LncRNA FEZF1-AS1通过调控EZH2对肺间质细胞增殖、迁移及侵袭的作用

目的研究长链非编码RNA FEZ家族锌指1-反义RNA 1(lncRNA FEZF1-AS1)调控zeste同源物增强子2(EZH2)对肺间质细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮细胞-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法将人肺腺癌细胞系A549分为对照组(control)和模型组[model,用转化生长因子β1(TGF-β1)20 ng/mL作用48 h,诱导成为肺间质细胞]。用Western blot检测细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的蛋白表达。RT-qPCR检测细胞中lncRNA FEZF1-AS1和EZH2基因表达。转染组细胞分为转染si NC组、si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组和si lncRNA FEZF1-AS1+OE EZH2组。CCK-8法检测细胞增殖、细胞划痕检测细胞迁移、Transwell小室法检测细胞侵袭;用Western blot检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、vimentin及EZH2的蛋白表达,用RNA免疫沉淀(RIP)测定FEZF1-AS1与EZH2的直接结合作用。结果与对照组比较,模型组E-cadherin的蛋白表达水平减少(P<0.05);N-cadherin及vimentin的蛋白表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,模型组lncRNA FEZF1-AS1与EZH2基因的表达水平明显升高(P<0.05);与si NC组相比,si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组细胞增殖、迁移、侵袭能力降低,E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin、vimentin、EZH2蛋白表达降低(P<0.05);与si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组比较,si lncRNA FEZF1-AS1+OE EZHZ组细胞增殖、侵袭、迁移能力升高,E-cadherin蛋白表达降低,N-cadherin、vimentin、EZH2蛋白表达升高(P<0.05);RIP实验进一步证实了lncRNA FEZF1-AS1与EZH2具有结合作用。结论LncRNA FEZF1-AS1通过调控EZH2促进肺间质细胞增殖、侵袭、转移和EMT过程。

LncRNA FEZF1-AS1靶向调控miR-200c-3p对人肺成纤维细胞生物学行为的影响

目的探讨FEZ家族锌指1-反义RNA1(LncRNA FEZF1-AS1)靶向调控miR-200c-3p对人肺成纤维细胞HLF生物学行为的影响。方法采用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导HLF向肌成纤维细胞转化,分为空白对照组(Blank组)和造模组(HLF+TGF-β1组),另根据转染质粒不同将细胞分为Blank组、TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组和TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组。采用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和波形蛋白(Vimentin)蛋白的表达。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p的表达。采用CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测迁移能力,Transwell实验检测侵袭能力;采用双萤光素酶实验检测FEZF1-AS1与miR-200c-3p的靶向作用关系。结果与Blank组比较,HLF+TGF-β1组α-SMA、CollagenⅠ、Vimentin蛋白表达及LncRNA FEZF1-AS1表达水平升高,miR-200c-3p表达水平降低(P<0.05);与TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭能力下降,LncRNA FEZF1-AS1表达及α-SMA、CollagenⅠ、Vimentin蛋白表达水平降低,miR-200c-3p表达水平升高(P<0.05);FEZF1-AS1与miR-200c-3p基因序列上存在结合位点。结论LncRNA FEZF1-AS1通过抑制miR-200c-3p促进特发性肺间质纤维化的发生、发展。

