plus/HRP免疫组化方法,分别检测45例乳腺癌组织标本中FBXW7和KLF5两个与癌症相关基因的表达状况,同时在应用软件SPSS17.0的帮助下,采用传统的统计学计算方法分析上述两因子同临床相应的病理学特点间的关系,最后探讨FBXW7和KLF5是否存在相关的临床指导意义。结果:乳腺癌中KLF5阳性表达率为82.22%,高于正常乳腺的17.78%;乳腺癌中FBXW7蛋白阳性表达为53.33%,低于正常乳腺中的100.00%;二组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:KLF5在乳腺癌中表达明显增强,FBXW7在乳腺癌中表达明显降低,提示在乳腺癌发生中KLF5和FBXW7发挥一定作用,对KLF5、FBXW7的检测可作为重要生物学指标。

结肠癌组织microRNA-223、FBXW7的表达及与其临床病理参数和预后的关系

目的研究结肠癌组织中microRNA-223(miR-223)、FBXW7的表达及其与临床病理参数和预后的关系。方法收集2015年1月—2017年4月钦州市第一人民医院146例经手术切除的结肠癌组织和癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结肠癌组织中mi R-223、FBXW7表达。通过在线网站预测miR-223与FBXW7存在结合位点。Pearson法分析两者表达的相关性及其与临床病理参数的关系。根据结肠癌组织中miR-223、FBXW7表达的均值分为miR-223高表达组与miR-223低表达组,FBXW7高表达组与FBXW7低表达组。用Kaplan-Meier法绘制不同mi R-223、FBXW7表达结肠癌患者的生存曲线。多因素Cox回归分析结肠癌患者预后的影响因素。结果结肠癌组织miR-223 m RNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05),FBXW7mRNA相对表达量低于癌旁组织(P<0.05)。病理分期Ⅲ期、有淋巴结转移结肠癌组织mi R-223mRNA相对表达量高于Ⅰ、Ⅱ期和无淋巴结转移(P<0.05);病理分期Ⅲ期、有淋巴结转移结肠癌组织FBXW7mRNA相对表达量低于Ⅰ、Ⅱ期和无淋巴结转移(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤大小、分化程度及有无侵犯浆膜结肠癌组织miR-223、FBXW7mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关系数分析显示,结肠癌组织miR-223表达与FBXW7表达呈负相关(r=-0.679,P<0.05)。术后随访8~60个月,随访期间死亡35例,总生存率为76.03%(111/146)。miR-223高表达组总生存率低于mi R-223低表达组(P<0.05)。FBXW7高表达组总生存率高于FBXW7低表达组(P<0.05)。单因素Cox回归分析结果显示,侵犯浆膜[HR=1.454(95%CI:1.086,1.947)]、病理分期Ⅲ期[HR=1.744(95%CI:1.070,2.840)]、淋巴结转移[HR=2.896(95%CI:1.114,7.531)]、miR-223≥4.76[HR=2.196(95%CI:1.085,4.445)]为结肠癌患者预后的危险因素(P<0.05),FBXW7≥1.23[HR=0.388(95%CI:0.172,0.875)]为保护因素(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,侵犯浆膜[HR=1.490(95%CI:1.154,1.924)]、病理分期Ⅲ期[HR=1.979(95%CI:1.132,3.460)]、淋巴结转移[HR=2.401(95%CI:1.015,5.677)]、miR-223≥4.76[HR=2.140(95%CI:1.063,4.309)]为结肠癌患者预后的危险因素(P<0.05),FBXW7≥1.23[HR=0.625(95%CI:0.475,0.823)]为保护因素(P<0.05)。结论结肠癌组织mi R-223高表达、FBXW7低表达与结肠癌患者病理分期、淋巴结转移及预后有关。

