HE染色褪色后Feulgen染色法在鼻咽癌涂片细胞DNA分析中的应用

ＤＮＡ含量分析与恶性肿瘤的生物学行为、临床预后及治疗密切相关〔１，２〕。细胞学样本常因样本有限及缺乏组织结构，限制了细胞学样本ＤＮＡ含量分析及其实用性研究。笔者采用鼻咽癌鼻咽部刷片，脱落癌细胞涂片样本，与直接Ｆｅｕｌｇｅｎ染色比较，探讨ＨＥ染色褪色后...

精子DNA微波Feulgen染色及意义

目的，提高精子染色质量，增强染色效果。方法：参考Ｆｅｕｌｇｅｎ染色方法，采用ＹＷＹ７８１型医用微波仪。结论：精液涂片染色后精子形态清晰，核染成紫红色，尾染成淡绿色，精子正面呈卵圆形，侧面呈锥体形，核染色强度由前向后渐增，其它细胞清晰可见。结果：通过其高频率的电磁波，在其热效应、化学效应和生物效应作用下，使染色时间明显缩短，方法简便快速，且能获得良好的染色结果，与传统Ｗｒｉｇｈｔ染色法比较，染色更加清晰，结果突出，能使精子。

医用RSH微波仪在冷冻组织印片Feulgen染色中的应用

快速冷冻是目前病理术中快速诊断应用最广泛的方法之一,但由于冷冻易造成组织细胞的变形、不易做连续切片、不易切成薄片,故冷冻诊断风险性很大。传统的Feulgen染色[1]及改良Feulgen染色[2]时间长,不适合辅助冷冻快速诊断。本研究使用专业的医疗设备对新鲜组织印片进行Feulgen染色后,利用全自动DNA图像分析系统判定结果,探讨该技术在辅助快速冷冻诊断中的应用价值。

盐酸水解对Feulgen染色的作用

目的探讨盐酸水解在Feulgen染色中的作用,在提高染色质量的同时寻求一种快速、简便的染色方法。方法选取口腔颌面部低分化鳞癌、高分化鳞癌各30例,分别用3种不同盐酸水解方法进行Feulgen染色,比较3种水解方法的染色效果,并进行肿瘤细胞DNA含量分析。结果与结论热酸解时DNA酸解时间非常短暂,要控制醛基最大量很困难。室温下盐酸水解(冷酸解)细胞核染色深,结构清晰。细胞核DNA异倍体含量的测量能清楚地反映口腔鳞癌细胞的恶变程度。冷酸解情况下,醛基释放时间则大大延长,且步骤简化易行,一步水解代替了传统三步法,不必精确控制盐酸水解温度及时间,且所获得效果满意,是较为适合的水解方法。

Feulgen染色改良法

Feulgen染色是DNA的传统染色方法 ,为使其更好地适应图象分析系统及显微分光光度计的定量检测要求 ,对其染色方法进行了改良 ,采用schiff试剂冷配法、高浓度盐酸室温下一步水解法 ,缩短了染色时间 ,简化了程序 ,结果呈紫红色 。

植物DNA的Feulgen染色法研究

通过染色法显示DNA是高校生物类专业常做实验之一,Feulgen染色是显示DNA的传统染色方法。在教学实践中由于取材不同,DNA的染色效果表现出较大差异。本研究以洋葱、玉米、蚕豆、豌豆为材料,对其不同组织进行Feulgen染色,通过比较染色效果及操作方法的难易,选择出最适合用Feulgen染色法显示DNA的实验材料。结果表明:(1)从观察结果来看,洋葱内表皮和洋葱根尖的染色效果最好;(2)从实验的操作过程来看,洋葱内表皮的取材及操作方法是最简单的一种。所以洋葱内表皮最适合用于实验教学中Feulgen染色法显示DNA。

改良Feulgen染色法检测标本细胞DNA的效果评估

目的探讨改良Feulgen染色法临床检测细胞DNA中的效果。方法收集宫颈癌普查检测样本300例(份),每例标本进行液基制片各3份,随机分成3组:标准组,实验组1,实验组2。另取标准片30片,随机分成3组:标准组,实验组1,实验组2,采用经典Feulgen染色法及改良Feulgen染色法分别对宫颈癌普查检测标本和标准片进行染色,分别测量二倍体细胞核变异系数(CV)、积分光密度(IOD)及DNA指数(DI),测量结果进行统计学分析。结果实验组宫颈检测样本二倍体细胞核IOD、DI、CV值与标准组比较,差异无统计学意义(P>0.1);改良Feulgen染色法显示细胞核染色深,结构清晰,背景着色淡;经典Feulgen染色法流程需要4 h,改良Feulgen染色法只需要30 min。结论改良Feulgen染色法与经典Feulgen染色法对检测细胞DNA结果高度一致,且改良Feulgen染色法效果良好,用时短,可以用于临床标本细胞DNA检测。