LncRNA ZEB1-AS1和LncRNA SOX2OT在糖尿病肾病患者中的表达及与肾功能的相关性研究

目的探究长链非编码RNA锌指E盒结合同源盒蛋白1反义链1(LncRNA ZEB1-AS1)和长链非编码RNA性别决定相关基因簇2重叠转录本(LncRNA SOX2OT)在糖尿病肾病(DN)患者中的表达及与肾功能的相关性。方法选取于2021年11月—2023年12月在武汉大学人民医院肾内科收治的DN患者106例为DN组,并根据24 h尿蛋白定量(24 h Upro)水平分为正常蛋白尿亚组43例(<30 mg)、微量蛋白尿亚组39例(30~<300 mg)、大量蛋白尿亚组24例(≥300 mg),另选取同期医院单纯糖尿病患者106例作对照组,检测患者血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT水平;Pearson法分析LncRNA ZEB1-AS1和LncRNA SOX2OT与肾功能指标的相关性;Logistic分析影响DN患者肾功能损伤的因素。结果DN组血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT水平低于对照组(t=11.471、10.257,P均<0.001)。血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT比较,正常尿蛋白亚组>微量尿蛋白亚组>大量尿蛋白亚组(F=58.720、117.722,P均<0.001),BUN、SCr、UA水平比较,正常尿蛋白亚组<微量尿蛋白亚组<大量尿蛋白亚组,差异均有统计学意义(F=122.493、595.589、53.178,P均<0.001);LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT分别与BUN、SCr、UA呈负相关(r=-0.487、-0.498、-0.521,-0.527、-0.515、-0.534,P均<0.001);Logistic回归分析显示,糖尿病病程长及高BUN、SCr、UA水平是影响DN患者肾功能损伤的危险因素[OR(95%CI)=1.672(1.128~2.479)、2.839(1.534~5.253)、2.754(1.512~5.017)、2.693(1.464~4.954)],高LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT是保护因素[OR(95%CI)=0.875(0.798~0.959)、0.898(0.832~0.969)]。结论血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT水平与DN患者肾功能有关,可能是评估DN患者肾功能的潜在指标。

血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量对癫痫持续状态患者预后不良的预测效能

目的观察癫痫持续状态(SE)患者血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p表达变化,分析血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量对SE患者预后不良的预测效能。方法SE患者100例(SE组)、同期体检健康者68例(对照组),采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测受检者血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p,通过starBase数据库预测LncRNA-ZFAS1与miR-15a-5p的结合位点。收集SE患者性别、年龄、病程、发作类型、基础疾病、院内并发症、脑组织异常、脑脊液异常、脑电图异常、伴发热、既往癫痫发作史≥2次、癫痫持续时间、机械通气、癫痫持续状态严重程度评分(STESS)、重症监护室时间、住院时间和治疗药物种类等一般资料,并根据格拉斯哥预后量表将SE患者分为不良预后组31例和良好预后组69例,比较不良预后组、良好预后组患者的一般资料及血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量。以SE患者预后不良为因变量,以单因素分析中有统计学差异的变量为自变量,采用多因素Logistic回归分析法分析SE患者预后不良的危险因素。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量及二者联合对SE患者预后不良的预测效能。结果SE组受检者血清LncRNA-ZFAS1相对表达量高于对照组,miR-15a-5p相对表达量低于对照组(P均<0.05)。SE患者血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p相对表达量呈负相关关系(r=-0.742,P<0.001)。LncRNA-ZFAS1与miR-15a-5p的3'非翻译端存在互补序列。不良预后组惊厥性、癫痫持续时间≥1 h、机械通气比例、STESS评分、血清LncRNA-ZFAS1相对表达量高于良好预后组,血清miR-15a-5p相对表达量低于良好预后组(P均<0.05)。惊厥性SE、癫痫持续时间≥1 h、机械通气、STESS评分增加和血清LncRNA-ZFAS1相对表达量升高为SE患者不良预后的独立危险因素,血清miR-15a-5p相对表达量升高为独立保护因素(P均<0.05)。血清LncRNA-ZFAS1预测SE患者不良预后的AUC为0.786,敏感度为67.74%、特异度为75.36%;血清miR-15a-5p预测SE患者不良预后的AUC为0.781,敏感度为90.32%、特异度为53.62%;血清LncRNA-ZFAS1联合miR-15a-5p预测SE患者不良预后的AUC为0.879,敏感度为87.10%、特异度为73.91%。结论SE患者血清LncRNA-ZFAS1高表达、miR-15a-5p低表达,呈负相关关系。血清LncRNA-ZFAS1相对表达量升高为SE患者不良预后的独立危险因素,血清miR-15a-5p相对表达量升高为独立保护因素。检测血清LncRNA-ZFAS1、miR-15a-5p可用于SE患者预后不良的预测,且二者联合预测效能更高。