Fbxw7在急性T淋巴细胞白血病中的表达及其对细胞生长的抑制作用

目的:观察F框/WD40域蛋白7(Fbxw7)在急性T淋巴细胞白血病中的表达,探讨其对细胞生长的影响及其机制。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测62例急性T淋巴细胞白血病患者中的Fbxw7 mRNA表达情况,将携带Fbxw7的过表达慢病毒载体转至白血病Jurkat细胞后,采用RT-PCR和Western blot检测其转染效果,MTT法检测Jurkat细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化和细胞凋亡情况,Western blot检测c-Myc蛋白和周期蛋白E(Cyclin E)的表达。结果:急性T淋巴细胞白血病复发组患者和初发组患者中Fbxw7 mRNA表达水平较正常健康人明显降低(P<0.05);病毒转染后,Fbxw7组(转染携带Fbxw7过表达慢病毒载体)中Fbxw7 mRNA和蛋白质的相对表达水平较对照组(未转染的细胞)、阴性组(转染对照慢病毒载体)明显升高(P<0.05);转染24 h后,细胞增殖受影响不明显(P>0.05),而转染48 h和72 h后,细胞增殖明显受到抑制(P<0.05);转染48 h后,与对照组相比,Fbxw7组Jurka细胞中G0/G1期细胞所占比例和细胞凋亡率明显升高,S期和G2/M期细胞所占百分比、c-Myc和Cyclin E蛋白的相对表达量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Fbxw7在急性T淋巴细胞白血病中低表达,上调其表达可抑制白血病Jurkat细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调c-Myc和Cyclin E蛋白表达有关。

抑癌基因FBXW7与恶性肿瘤研究现状及展望

F框/WD40域蛋白(F-box and WD repeat domain containing 7,FBXW7)是F-box蛋白家族中的一员,在人体各大组织细胞均有表达,有3种蛋白亚型FBXW7α、FBXW7β、FBXW7γ。它能泛素化降解多种转录活性因子及癌蛋白,参与细胞周期调控、基因转录、细胞信号转导、损伤DNA修复、细胞凋亡等多个生物学过程,其基因的突变或缺失,可导致肿瘤的发生和发展,不良预后增加。深入了解FBXW7在恶性肿瘤中的作用途径和作用机制,为肿瘤的个体化及靶向药物治疗提供新的切入点和诊疗依据。

E3泛素连接酶FBXW7在食管鳞状细胞癌中的表达及对其生物学行为的影响

目的探讨E3泛素连接酶F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及对其生物学行为的影响。方法通过免疫组织化学的方法检测E3泛素连接酶FBXW7在171例ESCC组织及53例癌旁组织中的表达,探究FBXW7的表达对ESCC患者生存预后及临床病理特征之间的关系。构建过表达FBXW7组ESCC细胞和对照组ESCC细胞,采用CCK-8实验、平板克隆形成实验、Transwell细胞迁移和侵袭实验、细胞划痕实验检测FBXW7对ESCC细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果FBXW7在癌旁组织中表达高于ESCC组织(P=0.002),FBXW7低表达的ESCC分化程度更低(P=0.011),FBXW7高表达的ESCC患者TNM分期更早(P=0.032),且FBXW7高表达患者生存期长于FBXW7低表达患者(P=0.030);CCK-8实验结果显示过表达FBXW7组细胞吸光度低于对照组(P<0.001),平板克隆形成实验结果显示过表达FBXW7组细胞集落数低于对照组(P<0.001),细胞划痕实验结果显示过表达FBXW7组细胞迁移率低于对照组(P<0.001),Transwell细胞迁移和侵袭实验结果显示过表达FBXW7组细胞迁移和侵袭数目均低于对照组(P<0.001)。结论FBXW7在ESCC中低表达,并且FBXW7低表达提示患者不良预后,过表达FBXW7可以抑制ESCC细胞的增殖和迁移侵袭能力。

FBXW7与c-myc在结直肠癌中表达的临床意义

目的探讨FBXW7、c-myc蛋白在结直肠癌组织中的表达与临床病理特点关系及预后。方法采用免疫组织化学方法检测FBXW7、c-myc蛋白在50例结直肠癌及其癌旁正常组织的表达。结果 FBXW7、c-myc蛋白在癌组织和癌旁正常组织表达率分别是54.0%、90.0%和48.0%、20.0%(P<0.05)。FBXW7、c-myc蛋白的表达在不同侵润深度、分化程度、临床分期和淋巴结有无转移患者间差异均有统计学意义(P<0.05)。在结直肠癌组织中FBXW7、c-myc表达呈负相关(r=-0.49,P<0.05)。FBXW7蛋白阴性表达和c-myc蛋白阳性表达患者预后差。结论 FBXW、c-myc蛋白和结直肠癌的发生、发展及预后密切相关,可能成为结直肠癌早期诊断、治疗及判断患者预后的重要分子生物学标志物。