PM2.5通过抑制FGF21/AMPKα2通路促发非酒精性脂肪肝

目的:探讨PM2.5对非酒精性脂肪肝(NAFLD)的影响及与FGF21/AMPKα2通路的关系。方法:根据气管滴注的PM2.5浓度随机将40只6周龄雄性小鼠分为4组:对照组(生理盐水,10只)和低毒组(6.25μg/mL)、中毒组(12.5μg/mL)、高毒组(25.0μg/mL),10只/组,持续染毒19天。10周龄起给予高脂饲料喂养6周,构建NAFLD小鼠模型。分别于染毒前、染毒后、高脂喂养6周测定循环TG、TC及FGF21水平。处死小鼠,取肝细胞培养后随机分两组,分别转染Ad-FGF21与对照病毒Ad-GFP 16 h,后加入PM2.5混悬液进行染毒共培养36 h,测定两组细胞存活率,肝细胞内TC及TG、FGF21、AMPKα2含量。结果:染毒后及高脂喂养6周后,各组血清TG、TC较染毒前明显升高,血清FGF21水平降低,且随着染毒浓度的增加,血清TG、TC亦相应升高,FGF21随之降低(P<0.05)。与染毒后比较,高脂喂养6周后各组血清TG、TC均显著升高,血清FGF21显著降低(P<0.05)。与Ad-GFP组比较,Ad-FGF21组PM2.5染毒后肝细胞存活率显著升高,TG、TC水平明显降低,而肝细胞FGF21、AMPKα2表达含量则显著升高(P<0.05)。结论:幼年期PM2.5暴露可加速成年后NAFLD发生,且与暴露浓度密切相关,PM2.5可能通过抑制肝脏FGF21/AMPKα2信号通路促进肝细胞脂质沉积和NAFLD的发生发展。

TWIST2通过调控FGF21介导的AMPK/mTOR通路诱导卵巢癌细胞氧化应激和凋亡

目的探究TWIST2对卵巢癌细胞氧化应激和凋亡的作用及相关机制。方法收集2018年6月至2019年10月在山东省妇幼保健院进行治疗的30例卵巢癌患者的癌组织和癌旁组织,将pcDNA3.1-TWIST2质粒(TWIST2组)和pcDNA3.1阴性对照质粒(阴性对照组)分别转染卵巢癌细胞(SK-OV-3和HO-8910),未转染质粒组为空白对照组。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫印迹(Western blot)实验检测组织和细胞中TWIST2 mRNA和蛋白质的表达量;细胞计数试剂盒CCK-8检测TWIST2组、阴性对照组和空白对照组的细胞活力;Western blot实验检测3组的凋亡相关蛋白caspase-3、Bax和Bcl-2,AMPK/mTOR通路相关蛋白FGF21、p-AMPK和p-mTOR的蛋白表达水平;试剂盒检测3组活性氧(ROS)基因、ATP的水平和超氧化物歧化酶(SOD)的酶活性。通过检测不同处理组的细胞凋亡率和ROS水平,研究TWIST2与FGF21的相互作用。结果TWIST2在卵巢癌组织和卵巢癌细胞中的表达量显著低于癌旁组织和正常卵巢上皮细胞的表达量(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组相比,TWIST2组的细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著提高(P<0.05);ROS的水平显著升高,SOD酶活力、ATP水平、NAD~+/NADH水平显著降低(P<0.05)。TWIST2可以抑制FGF21、p-AMPK、p-mTOR蛋白的表达(P<0.05);在TWIST2组中加入FGF21或AMPK激动剂时,p-AMPK、p-mTOR蛋白表达水平显著升高,卵巢癌细胞的凋亡率和ROS水平显著降低(P<0.05),TWIST2与FGF21的表达量呈负相关(r=-0.6254,P<0.01)。结论TWIST2能够促进卵巢癌细胞氧化应激和凋亡,其作用机制是通过调控FGF21介导的AMPK/mTOR通路来实现的。