上调LncRNA FEZF1-AS1通过miR-363-3p/Sphk2信号轴促进宫颈癌细胞的机制

目的探讨LncRNA FEZF1-AS1对宫颈癌细胞增殖、侵袭及上皮间充质转化(EMT)的影响及作用机制。方法实时荧光定量PCR分析宫颈癌组织、癌旁正常组织、Hela、H8细胞中LncRNA FEZF1-AS1、miR-363-3p和Sphk2的表达;siRNA FEZF1-AS1转染Hela细胞,MTT、细胞侵袭实验及Western blot检测下调FEZF1-AS1对Hela细胞增殖、侵袭和EMT的影响。miRanda软件分析LncRNA FEZF1-AS1和miR-363-3p之间的靶向关系,双荧光素酶报告基因实验检测二者的相关性。下调miR-363-3p表达,分析Hela细胞增殖、侵袭和EMT。同时上调LncRNA FEZF1-AS1和miR-363-3p表达,检测LncRNA FEZF1-AS1通过miR-363-3p对Hela细胞增殖、侵袭和EMT的影响。TargetScan分析miR-363-3p和Sphk2之间的靶向关系,双荧光素酶报告基因实验检测miR-363-3p和Sphk2相关性。siRNA Sphk2转染Hela细胞,检测Hela细胞增殖、侵袭和EMT能力。结果与H8细胞相比,Hela细胞中LncRNA FEZF1-AS1、Sphk2表达上调(P<0.01),miR-363-3p表达下调(P<0.01)。下调LncRNA FEZF1-AS1表达明显抑制了Hela细胞增殖、侵袭与EMT;LncRNA FEZF1-AS1靶向miR-363-3p;下调miR-363-3p促进Hela细胞增殖、侵袭与EMT;上调LncRNA FEZF1-AS1通过miR-363-3p促进Hela细胞增殖、侵袭与EMT。miR-363-3p与Sphk2具有靶向关系。下调Sphk2表达抑制了Hela细胞增殖、侵袭与EMT。结论上调LncRNA FEZF1-AS1通过miR-363-3p/Sphk2轴促进Hela细胞增殖、侵袭及其EMT。

lncRNA FEZF1-AS1和IGF2BP1在肝癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)Fez家族锌指蛋白1反义RNA1(FEZF1-AS1)和胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)在肝癌组织中的表达及临床意义。方法:收集行手术治疗的60例原发性肝癌病人的肝癌组织和癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肝癌组织、癌旁组织中lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1 mRNA表达水平;免疫组织化学染色法检测肝癌组织、癌旁组织中IGF2BP1蛋白表达水平;分析肝癌组织lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1表达水平与临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存分析肝癌组织lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1表达与肝癌病人生存率的关系;Pearson分析肝癌组织lncRNA FEZF1-AS1与IGF2BP1 mRNA表达水平相关性。结果:肝癌组织中lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1 mRNA表达水平及IGF2BP1蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.01);肝癌组织中lncRNA FEZF1-AS1与IGF2BP1 mRNA表达水平呈正相关(r=0.602,P<0.01);不同年龄、性别、肿瘤大小、有无肝硬化、乙肝抗原阴阳性水平间lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1表达差异无统计学意义(P>0.05),临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、低中分化程度和有淋巴结转移的病人lncRNA FEZF1-AS1和IGF2BP1表达水平较高(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,lncRNA FEZF1-AS1高表达组病人3年累积生存率显著低于lncRNA FEZF1-AS1低表达组(31.45%vs 61.40%,P<0.01),IGF2BP1阳性表达组病人3年累积生存率显著低于IGF2BP1阴性表达组(31.18%vs 58.25%,P<0.01)。结论:肝癌组织中lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1高表达,且二者表达与肝癌病人病理特征和预后有关,可能作为肝癌病人潜在的预后标志物。

长链非编码RNA FEZF1-AS1在喉癌中的表达及意义

目的探究长链非编码RNA FEZ家族锌指1反义RNA1(Lnc RNA FEZF1-AS1)在喉癌中的表达及临床意义.方法选取术前未经治疗的喉癌患者78例组织标本作为研究对象,同期取喉癌旁黏膜组织78例作为对照组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测FEZF1-AS1表达水平;分析FEZF1-AS1表达水平与喉癌患者临床病理特征及喉癌患者近3年生存情况;COX回归分析喉癌患者预后的危险因素.结果与喉癌旁黏膜组织相比,喉癌组织FEZF1-AS1表达水平较高(P<0.05);FEZF1-AS1表达水平与性别、年龄、喉癌原发部位、病理学分级无关(P>0.05),与临床分期、T分级、淋巴结转移有关(P<0.05);生存分析发现,FEZF1-AS1高表达喉癌患者中位生存时间为13.60个月,显著短于FEZF1-AS1低表达患者中位生存时间(23.44个月),差异有统计学意义(P<0.05);COX回归分析结果,有淋巴结转移、FEZF1-AS1高表达是喉癌患者不良预后的独立危险因素(HR=1.589,95%CI为1.362~1.854;HR=2.375,95%CI为1.367~4.127,P<0.05).结论FEZF1-AS1在喉癌组织中高表达,是喉癌患者预后不良危险因素,可能成为喉癌患者预后不良的生物监测指标.