HE染片脱色后Feulgen染色法在DNA含量分析中的应用

目的 探讨HE染片脱色后再经Feulgen法染色对肝癌细胞DAN含量测定的影响。方法 对肝细胞癌组织切片分别进行经典Feulgen染色法和HE染片脱色后Feulgen染色，采用图像分析技术对DNA含量进行对比分析。结果 DNA核型(二倍体、四倍体和异倍体)符合率90％(18／20)，2例(10％)直接Feulgen染色为四倍体核型而HE脱色后Feulgen染色为异倍体核型。两者DNA指数(20例各有30个DI值)符合率为80％(24／30)，呈直线正相关(P<0．001)。S期峰DNA指数的平均CV值在直接Feulgen染色组为74．71(32．79～132．5)，间接Feulgen染色组为77．24(37．21～141．2)，两者比较差异无显著性(P>0．05)。结论 HE染色片脱色处理后一般不会影响Feulgen染色效果，也不影响肝癌细胞DNA含量测量的准确性，可在临床病理检测中应用。

冷酸解法及热酸解法对Feulgen染色结果的影响

DNA倍体分析在肿瘤诊断及预后方面具有重要意义[1]。1987年VanDriel-Kulker首次提出在显微镜下细胞核光密度测量判断DNA含量的方法[2],其中Feulgen染色能够精确的显示细胞核DNA相对含量,其已逐渐成为临床检测的重要辅助手段。Feulgen染色由Feulgen和Rossenbrek等在1924年提出,作为细胞核DNA特异性经典染色方法之一,在病理学及细胞化学领域一直沿用至今[3]。近年来Feulgen染色在染液成分、水解液浓度及水解时间上做了较大调整[4]。本文通过Feulgen染色中两种常用的染色方法—冷酸解法及热酸解法的染色过程及结果进行对比分析,选出更稳定的染色方法。

Feulgen染色方法的改进

随着对DNA分子研究的深入,作为显示手段,Feulgen氏染色法已受到广大医学工作者的重视,Feulgen氏染色质量的高低,直接影响到DNA定量的准确性,我们在实际工作中发现,不同的组织。

精子DNA微波染色技术

精液检查是男性不育症诊断、治疗过程中一项很重要的检测项目,是评价男子生育力的重要依据,而精子形态观察是其中的重要方面。我们采用DNA染色原理,对精液涂片进行Feulgen染色,与传统瑞氏染色法比较,精子及其它细胞染色更加清晰。

两种染色方法在细胞核DNA含量检测中的应用及比较

目的 探讨改良、快速两种Feulgen染色方法达到最佳染色效果的水解时间段，为科研和临床的应用提供方法学指导。方法 选取5只成年健康雄性SD大鼠的肝组织，制成肝细胞涂片，分别在室温和60℃温度下水解不同时间，应用改良和快速两种方法染色，TIGER图像分析仪检测和分析单个肝细胞核的DNA含量。结果 （1）不同大鼠肝细胞涂片在同一水解温度、时间作用下，相同DNA倍体含量肝细胞的DNA含量大致相同，CV值均小于10％；（2）二、四、八倍体肝细胞核的DNA含量比值均接近2或4；（3）同一大鼠相同水解温度不同水解时间，同一倍体的肝细胞核DNA含量存在差异：60℃水解温度下，IOD（5-7min）〉IOD（9-15min）〉IOD（1min,20min），室温水解温度下，IOD（50min）〉IOD（20-30min,70-90min）〉IOD（5-1min,100min）。结论 HCL水解肝细胞涂片时间过长或过短均不能理想的染色，快速法和改良法Feulgen染色达较佳染色效果的时间段分别为：快速法5—7min，改良法20-90min。

微波辐射技术在癌细胞DNA染色中的应用

传统的Ｆｅｕｌｇｅｎ染色方法存在着染色时间长、结果不稳定等缺点，影响对癌细胞ＤＮＡ含量的准确测定及诊断。我们利用微波辐射技术与常规Ｆｅｕｌｇｅｎ染色法相结合，对各种癌细胞进行了ＤＮＡ染色实验。结果表明，微波用于ＤＮＡ染色，具有快速、简便、重复性好等优点。组织浸染Ｓｃｈｉｆ液由常规法的１ｈ左右可缩短为６ｍｉｎ，而且癌细胞核内ＤＮＡ显示十分鲜明，背景清晰，结果稳定，显著提高了ＤＮＡ染色质量，为癌细胞ＤＮＡ含量的准确分析提供了一种新的技术方法。