乳腺浸润性微乳头状癌FEZ1/LZTS1基因的表达及启动子区域甲基化的研究

背景与目的研究FEZ1/LZTS1基因在乳腺浸润性微乳头状癌中的表达,分析其与淋巴结转移等相关病理学特征的关系,并从FEZ1/LZT1基因启动子区域甲基化角度探讨IMPC浸润转移的分子机制。 方法采用免疫组织化学LSAB法检测100例IMPC中FEZ1／LZTS1的表达，选取100例IDC-NOS作为对照，比较其差异并分析FEZ1／LZTS1的表达与淋巴结转移等相关病理学特征的关系；运用重亚硫酸盐处理基因组DNA—PCR扩增一直接测序的方法对冻存9例纯型IMPC、9例混合型IMPC、9例正常乳腺组织及4s例IDC组织DNA中FEZ1／LZTS1基因启动子区域甲基化状态进行检测；

FEZ1 Survivin在肺小细胞癌及低分化鳞状细胞癌蛋白表达及其在凋亡中的作用

目的:探讨抑癌基因FEZ1与抗凋亡因子Survivin在肺小细胞癌和低分化鳞状细胞癌中的表达及其作用,为临床在肺癌的诊断、治疗方面提供可靠的依据。方法:应用免疫组化及流式细胞定量分析技术检测肺小细胞癌和低分化鳞状细胞癌中FEZ1、Survivin蛋白的表达;并比较分析正常肺组织、小细胞癌和低分化鳞状细胞癌的凋亡率与增殖指数。结果:肺小细胞与低分化鳞状细胞癌相比,FEZ1、Survivin蛋白阳性表达存在显著性差异(P<0.05)。正常肺组织、低分化鳞状细胞癌、及小细胞癌;其凋亡率及增殖指数依次升高,三者之间差别均有统计学意义(P<0.05)。结论:本实验表明FEZ1、Survivin基因的蛋白表达水平在小细胞肺癌、低分化鳞状细胞癌间存在明显差异。因此,在肺癌的诊断、治疗方面为临床提供了可靠的依据。

FEZ1基因在甲状腺乳头状癌中的表达及其意义

目的:探讨肿瘤抑制基因FEZ1在甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid cancer,PTC)中的表达及其与PTC临床病理特征之间的关系。方法:采用原位杂交(Insitu hybridizationI,SH)技术和免疫组织化学(Immunohistoc hemistryI,HC)检测30例正常甲状腺组织、30例PTC组织和30例PTC组织中FEZ1 mRNA和蛋白的表达情况,并分析其与PTC临床病理参数的关系。结果:FEZ1 mRNA和蛋白在正常甲状腺组织中的阳性表达率均显著高于甲状腺腺瘤(P均<0.05)和PTC组织(P均<0.05);FEZ1 mRNA和蛋白在Ⅰ、Ⅱ期PTC组织中的阳性表达率均显著高于Ⅲ、Ⅳ期PTC组织中的阳性表达率(P均<0.05);无淋巴结转移组中的FEZ1 mRNA和蛋白阳性表达率亦均显著高于伴淋巴结转移组(P均<0.05)。PTC中FEZ1 mRNA和蛋白的表达呈正相关关系(P<0.05)。结论:FEZ1基因的表达缺失或下调与PTC的发生与演进存在密切关系。