lncRNA锌指蛋白反义链1对四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的作用

目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)锌指蛋白反义链1(ZFAS1)在肝纤维化(LF)中的作用。方法 四氯化碳(CCl4)诱导小鼠LF模型。苏木精-伊红染色(H-E染色)和天狼猩红染色观察肝脏组织学改变,ELISA检测肝组织羟脯氨酸(HYP)含量,免疫组织化学(IHC)检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原α1(Col1α1)的表达,荧光定量PCR检测肝组织ZFAS1的表达水平,通过siRNA技术在NCTC1469细胞中沉默ZFAS1表达并模拟小鼠肝细胞的纤维化模型,免疫印迹法(Western-blot)检测细胞Col1α1、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达变化。结果 与对照组比较,CCl4诱导模型组小鼠肝组织内炎性细胞浸润明显,胶原纤维沉积明显增多,肝星状细胞(HSCs)活化增多(P<0.05),肝组织胶原分泌及其代谢产物HYP表达上调,肝组织内lncRNA ZFAS1表达明显升高(P<0.05)。与AML12细胞比较,NCTC1469细胞高表达内源性lncRNA ZFAS1(P<0.05);在NCTC1469细胞转染3种siZFAS1片段均可有效抑制ZFAS1表达(P<0.05),以siRNA-539下降最明显。采用TGF-β1处理NCTC1469细胞构建LF模型,Western-blot结果显示,与对照组比较,模型组的Col1α1、TGF-β1和MMP-2表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,ZFAS1干扰+模型组的Col1α1、TGF-β1和MMP-2表达明显下降(P<0.05)。结论 干扰lncRNA ZFAS1对LF可能具有治疗作用。

CA724、miR-183、lncRNA ZFAS1在结肠癌患者血清中的表达及意义

目的分析糖蛋白抗原724(CA724)、微小RNA-183(miR183)、长链非编码RNA(lncRNA)锌指蛋白反义链1(ZFAS1)在结肠癌患者血清中的表达与意义。方法将103例结肠癌患者纳入观察组,同期体检的95例健康体检者纳入对照组。采集2组血液检测对比CA724、miR183、lncRNA ZFAS1差异;同时收集患者的年龄、性别等资料,分析CA724、miR183、lncRNA ZFAS1表达与患者临床病理特征之间的关系。结果观察组血清CA724[(26.79±3.36)U/ml]、miR183相对表达量[(2.57±0.46)]、lncRNA ZFAS1相对表达量[(3.75±0.84)]均高于对照组[(5.20±1.05)U/ml、(1.05±0.21)、(1.23±0.39)],差异有统计学意义(P<0.05)。CA724、miR183、lncRNA ZFAS1表达与结肠癌患者的年龄、性别、体重指数(BMI)、肿瘤大小无关,与患者的临床分期、淋巴结转移、分化程度有关(P<0.05)。结论CA724、miR183、lncRNA ZFAS1在结肠癌患者血清内呈高表达,其表达与患者临床分期、淋巴结转移、分化程度联系紧密,可能参与肿瘤的病情发展,临床需予以高度重视。

