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Faciogenital dysplasia 6基因对肝干细胞分化的调控作用 被引量:1
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作者 薛倩 杨金凤 +2 位作者 李冰 何通川 张秉强 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期268-272,共5页
目的探讨FGD6(faciogenital dysplasia)基因对肝干细胞分化调控的作用。方法选取FGD6基因干扰靶序列,使用AdEasy系统构建腺病毒载体,包装并扩增重组腺病毒载体psEs-FGD6-siRNA,感染HP14.5细胞。细胞免疫荧光检测FGD6蛋白在HP14.... 目的探讨FGD6(faciogenital dysplasia)基因对肝干细胞分化调控的作用。方法选取FGD6基因干扰靶序列,使用AdEasy系统构建腺病毒载体,包装并扩增重组腺病毒载体psEs-FGD6-siRNA,感染HP14.5细胞。细胞免疫荧光检测FGD6蛋白在HP14.5细胞中的表达水平,实时荧光定量PCR检测FGD6、甲胎蛋白(AFP)及白蛋白(Alb)的mRNA水平,Westernblot检测FGD6、AFP及Alb的蛋白表达水平。每组细胞均设置pSES-Ad-RFP腺病毒空载体感染进行对照。所有数据用均数±标准差(x-±s)表示,采用单因素方差分析。结果FGD6蛋白主要表达于HP14.5细胞胞核中。成功构建腺病毒载体pSES-FGD6-siRNA。下调FGD6基因在HP14.5细胞中的表达,可降低AFP的mRNA及蛋白的表达,而升高Alb的mRNA及蛋白的表达(P〈0.01)。结论抑制FGD6基因在HP14.5细胞中的表达,可使HP14.5细胞向肝细胞方向分化,因此,FGD6基因对肝干细胞分化调控可能起着重要作用。 展开更多
关键词 干细胞 RNA干扰 HP14-5细胞 肝干细胞分化调控 fgd6基因
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过表达FGD6对肝干细胞分化的调控作用
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作者 余师师 沙鸥 +3 位作者 李宛玲 胡倩 何通川 张秉强 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第10期1958-1966,共9页
该文主要探讨过表达FGD6(faciogenital dysplasia 6)基因对肝干细胞分化的调控作用及其可能的机制。将FGD6基因插入腺病毒载体使其过表达,并包装成腺病毒(Ad-FGD6),感染小鼠胚胎肝干细胞HP14.5,以空载体腺病毒(Ad-null组)和未感染腺病毒... 该文主要探讨过表达FGD6(faciogenital dysplasia 6)基因对肝干细胞分化的调控作用及其可能的机制。将FGD6基因插入腺病毒载体使其过表达,并包装成腺病毒(Ad-FGD6),感染小鼠胚胎肝干细胞HP14.5,以空载体腺病毒(Ad-null组)和未感染腺病毒组(Blank control组)作为对照;半定量PCR和Western blot分别检测FGD6、肝干细胞标志物(AFP)、肝细胞标志物(ALB)、胆管上皮细胞标志物(CK19、SOX9)及Wnt经典通路中的标志物(β-catenin、wnt3a)的m RNA和蛋白表达水平;并通过糖原染色法(PAS染色)检测细胞内糖原合成的变化情况;CCK8检测各组细胞增殖情况。结果显示,感染Ad-FGD6腺病毒后,与Ad-null组及Blank control组相比,HP14.5细胞中的FGD6的m RNA和蛋白表达水平升高(P<0.05),肝干细胞标志物(AFP)及胆管上皮标志物(CK19、SOX9)的m RNA及蛋白的表达水平降低(P<0.05),而肝细胞标志物ALB及Wnt经典通路中的标志物(β-catenin、wnt3a)的m RNA和蛋白的表达水平均升高(P<0.05);PAS染色发现,Ad-FGD6组存在紫红色颗粒,呈阳性反应,这说明有糖原合成。CCK8检测发现,Ad-FGD6组能促进肝干细胞增殖(P<0.05)。因此,过表达HP14.5细胞的FGD6会使HP14.5细胞向肝细胞分化并促进细胞增殖,而这一过程可能通过Wnt经典信号通路实现。 展开更多
关键词 fgd6基因 肝干细胞 分化调控 重组腺病毒 Wnt经典信号通路
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