口腔鳞状细胞癌中FEZ1和HIF-1α蛋白表达及预后研究

目的探讨抑癌基因FEZ1和缺氧诱导因子(HIF)-1α在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法选取OSCC组织标本146例,正常黏膜组织标本80例,同时选取新鲜OSCC组织、癌旁组织和正常黏膜组织各30例。免疫组化法检测146例组织标本和80例正常黏膜组织中FEZ1和HIF-1α表达,分析二者表达与患者临床病理特征及预后的关系。Western blot检测30例新鲜OSCC组织及其对应癌旁组织、正常黏膜组织中FEZ1和HIF-1α表达情况。结果 146例OSCC组织FEZ1蛋白阳性表达率(30.14%)低于正常口腔黏膜组织(81.25%),HIF-1α蛋白阳性表达率(71.23%)高于正常黏膜组织(12.50%,χ2分别为54.076和71.317,均P<0.01)。146例OSCC中FEZ1的表达水平与临床分期、肿瘤直径、分化程度有关,HIF-1α的表达水平与性别、淋巴结转移、肿瘤直径、分化程度有关。FEZ1α蛋白阳性表达与阴性表达患者5年生存率差异无统计学意义,而HIF-1α蛋白阳性表达者5年生存率低于阴性表达患者(P<0.05)。30例正常口腔黏膜组织、癌旁组织及OSCC组织中,FEZ1表达水平依次降低(P<0.01),HIF-1α表达水平依次升高(P<0.01)。结论 FEZ1和HIF-1α可能参与了OSCC的发生、发展,检测FEZ1和HIF-1α表达可作为OSCC生物学行为的参考指标之一。

FEZ1蛋白和mRNA在胃癌组织中的表达及其意义

目的探讨肿瘤抑制基因FEZ1蛋白和mRNA在胃癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学SP法及RT-PCR技术分别检测了36例胃癌及正常胃组织中FEZ1蛋白和mRNA的表达情况,分析其阳性表达与临床病理指标的关系。结果FEZ1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率(55.6%)明显低于正常胃组织(86.1%),并且其在胃癌组织中的阳性表达率与分化程度密切相关(P<0.05)。FEZ1mRNA在胃癌组织中的表达水平为(0.677±0.120),显著低于正常胃组织中的表达水平(0.746±0.119),并且其在胃癌组织中的表达水平也与分化程度和淋巴结转移之间存在显著相关性(P<0.05)。结论FEZ1的表达可能与胃癌的发生发展有关。

FEZ1基因在食管癌变过程中的作用

目的探讨FEZ1基因在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达及其与患者预后的关系。方法采用Western blot和免疫组化法分析FEZ1基因在ESCC中的表达情况,应用SPSS 13.0软件分析其与临床病理资料及预后的关系。结果 FEZ1蛋白阳性表达在食管癌中的表达与浸润深度、肿瘤大小相关(P<0.05);而与肿瘤组织分化程度、淋巴结转移无关(P>0.05)。正常食管组织中FEZ1的蛋白表达(4.3±0.39)明显高于食管癌组织中(1.6±0.25),且差异有显著性(P<0.05)。FEZ1的高表达提示患者的5年生存率高。结论 FEZ1基因在食管癌的发生、发展过程中起着重要的作用;FEZ1基因在食管癌中可能是候选的抑癌基因。

qRT-PCR法分析甲状腺乳头状癌FEZ1/LZTS1基因异常表达研究

目的:采用qRT-PCR法检测甲状腺乳头状癌(PTC)FEZ1/LZTS1基因的异常表达,分析异常表达与临床特点之间的关系。方法:用试剂盒提取42例甲状腺乳头状癌及癌旁正常组织标本RNA,采用实时荧光定量PCR扩增FEZ1/LZTS1基因并进行分析,判断基因异常表达。结果:42例PTC中,34例FEZ1/LZTS1基因与内参照基因相比,拷贝数量比值明显低于癌旁组织,显示为异常表达,且与民族、年龄、性别及肿瘤大小无相关性;临床Ⅰ、Ⅱ期的异常表达率高于Ⅲ、Ⅳ期,差异具有统计学意义。结论:FEZ1/LZTS1基因的异常表达可能与PTC的发生发展相关,qRT-PCR技术能够快速分析FEZ1/LZTS1基因的异常表达,对PTC的诊断可能具有辅助作用。

食管鳞癌组织中FEZ1和PCNA蛋白的表达及意义

目的检测FEZ1和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白在食管鳞癌组织中的表达,探讨其临床意义及相关性。方法采用免疫组化SP法检测100例食管鳞癌及100例正常食管组织中FEZ1和PCNA的表达情况。结果FEZ1蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率明显低于正常食管组织,其表达与浸润深度及淋巴结转移密切相关;PCNA在食管鳞癌组织中的阳性表达率明显高于正常食管组织,其表达与组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移密切相关。FEZ1和PCNA在食管鳞癌组织中的表达存在负相关。结论FEZ1的表达可能与食管鳞癌的发生有关,并且参于了其浸润、转移等过程。