长链非编码RNA ZFAS1和SNHG5在鼻咽癌组织中的表达及对预后的影响分析

目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)锌指蛋白反义链1(zinc?nger antisense 1,ZFAS1和核仁小RNA宿主基因5(small nucleolar RNA host gene 5,SNHG5)在鼻咽癌组织中的表达及对预后的影响。方法选择2013年6月至2015年6月本院收治的109例鼻咽癌患者为研究对象,所有患者均行鼻咽活检且经病理检查证实为鼻咽癌。采用实时定量PCR和荧光定量PCR检测并比较鼻咽癌组织、癌旁组织以及不同临床病理特征、不同预后患者ZFAS1和SNHG5的相对表达量。结果鼻咽癌组织中ZFAS1的相对表达量显著高于癌旁组织(P <0.05),而SNHG5的相对表达量显著低于癌旁组织(P <0.05)。不同性别、年龄患者ZFAS1和SNHG5的相对表达量比较均无显著差异(P_均> 0.05)。TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者ZFAS1的相对表达量显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P <0.05),有淋巴结转移患者ZFAS1的相对表达量显著高于无淋巴结转移患者(P <0.05);TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者SNHG5的相对表达量显著低于Ⅰ～Ⅱ期患者(P <0.05),有淋巴结转移患者SNHG5的相对表达量显著低于无淋巴结转移患者(P <0.05)。107例患者完成随访,随访率为98.17%。随访3年,死亡19例,存活90例。死亡患者ZFAS1的相对表达量显著高于存活患者(P <0.05),且SNHG5的相对表达量显著低于存活患者(P <0.05)。结论在鼻咽癌组织中,lncRNA ZFAS1表达上调,且预后越差,其表达水平越高;lncRNA SNHG5表达下调,且预后越差,其表达水平越低。lncRNA ZFAS1和SNHG5在评估鼻咽癌预后方面具有重要的研究意义。

长链非编码RNA ZFAS1在胃癌患者血清中的表达及临床意义

目的:建立基于实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测血清长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)zinc finger antisense 1(ZFAS1)的方法,应用该技术检测胃癌(gastric cancer,GC)患者、胃良性病变患者及健康体检者血清ZFAS1相对表达水平,探讨血清ZFAS1对GC辅助诊断的应用价值。方法:随机采集南通大学附属医院经病理确诊的94例GC患者(其中包括初诊患者54例,术后患者35例和复发/转移5例)、20例胃良性病变患者的血清标本,同期匹配47例年龄相仿的健康体检者血清标本进行对比分析。通过qRT-PCR检测血清ZFAS1的相对表达水平,并评价其线性、重复性及特异性;分析血清ZFAS1表达与GC患者临床病理参数的相关性;受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)评价血清ZFAS1、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)及糖类抗原19-9(carbohydrate antigen19-9,CA19-9)单独及联合检测对GC的诊断价值。结果:检测血清ZFAS1含量的qRT-PCR方法线性良好,重复性较好,特异性较高,熔解曲线单峰特异。GC初诊患者血清ZFAS1的表达水平显著高于良性病变组、正常对照组(P<0.001);GC患者术后血清ZFAS1显著低于术前(P<0.01);GC初诊患者血清ZFAS1含量与患者肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05);ROC曲线分析显示,ZFAS1、CEA、CA19-9单独作为诊断指标时,ROC曲线下面积分别为0.8164、0.6588、0.5563,三者联合诊断可提高诊断灵敏度。结论:血清ZFAS1在GC辅助诊断及术后病程监测中发挥作用。

上皮性卵巢癌组织锌指蛋白反义链1和Notch1表达对患者预后的评估价值

目的探讨上皮性卵巢癌(EOC)组织长链非编码RNA(lncRNA)锌指蛋白反义链1(ZFAS1)、Notch1的表达水平对患者预后的评估价值。方法选取本院2018年1月~2020年1月收治的96例EOC患者为EOC组,将同期卵巢良性肿瘤患者96例作为对照组。使用实时荧光定量PCR法测定所有研究者卵巢组织中ZFAS1、Notch1的表达水平;ROC曲线评估ZFAS1、Notch1诊断EOC的价值,并分析ZFAS1、Notch1表达与EOC患者临床病理特征的关系;使用Kaplan-Meier法绘制EOC患者生存曲线;使用多因素Cox回归分析EOC患者预后的影响因素。结果EOC组组织中ZFAS1、Notch1表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ZFAS1单独诊断EOC曲线下面积为0.861(95%CI:0.803~0.919),截断值为1.59,灵敏度为77.1%,特异度为69.8%;Notch1单独诊断EOC的曲线下面积为0.913(95%CI:0.870~0.955),截断值为1.54,灵敏度为79.2%,特异度为76.1%;ZFAS1表达与EOC患者的FIGO分期、浸润深度、淋巴结转移、病理分级有关(P<0.05);Notch1表达与EOC患者的FIGO分期、淋巴结转移、病理分级有关(P<0.05);ZFAS1高表达患者(ZFAS1≥1.59)的3年累积生存率低于低表达患者(ZFAS1<1.59),Notch1高表达患者(Notch1≥1.54)的3年累积生存率低于低表达患者(Notch1<1.54),差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Cox回归模型分析表明,FIGO分期、淋巴结转移、ZFAS1、Notch1是影响EOC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论EOC患者癌组织中ZFAS1、Notch1表达水平升高,且ZFAS1、Notch1高表达的EOC患者生存期短,两者有望成为预测EOC预后的有效生物学标志物。

