FEPAS水平测试中两种致病菌的分离与鉴定

[目的]通过积极参加国际实验室间的技术交流,提高食品微生物检测水平、验证实验室检测能力。[方法]本文对2002年5月至2003年6月广州检验检疫局食品检测中心参加的英国中心科学实验室(CSL)食品微生物学能力验证计划(FEPAS),采用传统生化鉴定与API20E细菌编码鉴定系统相结合的鉴定方法,对沙门氏菌、副溶性弧菌进行分离鉴定。[结果]采用本文方法能准确鉴定出测试样品中的沙门氏菌、副溶性弧菌,水平测试取得满意结果。[结论]通过参加水平测试,表明广州检验检疫局食品检测中心食品微生物检测能力满足FEPAS要求,达到国家水平。

微生物实验室参加FEPAS能力验证计划的质量控制及对策

目的:通过对微生物实验室参加FEPAS比对能力验证计划实施及结果分析,了解国际间微生物检测整体水平,探讨提高能力验证工作有效控制方法和措施。方法:采用传统生理生化鉴定方法和VITEK全自动微生物鉴定系统相结合的办法,充分考虑检测过程中可能影响结果的因素,对目标微生物进行准确的定量或定性。结果:所采用的方法能准确检测样品中的目标菌,8项FEPAS比对能力验证计划均获得满意成绩。结论:FEPAS比对能力验证计划结果反应了各参加实验室微生物检测能力和水平。积极参与FEPAS比对能力验证计划对提高微生物实验室整体检测水平的提升具有重要的促进作用。

高价铁肠杆菌素受体蛋白FepA表面抗原决定簇基因的克隆及序列同源性分析

用PCR技术获取高价铁肠杆菌素受体蛋白FepA表面抗原决定簇基因,分析其在大肠杆菌种内的序列同源性。以提取的大肠杆菌基因组DNA为模板,设计一对基因特异引物,用PCR扩增的方法获得目的基因。将PCR扩增后得到的片段纯化并克隆至pMD19-T Simple Vector载体,用菌落PCR及酶切鉴定阳性菌落,对阳性菌落进行测序,并与Gene Bank公布的大肠杆菌区段进行序列同源性分析。扩增出598bp的含有受体蛋白FepA表面抗原决定簇基因的目的片段,经测序分析其种内的序列同源性为95%～99%,为今后制备针对该区段的抗体奠定了基础。