FEZ1/LZTS1基因与原发性肝癌相关性研究

目的:研究FEZ1/LZTS1基因和原发性肝癌的相关性。方法:新鲜肝癌组织及正常肝脏组织各96例,分别提取癌组织(其中肝细胞癌86例,胆管上皮癌6例,混合性癌4例)和正常组织总RNA,采用RT-PCR方法检测肝癌组织和正常肝脏组织FEZ1/LZTSl基因mRNA的表达。运用免疫组织化学法(SP法)分别检测96例肝癌和正常肝脏组织标本FEZI/LZTSl基因蛋白表达。结果:FEZ1/LZTS1基因的mRNA表达在96例肝癌组织中的情况如下:27例(28.1%)缺失,28例(29.2%)表达下降,41例(42.7%)表达正常;而FEZ1/LZTS1基因mRNA在相应的96例正常肝脏组织中全部表达。肝癌组织FEZ1/LZTS1基因的mRNA表达与正常肝脏组织相比显著下调(P<0.01)。FEZ1/LZTS1基因蛋白在全部正常肝脏组织中表达,在肝癌组织中30例(31.3%)强阳性(+),20例(20.8%)中度阳性(+/-),26例(27.1%)弱阳性(-/+),20例(20.8%)阴性(-)。结论:与正常组织比,FEZ1/LZTS1基因和蛋白表达在原发性肝癌组织中明显缺失或减少,这可能导致肝癌的发生。

大鼠FEZ1基因的克隆及其在中枢神经系统的表达

轴突成束和延伸蛋白ζ-1(fasciculationandelongationproteinzeta-1,FEZ1),是线虫UNC-76蛋白在哺乳动物中的一种同系物,与轴突向外生长、成束、延伸相关。为了克隆该蛋白的基因并观察其在中枢神经系统(CNS)的表达情况,本研究通过FEZ1的特异引物从SD大鼠脑组织中经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得FEZ1基因;通过RT-PCR法分析FEZ1在生后7d的SD大鼠CNS的不同部位(大脑皮层、嗅球、脊髓)的表达情况。成功获得FEZ1的基因克隆,并观察到生后7d的SD大鼠的大脑皮层、嗅球、脊髓内均有FEZ1表达,且脊髓的表达水平较高。本研究结果为进一步研究大鼠FEZ1基因的生物学活性及在神经系统内的表达和应用奠定了基础。

FEZ1基因在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义

目的:探讨FEZ1基因在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义。方法:收集宫颈鳞癌标本102例,宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)66例,正常宫颈组织40例。通过免疫组织化学(immuno-histochemistry,IHC)方法检测各标本中FEZ1蛋白的表达情况,并分析其表达与宫颈鳞癌临床参数的关系。结果:FEZ1蛋白在正常宫颈组织中的阳性表达率显著高于CIN和宫颈鳞癌组织(P<0.05);FEZ1蛋白的表达随着癌组织分化程度的降低而显著降低(P<0.05),而与患者年龄、浸润深度、临床分期和有无淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:FEZ1的表达缺失或下调可能与宫颈鳞癌的发生与演进有关。

FEZ1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的探讨FEZ1蛋白的表达与食管鳞癌的发生及食管鳞癌病理指标的关系。方法采用免疫组化SP法检测120例食管鳞癌及20例正常食管组织中FEZ1的表达情况,进一步分析其与食管鳞癌患者各临床病理指标的关系。结果 FEZ1蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率(36.67%)显著低于正常食管组织(60.00%),并且其在食管鳞癌组织中的阳性表达率及表达水平与浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论 FEZ1蛋白在食管鳞癌中低表达,并与浸润深度及淋巴结转移密切相关。