敲减FEZF1-AS1通过阻断JAK2/STAT3通路抑制食管鳞状细胞癌细胞的侵袭和迁移

目的探讨长链非编码RNA Fez家族锌指蛋白1反义核糖核酸1(FEZF1-AS1)与食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭、迁移以及与Janus激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的关系。方法用实时定量PCR检测ESCC的癌组织和ESCC细胞系中FEZF1-AS1的表达;构建敲减FEZF1-AS1的慢病毒表达载体,敲减KYSE150、KYSE510细胞的FEZF1-AS1后,流式细胞术检测细胞周期的变化,集落形成实验检测细胞增殖能力,TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力,TranswellTM迁移和划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot法检测JAK2和磷酸化的STAT3(p-STAT3)蛋白水平。结果在ESCC的癌组织FEZF1-AS1高表达;与正常食管鳞状上皮细胞相比,KYSE150、KYSE510细胞FEZF1-AS1表达高;敲减FEZF1-AS1表达后,ESCC癌细胞的细胞周期和增殖无明显变化,但明显抑制细胞的侵袭和迁移,且JAK2蛋白水平降低,p-STAT3蛋白水平增加。结论敲减FEZF1-AS1阻断JAK2/STAT3通路抑制ESCC细胞的侵袭和迁移。

LncRNA ZFAS1靶向miR-373导致肝癌细胞顺铂耐药的机制研究

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)锌指结构反义转录本1(ZFAS1)靶向微小RNA(miR)-373导致肝癌细胞顺铂(DDP)耐药的机制。方法HepG2细胞设正常培养组、si-NC组、si-ZFAS1组,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中ZFAS1、miR-373表达水平。在si-NC组、si-ZFAS1组基础上分别添加0、50、100、200、300μmol/L DDP处理细胞12 h,CCK-8检测细胞增殖情况,Transwell检测细胞侵袭情况,蛋白免疫印迹检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9蛋白表达水平。双荧光素酶验证ZFAS1与miR-373的靶向关系。在si-ZFAS1组基础上添加inhibitor miR-373,检测细胞中MMP2、MMP9蛋白表达水平。结果si-ZFAS1组细胞中ZFAS1表达水平均低于正常培养组和si-NC组,miR-373表达水平均高于正常培养组和si-NC组(P<0.05)。si-NC组和si-ZFAS1组经不同浓度顺铂处理后细胞增殖率、侵袭数量、侵袭蛋白MMP2、MMP9表达水平基本呈降低趋势;si-ZFAS1组上述指标分别低于其对应浓度的si-NC组(P<0.05)。Starbase分析发现,miR-373与ZFAS1存在互补的结合位点并经双荧光素酶验证。si-ZFAS1+inhibitor miR-373组细胞MMP2、MMP9蛋白表达水平高于si-ZFAS1组和si-ZFAS1+inhibitor NC组(P<0.05)。结论ZFAS1可能降低肝癌细胞DDP耐药,其机制可能与调控miR-373有关。

长链非编码RNA ZFAS1在非小细胞肺癌患者组织中表达及作用

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中锌指结构反义转录本1(zinc finger antisense 1,ZFAS1)表达水平,探讨ZFAS1在NSCLC进展中的生物学作用。方法实时荧光定量RT-PCR检测ZFAS1在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的表达水平。RNA干扰ZFAS1在A549细胞中表达,细胞计数和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式分析检测细胞周期和细胞凋亡,Transwell迁移和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量RT-PCR检测Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平变化。结果 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中的平均表达水平[0.01(0.002,0.054)]较癌旁组织[0.002(0.001,0.012)]明显升高(Z=-2.638,P<0.01)。ZFAS1基因敲减后,A549细胞增殖能力明显减弱(P<0.01);A549细胞周期G1期比例升高,S期比例下降(P<0.01);A549细胞凋亡比例明显增加(P<0.01);A549细胞迁移和侵袭能力明显下降(P均<0.01);A549细胞中Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平均降低(P均<0.05)。结论 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中呈高表达。ZFAS1基因敲减诱导细胞周期阻滞、凋亡和抑制上皮-间质转变(EMT),减弱NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力。

