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水稻中类受体蛋白激酶FERONIA-like Receptor 1的表达纯化及抗体制备
1
作者
吴秀秀
蒋顺
+2 位作者
于峰
曹建中
汪龙
《生命科学研究》
CAS
CSCD
2019年第5期393-400,416,共9页
类受体蛋白激酶参与调控植物的器官发育和抗逆性,是一种重要的蛋白激酶。通过对水稻中类受体蛋白激酶家族成员FERONIA-like receptor 1 (FLR1)进行蛋白质结构预测分析,发现FLR1蛋白具有跨膜结构,其N端在细胞膜外(FLR1-BW, 1~450 aa), C...
类受体蛋白激酶参与调控植物的器官发育和抗逆性,是一种重要的蛋白激酶。通过对水稻中类受体蛋白激酶家族成员FERONIA-like receptor 1 (FLR1)进行蛋白质结构预测分析,发现FLR1蛋白具有跨膜结构,其N端在细胞膜外(FLR1-BW, 1~450 aa), C端在细胞膜内(FLR1-BN, 474~892 aa)。为了得到FLR1抗体用于其功能分析,将FLR1的N端和C端分别构建到原核表达载体pET-32a、pGEX-4T-1、pET-22b、pTriEx-4上,比较FLR1-BW和FLR1-BN在不同载体和不同条件下的表达效果。结果显示:FLR1-BW在pET-32a及pGEX-4T-1中能够有效表达,最优条件为16℃/16 h、0.5 mmol/L IPTG;而FLR1-BN蛋白表达后会对大肠杆菌产生细胞毒性,但在293细胞中能够表达。进一步利用纯化的FLR1-BW蛋白制备FLR1多克隆抗体,结果显示该抗体特异识别FLR1蛋白。本研究为类受体蛋白激酶的抗体制备提供了良好的思路并为研究FLR1功能奠定了基础。
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关键词
水稻
flr
1
蛋白质表达纯化
抗体制备
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职称材料
题名
水稻中类受体蛋白激酶FERONIA-like Receptor 1的表达纯化及抗体制备
1
作者
吴秀秀
蒋顺
于峰
曹建中
汪龙
机构
中南林业科技大学食品科学与工程学院/稻谷及副产物深加工国家工程实验室
湖南大学生物学院
出处
《生命科学研究》
CAS
CSCD
2019年第5期393-400,416,共9页
基金
湖南省研究生创新基金资助项目(CX2016B343)
中南林业科技大学研究生创新基金资助项目(CX2016A03)
文摘
类受体蛋白激酶参与调控植物的器官发育和抗逆性,是一种重要的蛋白激酶。通过对水稻中类受体蛋白激酶家族成员FERONIA-like receptor 1 (FLR1)进行蛋白质结构预测分析,发现FLR1蛋白具有跨膜结构,其N端在细胞膜外(FLR1-BW, 1~450 aa), C端在细胞膜内(FLR1-BN, 474~892 aa)。为了得到FLR1抗体用于其功能分析,将FLR1的N端和C端分别构建到原核表达载体pET-32a、pGEX-4T-1、pET-22b、pTriEx-4上,比较FLR1-BW和FLR1-BN在不同载体和不同条件下的表达效果。结果显示:FLR1-BW在pET-32a及pGEX-4T-1中能够有效表达,最优条件为16℃/16 h、0.5 mmol/L IPTG;而FLR1-BN蛋白表达后会对大肠杆菌产生细胞毒性,但在293细胞中能够表达。进一步利用纯化的FLR1-BW蛋白制备FLR1多克隆抗体,结果显示该抗体特异识别FLR1蛋白。本研究为类受体蛋白激酶的抗体制备提供了良好的思路并为研究FLR1功能奠定了基础。
关键词
水稻
flr
1
蛋白质表达纯化
抗体制备
Keywords
rice
feronia-like
receptor
1(
flr
1)
protein expression and purification
antibody preparation
分类号
Q946.1 [生物学—植物学]
S511.22 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水稻中类受体蛋白激酶FERONIA-like Receptor 1的表达纯化及抗体制备
吴秀秀
蒋顺
于峰
曹建中
汪龙
《生命科学研究》
CAS
CSCD
2019
0
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