FEZ1蛋白在原发性宫颈小细胞癌的表达及其意义

目的:探讨FEZ1蛋白在宫颈小细胞癌及其他宫颈癌或病变组织的表达。方法:选取选取2010年1月至2016年1月中山大学肿瘤防治中心诊治的25例宫颈小细胞癌作为观察组,并选择同期诊治的25例宫颈其他类型恶性肿瘤作为第一对照组,25例CINⅢ作为第二对照组,25例宫颈慢性炎作为第三对照组。采用免疫组织化学法分别检测FEZ1蛋白在观察组及各对照组的表达情况并分析其差异,进一步探讨FEZ1蛋白表达水平与宫颈小细胞癌及宫颈其他类型恶性肿瘤患者临床病理特征关系。结果:FEZ1蛋白在宫颈小细胞癌中的阳性表达率(8.0%)低于其他三个对照组[宫颈其他类型恶性肿瘤组(40.0%)、CINⅢ组(48.0%)及宫颈慢性炎组(60.0%),P<0.05]。淋巴结转移组FEZ1蛋白阳性表达例数明显少于无淋巴结转移组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:宫颈小细胞癌组织中FEZ1蛋白的表达水平极低,且与淋巴结转移相关,提示FEZ1蛋白表达缺失或下调可能与宫颈小细胞癌的发生发展有关,FEZ1蛋白可能成为宫颈小细胞癌病理诊断的免疫组织化学指标之一。

FEZ1/LZTS1基因在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的:探讨FEZ1/LZTS1基因在膀胱移行细胞癌中的表达及在肿瘤发生、发展中的作用。方法:对40例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜应用RT-PCR方法检测FEZ1/LZTS1基因mRNA的表达。结果:FEZ1/LZTS1基因mRNA在正常膀胱黏膜中阳性率100%,无表达缺失;而在膀胱移行细胞癌中阳性率42.50%,阴性率57.50%,两者间阴性率的差异有统计学意义(P<0.01);FEZ1/LZTS1基因mRNA在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱移行细胞癌中的阴性率分别28.57%、61.54%和84.62%,三者之间阴性率差异有统计学意义(P<0.05);在表浅性和浸润性膀胱移行细胞癌中阴性率分别为28.57%和89.47%,两者之间阴性率差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论:FEZ1/LZTS1基因mRNA在膀胱移行细胞癌中出现表达缺失,并且与肿瘤的病理分级和临床分期有关。FEZ1/LZTS1基因表达缺失可能作为评价肿瘤分化程度、估计预后的参考指标。

Fez1基因和肿瘤

Fez1基因是由IshiiH发现的一个新的候选抑癌基因。它定位于染色体8p22,编码67kDa的亮氨酸拉链蛋白,有与依赖cAMP激活蛋白相似区域。它在人类的许多肿瘤包括膀胱移行细胞癌,前列腺癌,食管癌,乳腺癌,胃癌等都存在异常表达。但原因尚不清楚,可能包括有:①基因缺失;②无义突变或点突变;③反常甲基化;④等位基因丢失所致的反常转录。这些改变可能在肿瘤的发生发展中起重要作用。近年来通过对其功能的研究,认为Fez1基因的功能有:抑制肿瘤增殖,调节细胞周期,与微管调节相关。虽然对Fez1基因的研究取得一些成绩,但仍需研究其功能,失活的原因,以及在肿瘤中发生发展的作用和机制。

FEZ1、p34在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义

目的检测FEZ1、p34在膀胱尿路上皮癌,癌旁组织,正常膀胱黏膜中的表达,探讨它们与病理分级分期的关系,分析其对判断膀胱尿路上皮癌生物学行为的作用。方法应用免疫组化法(SP法)检测膀胱尿路上皮癌、癌旁黏膜、正常黏膜FEZ1、p34的表达。结果FEZ1在膀胱尿路上皮癌中表达减少,FEZ1的表达与肿瘤的病理分级之间有显著相关性,与肿瘤的病理分期无相关性。p34蛋白在膀胱尿路上皮癌的表达升高,与膀胱尿路上皮癌的分级和分期呈正相关。p34、FEZ1在膀胱尿路上皮癌的表达与p34的表达呈负相关(r1=-0.348,P<0.05)。结论FEZ1、p34在膀胱尿路上皮癌的发生发展中起重要的作用,FEZ1可能通过某种机制使p34在膀胱尿路上皮癌中过表达,从而促进膀胱尿路上皮癌的发生发展。