人类癌症中长链非编码RNA FEZ家族锌指1反义RNA 1作用机制研究进展

越来越多的证据表明,长非编码RNA在肿瘤发生发展中起着关键作用。FEZ家族锌指1反义RNA 1(FEZF1-AS1)是一种与肿瘤密切相关的长非编码RNA,对多种类型的恶性肿瘤产生致病作用,并与肿瘤患者的预后不良及化疗耐药性有关。因此,FEZF1-AS1有可能成为一种新型的癌症临床诊断和预后生物标志物,为肿瘤治疗提供新的分子靶点。本研究利用中国知网和PubMed数据库,在中国知网中以“FEZF1-AS1”“癌症或肿瘤”为关键词,在PubMed中以“FEZF1-AS1”“cancer or tumor”为关键词,分别检索2012-01-01-2023-12-01相关文献。纳入标准:(1)FEZF1-AS1与癌症诊断与治疗;(2)FEZF1-AS1与癌症的发生发展;(3)FEZF1-AS1与癌症的耐药性。剔除标准:重复,及其发表时间较早的综述文章。最终纳入分析文献65篇。研究发现,FEZF1-AS1不仅可以通过海绵化miRNA、引发染色质表观遗传、与蛋白质相互作用、调节信号通路、与mRNA形成双链等5种机制,在胰腺癌、结直肠癌、肝癌、非小细胞肺癌、胃癌、胶质母细胞瘤、宫颈癌、卵巢癌、口腔鳞状细胞癌、喉鳞状细胞癌、视网膜母细胞瘤、骨髓瘤、骨肉瘤、乳腺癌、鼻咽癌、前列腺癌和膀胱癌等17种肿瘤的发生发展中起致病作用,而且与癌症的化疗耐药密切相关。提示FEZF1-AS1具有极好的潜力,有可能成为癌症早期诊断、治疗和改善人类癌症整体预后的重要分子标志物。

结肠癌患者血清lncRNA ZFAS1水平变化及临床意义

目的观察结肠癌患者血清长链非编码RNA(lncRNA)锌指蛋白反义链1(ZFAS1)水平变化,并探讨其临床意义。方法选择102例结肠癌患者(结肠癌组)和54例健康志愿者(对照组),采用实时荧光定量PCR技术检测血清lncRNAZFAS1,分析lncRNAZFAS1水平与结肠癌患者临床病理特征以及预后的关系。结果结肠癌组血清lncRNAZFAS1水平高于对照组(P<0.01)。血清lncRNAZFAS1水平与结肠癌分化程度、T分期、N分期有关(P均<0.01)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,lncRNAZFAS1高水平者3年无进展生存(PFS)率、总生存(OS)率低于lncRNAZFAS1低水平者(P均<0.05)。多因素Cox比例风险回归分析显示,N1~N2期、高水平lncRNAZFAS1是结肠癌患者不良预后的危险因素(P均<0.01)。结论结肠癌患者血清lncRNAZFAS1水平升高,lncRNAZFAS1水平与结肠癌分化程度、T分期、N分期和预后有关,可作为结肠癌预后评估的潜在标志物。

lncRNA ZFAS1通过miR-588/HMGA2轴促进肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移

