广丰千金薯离体快繁及其气孔观察、染色体倍数FCM分析和DNA变异ISSR检测

目的：对广丰千金薯的离体快繁进行研究,并对其移栽驯化苗和盆栽苗的气孔、染色体倍数和DNA变异进行观察比较、FCM分析和ISSR检测,旨在为广丰千金薯种苗规模化生产提供技术基础。方法：采用植物组织培养的方法,建立和优化广丰千金薯离体快繁技术体系,并用透明胶带粘取法观察和比较移栽驯化苗和盆栽苗的气孔参数,用FCM分析移栽驯化苗和盆栽苗的染色体倍数,用ISSR检测分子标记检测移栽驯化苗和盆栽苗的DNA变异。结果：广丰千金薯离体快繁技术体系为：选取带芽的稍木质化茎段,经70%酒精消毒1 min、无菌水冲洗3次、0.1%氯化汞消毒12 min、无菌水冲洗3次,然后接种到MS＋KT 1 mg/L＋NAA 0.2 mg/L固体培养基上置于温度为（25±2）℃、光照强度为1 500～2 000 Lx、光照时间为14 h/d的条件下培养。待到新芽长至2～3 cm,便将其切下接种于MS＋KT 2 mg/L＋NAA 0.5 mg/L液体培养基中继续置于上述培养条件下培养。培养90 d左右便可形成完整植株。移栽时将封口膜打开,依旧置于上述培养条件下培养2～3 d,然后取出完整植株洗净培养基后放入盛有浅层MS基本培养液的容器中进行室内移栽驯化,待到新芽从植株上长出,即可取出驯化苗移植于户外盛有沙土（1∶1,40%甲醛消毒）的盆中,每天早晚各浇水1次,成活率达100%。气孔观察、FCM分析和ISSR检测结果显示,移栽驯化苗和盆栽苗的气孔参数和染色体倍数无显著性差异,两者的ISSR扩增谱带也无特异性条带产生。结论：建立和优化了广丰千金薯离体快繁技术体系,再生植株没有发生遗传性变异,可以保证其遗传稳定性。

萝卜花药培养再生植株染色体倍数FCM分析及田间观察

采用流式细胞仪（FCM）对萝卜的20株花药培养再生植株进行倍性鉴定。结果显示：流式细胞仪清楚地显示了每份材料的DNA含量，其中单倍体、二倍体、四倍体、嵌合体的比例分别为20％、30％、25％、25％，并对照再生植株田间生长情况，从形态学角度验证了FCM分析的准确性。

薏苡和薏米的染色体倍数鉴定及核型分析

通过对禾本科薏苡属薏米 (CoixchinensisTod .)和薏苡 (Coixlacryma jobiLinn .)两种植物的染色体倍数及薏苡的核型进行分析 ,结果表明两种植物染色体倍数均为 2n =2 0 ,薏苡的核型公式为 2n =1 6m +4sm(2SAT) =2 0 。

2005年第16届国际生物学奥林匹克竞赛实验考试(2)

第2部分细胞生物学本部分包括3个实验：实验1：显微镜和细胞结构(15分)实验2：利用切片鉴定植物类型(15分)实验3：染色体组型分析(10分)总分40分,考试时间：90min。实验1显微镜和细胞结构(15分)要求本实验中,你要根据用不同显微镜拍摄的细胞图片：1)辨别这些细胞图像,判断是通过何种显微镜获得这些图片的。2)选择合适的显微技术完成特定的研究内容。