FGF21通过FGFRl-ERKI／2-Elk-1通路抑制HepG2细胞载脂蛋白（a）表达

目的探讨FGF21对HepG2细胞中载脂蛋白（a）[Apo（a）]表达的影响及其作用机制。方法以HepG2细胞为研究对象，用不同浓度FGF21（O、50、100、200及400μg／L）或相同浓度FGF21（200μg／L）处理细胞不同时间（0、6、12、24及48h），用免疫组化、Westernblot观察细胞Apo（a）蛋白水平的变化，real—timePCR观察Apo（a）mRNA变化、ELISA观察培养基中Apo（a）分泌情况，

槲皮素对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用及FGF21/MAPK信号通路的影响

目的:探讨槲皮素对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用及成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor21,FGF21)/腺苷酸活化蛋白激酶(MAP-activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组(5只)和糖尿病模型组(20只)。正常对照组给予普通饲料,糖尿病模型组给予高脂饲料喂养。4周后根据造模结果将糖尿病模型组分为模型对照组、二甲双胍组和槲皮素组。二甲双胍组灌胃给予二甲双胍(125 mg·kg^(-1)),槲皮素组灌胃给予槲皮素(100 mg·kg^(-1)),正常对照组和模型对照组灌胃给予等量生理盐水。连续给予4周。检测血清中血糖、空腹胰岛素、胰岛素C肽,计算胰岛素抵抗指数,检测胰腺组织中FGF21、MAPK mRNA的表达及FGF21、MAPK和磷酸化-MAPK(p-MAPK)蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组胰岛素C肽、FGF21mRNA相对量、MAPK mRNA相对量、FGF21蛋白表达量、MAPK蛋白表达量和p-MAPK蛋白表达量均降低,血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数增加(P<0.05)。与模型对照组比较,二甲双胍组和槲皮素组胰岛素C肽、FGF21mRNA相对量、MAPK mRNA相对量、FGF21蛋白表达量、MAPK蛋白表达量和p-MAPK蛋白表达量均增加,血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数降低(P<0.05)。二甲双胍组与槲皮素组各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:槲皮素能降低血糖,其治疗效果与二甲双胍一致,可有效减轻大鼠外周胰岛素抵抗,其作用机制可以是激活了胰腺组织中FGF21/AMPK信号通路有关。

利拉鲁肽诱导肥胖2型糖尿病大鼠白色脂肪组织中FGF21的表达及机制

目的 探讨利拉鲁肽(liraglutide,LRG)对肥胖2型糖尿病大鼠白色脂肪组织(white adipose tissue,WAT)中成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)表达的影响及机制。方法 ♂SD大鼠,随机分为对照组、2型糖尿病组(DM)及2型糖尿病+利拉鲁肽组(DM+LRG),后两组先给予高脂饮食,然后腹腔注射30 mg·kg^(-1)链脲佐菌素构建肥胖2型糖尿病模型,DM+LRG组再腹腔注射利拉鲁肽0.4 mg·kg^(-1)·d^(-1),每天2次,干预6周。检测血液生化指标以及FGF21水平,HE染色检测附睾脂肪组织的形态学变化,免疫组化、RT-PCR和免疫印迹法检测WAT中FGF21、PPARγ、FGFR3、β-Klotho、LKB1、AMPK、ACC的mRNA、蛋白表达与磷酸化及MAPK信号分子的磷酸化水平。结果 DM组大鼠体重和血脂、ALT、AST增高,FGF21降低,附睾脂肪细胞体积增大,FGF21、PPARγ、p-FGFR3、β-Klotho、p-LKB1、p-AMPK、p-ACC的表达降低,p-ERK、p-JNK、p-p38的表达均升高;DM+LRG组上述各指标均逆转。结论 利拉鲁肽具有明显的降脂作用,其机制可能与增加脂肪组织中FGF21的表达,进而激活AMPK信号通路和抑制MAPK通路有关。