目的:探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(lncRNA ZFAS1)调控miR-588/高迁移率蛋白A2(HMGA2)轴对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法:qPCR、WB法检测80例肝癌组织及对应癌旁组织(2018年1月至2019年12月在武汉第三医院首义院区手术切除标本)及人正常肝LO2细胞和肝癌HepG2、Huh7、HCCLM3细胞中ZFAS1、miR-588及HMGA2表达水平;采用Kaplan-Meier进行患者生存曲线分析。将HepG2细胞分为空白组、si-NC组、si-ZFAS1组、si-ZFAS1+inhibitor NC组、si-ZFAS1+miR-588 inhibitor组;qPCR检测各组HepG2细胞中ZFAS1、miR-588表达水平,WB法检测各组HepG2细胞中HMGA2蛋白表达;CCK-8法、Transwell和划痕实验分别检测各组HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移能力;双荧光素酶报告基因实验分别验证ZFAS1和miR-588、miR-588和HMGA2的靶向关系。用HepG2细胞移植瘤裸鼠模型检测敲减ZFAS1或/和miR-588对移植瘤生长的影响。结果:在肝癌组织和肝癌细胞中,ZFAS1、HMGA2呈高表达,miR-588呈低表达(均P<0.05);ZFAS1低表达患者2年生存率高于高表达组(P<0.05);与空白组比较,si-ZFAS1组ZFAS1、HMGA2表达水平显著降低,miR-588表达水平显著升高(均P<0.05)。与si-ZFAS1组比较,si-ZFAS1+miR-588 inhibitor组中ZFAS1表达水平无显著变化(P>0.05),HMGA2表达水平显著升高、miR-588表达水平显著降低(P<0.05);敲减ZFAS1可抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并抑制裸鼠体内移植瘤的生长(均P<0.05);ZFAS1靶向miR-588并抑制后者的表达,miR-588靶向HMGA2并抑制后者的表达;同时抑制ZFAS1和miR-588表达可逆转敲减ZFAS1对HepG2细胞增殖、侵袭与迁移能力及体内移植瘤生长的抑制作用(均P<0.05)。结论:敲减ZFAS1可通过促进miR-588表达来下调HMGA2表达,进而抑制肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭与迁移能力。

肺癌组织中lncRNA ZFAS1和hsa-miR-372-3p的表达与患者恶性特征及预后的关系

目的探究肺癌组织中长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(lncRNA ZFAS1)、hsa-miR-372-3p表达水平及与患者恶性特征及预后的关系。方法选取2015年3月至2016年10月在石家庄市人民医院诊治的82例肺癌患者。RT-qPCR检测肿瘤组织和癌旁组织ZFAS1和miR-372-3p的表达,分析ZFAS1、miR-372-3p水平与肺癌患者恶性特征的关系;Pearson分析肿瘤组织中ZFAS1和miR-372-3p的关系;用Kaplan-Meier分析ZFAS1、miR-372-3p水平与肺癌患者预后生存期的关系;COX回归分析对肺癌患者预后产生影响的因素。结果与癌旁组织相比,肿瘤组织中ZFAS1、miR-372-3p表达水平均显著升高(P<0.05)。肿瘤组织ZFAS1、miR-372-3p表达水平与TNM分期、浸润胸膜、是否发生淋巴结转移、肿瘤分化程度有关(P<0.05)。肿瘤组织中ZFAS1和miR-372-3p表达水平呈显著正相关(r=0.477,P<0.001)。ZFAS1和miR-372-3p高表达组患者5年内生存率均明显低于低表达组(P<0.05)。TNM分期、淋巴结转移、ZFAS1、miR-372-3p是肺癌患者发生不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论肿瘤组织中ZFAS1、miR-372-3p呈异常高表达,其高水平与肺癌患者恶性特征及预后不良有关,是肺癌患者预后不良的独立危险因素。

LncRNA ZFAS1作为ceRNA吸附miR-541-3p调控胃癌侵袭转移

目的:本研究旨在探讨长链非编码RNA锌指蛋白反义链1(ZFAS1)作为ceRNA吸附miR-541-3p对胃癌侵袭转移的影响。方法:qRT-PCR对癌旁组织、胃癌组织以及人胃黏膜上皮细胞株、胃癌细胞株中ZFAS1和miR-541-3p的表达进行检测。验证ZFAS1和miR-541-3p的之间的靶向关系。取ZFAS1表达最高的细胞用于后续试验并转染miR-541-3p inhibitor、ZFAS1-shRNA等。MTT检测细胞增殖,Western blot检测侵袭转移相关因子的表达,Transwell测定细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:癌组织中ZFAS1表达增多而miR-541-3p表达减少,ZFAS1能够靶向抑制miR-541的表达(均P<0.05)。抑制ZFAS1表达能够抑制胃癌细胞增殖、侵袭以及侵袭转移相关因子的表达,诱导细胞凋亡,而敲除miR-541-3p后效果则相反(均P<0.05)。ZFAS1-shRNA对胃癌细胞的作用能够被miR-541-3p inhibitor挽救。结论:ZFAS1能够作为ceRNA吸附miR-541-3p,从而抑制胃癌细胞增殖和侵袭转移,促进细胞凋亡。