用PCR扩增的人抗体重链Fd基因构建抗体重链基因库

用ＰＣＲ扩增的人抗体重链Ｆｄ基因构建抗体重链基因库万泽生，姜绍谆，马文煜（第四军医大学微生物学教研室，酉安７１００３２）王海涛（军事医学科学院微生物流行病研究所，北京１０００７１）我们以往报道了以人外周血Ｂ淋巴细胞的ＣＤＮＡ为模板，扩增出抗体重链可变...

棉花bZIP转录因子FD基因的发掘和GhFD基因的组织表达分析

在叶片中合成由FLOWERING LOCUS T(FT)编码的成花素蛋白通过韧皮部运输到顶端分生组织(SAM),与b ZIP转录因子FD相互作用形成复合物,激活花分生组织身份基因的表达,从而调节植物开花和其他的一些生物学过程。本研究以棉花全基因组数据库为基础,发掘并得到18个棉花FD基因的序列并确定它们在各基因组染色体上的位置。生物信息学分析显示,棉花FD蛋白质分子量在15.69~28.24 k D之间,理论等电点在9.24~10.38之间,是一种非分泌性蛋白;亚细胞定位预测显示,棉花FD蛋白分布于细胞核上,是典型的核蛋白;氨基酸序列分析表明,棉花FD是一种亲水性蛋白,还存在着糖基化位点和磷酸化位点以及4个保守基序;进化分析表明,棉花FD1和FD2与葡萄Vv FD基因亲缘关系最近。组织表达分析表明,陆地棉10个Gh FD基因在不同组织中具有表达特征多样性,Gh FD5-D在纤维中的表达量最高,其余Gh FD基因均在SAM中的表达量最高,不同的表达特征表明它们可能具有不同的功能。这些结果为进一步解析棉花FD基因的功能和作用机理积累了有价值的资料。

半套式PCR扩增人抗HFRS病毒抗体基因及Fd段基因的克隆和序列分析

从肾综合征出血热恢复期患者外周血淋巴细胞（ＰＢＬ） 中提取细胞总ＲＮＡ， 反转录成ｃＤＮＡ 。以之为模板，用半套式聚合酶链反应（ＰＣＲ） 扩增人Ｉｇ Ｇ 抗体Ｆｄ 段及轻链基因，并将Ｆｄ 段基因克隆入噬菌体载体ｐｃｏ ｍ ｂ３ ；经酶切鉴定后，再亚克隆入ｐＧＥＭ７ｚｆ ，筛选阳性克隆测序。经计算机分析，Ｆｄ 段基因的全长为６３９ｂｐ ，编码２１３ 个氨基酸，属于人Ｉｇ Ｇ２ 亚类。