FEZ1基因在食管鳞癌组织中的表达及其意义

目的探讨肿瘤抑制基因FEZ1在食管鳞癌组织中的表达及其意义。方法采用RT-PCR法检测50例食管鳞癌及50例正常食管组织中FEZ1 mRNA的表达情况,分析其与食管鳞癌患者各临床病理指标的关系。结果FEZ1 mRNA在食管鳞癌组织中的阳性表达率(48.0%)及表达水平(0.994±0.094)均显著低于正常食管组织(84.0%,1.071±0.181),并且其在食管鳞癌组织中的阳性表达率及表达水平与淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论在食管鳞癌组织中存在FEZ1基因的失表达,并且这种表达与食管鳞癌的淋巴结转移有关。

FEZ1基因在食管鳞癌中的表达及意义

目的探讨肿瘤抑制基因FEZ1在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。方法采用原位杂交法检测50例食管鳞癌及正常食管组织中FEZ1 mRNA的表达情况,采用Western blot法检测FEZ1蛋白在低分化食管癌细胞株EC-1和高分化细胞株EC9706中的表达,分析其与食管鳞癌患者各临床病理指标的关系。结果FEZ1 mRNA在食管鳞癌组织中的阳性表达率为42.0%,显著低于正常食管组织(86.0%)(P=0.000);随肿瘤分化程度的升高,FEZ1 mRNA的阳性表达率也逐渐增加(P=0.007),并且其在食管鳞癌组织中的阳性表达率与淋巴结转移密切相关(P=0.013)。Western blot结果显示FEZ1蛋白在食管癌低分化细胞株中的表达水平低于食管癌高分化细胞株,但差异无统计学意义(P=0.062)。结论在食管鳞癌组织中存在FEZ1基因的失表达,其缺失与食管鳞癌的分化和转移有关。

miR-1260a调控FEZ1对前列腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的探究微小RNA-1260a(miR-1260a)调控亮氨酸拉链蛋白(FEZ1)对前列腺癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测前列腺癌组织及癌旁组织中miR-1260a的表达。体外培养前列腺癌DU145细胞,实验分成4组:anti-miR-NC组、anti-miR-1260a组、anti-miR-1260a+si-NC组、anti-miR-1260a+si-FEZ1组。甲基噻唑基四唑(MTT)检测4组DU145细胞活力;流式细胞术检测4组DU145细胞凋亡率;Transwell实验检测4组DU145细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告系统确认miR-1260a直接调控的靶基因。蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞周期蛋白1(CyclinD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、P21、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、上皮钙黏附素(E-cadherin)、FEZ1蛋白表达。结果与癌旁组织比较,前列腺癌组织中miR-1260a的表达水平显著升高(P<0.01);与anti-miR-NC组比较,anti-miR-1260a组DU145细胞活力显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01),Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),P21、Bax蛋白表达量显著升高(P<0.01),迁移与侵袭细胞数显著减少(P<0.01),MMP-2蛋白表表达量显著降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达量显著升高(P<0.01);FEZ1是miR-1260a的靶基因;抑制FEZ1的表达可逆转抑制miR-1260a的表达对DU145细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。结论miR-1260a靶向抑制FEZ1的表达调控前列腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭。

FEZ1基因的研究进展

FEZ1基因定位于染色体8p22,其编码相对分子质量为67×103的亮氨酸拉链蛋白,具有生长调节作用。FEZ1基因对人类许多恶性肿瘤的发生发展起着非常重要的作用,包括前列腺癌、胃癌、头颈癌、膀胱癌、肝细胞癌、胆管癌,以及血液系统恶性疾病。该基因在这些恶性肿瘤中存在缺失或下调,但产生的具体原因尚不明确。FEZ1基因的功能除了能抑制肿瘤细胞的生长、调节细胞有丝分裂外,近年来的研究表明,其还能与驱动蛋白及微管蛋白相互作用,参与调节神经的生长,并与精神分裂症的发生相关,故FEZ1基因可能为一种细胞生长调控基因。