六味地黄丸干预FGF23/Klotho轴对慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱模型大鼠的影响

目的:观察六味地黄丸通过成纤维细胞生长因子23(FGF23)/Klotho轴对慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱模型大鼠的影响及其干预机制。方法:50只SPF级SD大鼠随机分为假手术组(10只)、手术组(40只),手术组采用5/6肾切除及高磷饮食喂养构建慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱大鼠模型,模型复制成功后将30只造模成功大鼠随机分为模型组、骨化三醇组、六味地黄丸组,每组10只。六味地黄丸组、骨化三醇组大鼠分别予六味地黄丸和骨化三醇灌胃,假手术组及模型组大鼠予等体积的蒸馏水灌胃,持续给药8周。HE染色观察肾组织变化,检测大鼠血清钙(Ca^(2+))、磷(P^(3+))、碱性磷酸酶(ALP)、甲状旁腺激素(PTH)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),免疫组化及Western blotting法检测大鼠肾皮质Klotho、FGF23蛋白的表达。结果:HE染色显示,模型组大鼠肾小球结构紊乱、肾小管扩张,间质有大量炎症细胞浸润;与模型组比较,六味地黄丸组大鼠肾小球轻度增生,肾小管轻度扩张,间质炎症细胞浸润数目减少。模型组大鼠血清Scr、BUN、P^(3+)、PTH、ALP高于假手术组(P<0.01),体质量、血清Ca^(2+)低于假手术组(P<0.01);六味地黄丸组大鼠血清Scr、BUN、P^(3+)、PTH、ALP低于模型组,体质量、血清Ca^(2+)高于模型组(P<0.01)。模型组大鼠肾皮质Klotho蛋白相对表达量低于假手术组(P<0.05),FGF23蛋白相对表达量高于假手术组(P<0.01);六味地黄丸组大鼠肾皮质Klotho蛋白相对表达量高于模型组(P<0.01),FGF23蛋白相对表达量低于模型组(P<0.01)。六味地黄丸组大鼠血Scr、BUN及肾皮质FGF23、Klotho蛋白相对表达量与骨化三醇组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。六味地黄丸组大鼠血P^(3+)、Ca^(2+)高于骨化三醇组(P<0.05)。结论:六味地黄丸可能通过调控FGF23/Klotho轴改善慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱模型大鼠的肾功能和钙磷代谢。

益肾泄浊汤联合基础治疗肾虚湿浊证慢性肾脏病3~5期疗效及对血清FGF23和Klotho蛋白及钙磷代谢的影响

目的观察益肾泄浊汤联合基础治疗肾虚湿浊证CKD3~5期的疗效及对血清FGF23和Klotho蛋白及钙磷代谢的影响。方法采用随机数字表法将符合入选标准的80例CKD3~5期患者分为观察组和对照组,每组40例,对照组给予常规西医基础治疗,观察组在对照组的基础上予益肾泄浊汤治疗。连续治疗4周,比较两组治疗前后临床症状积分、肾功能指标[血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(eGFR)]、血清成纤维细胞生长因子23(FGF23)和Klotho蛋白水平及血钙和血磷改善状况,评估两组临床疗效及不良反应发生状况。结果观察组总有效率为82.5%(33/40),显著高于对照组总有效率60.0%(24/40)(P<0.05);治疗后,两组临床症状积分,血BUN、SCr指标,血清FGF23水平,血磷水平均明显低于治疗前(P<0.05),且观察组治疗以上指标均明显低于对照组(P<0.05);治疗后,观察组eGFR指标、血清Klotho蛋白水平及血钙水平均明显高于治疗前(P<0.05),且观察组治疗以上指标均明显高于对照组(P<0.05);两组均未出现明显不良反应。结论益肾泄浊汤联合西医基础治疗能够调节肾虚湿浊证CKD3~5期患者血清FGF23和Klotho蛋白表达,改善钙磷代谢紊乱,有助于缓解患者临床症状,保护患者残余肾功能,延缓患者疾病的进展,且安全可靠。

益气化瘀通腑法对慢性肾脏病2~3期患者肾间质纤维化、血清FGF23及Klotho蛋白影响

目的:探讨益气化瘀通腑法对慢性肾脏病2~3期患者肾间质纤维化、血清FGF23及Klotho蛋白的影响,并分析其对肾小管间质损伤的保护机制。方法:选择2019年1月至2020年3月94例慢性肾脏病早中期患者进行前瞻性研究,采用随机数字表法将纳入研究的病例分为研究组和对照组各47例,两组患者均接受基础对症治疗和常规西药治疗,研究组在此基础上采取益气化瘀通腑法进行治疗,4周为1个疗程,两组患者均连续治疗3个疗程,疗程结束后统计疗效。对比两组患者治疗前后中医证候积分、血清转化生长因子-1(TGF-1)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、成纤维细胞生长因子23(FGF23)、Klotho蛋白、胱抑素C(Cys-c)和尿N-乙酰-D-葡萄糖苷酶(NAG)含量。结果:经秩和检验显示,研究组疗效分级情况明显优于对照组(P<0.05);治疗后两组中医证候积分相较于治疗前均明显降低,且研究组低于对照组(P<0.05);治疗后两组血清TGF-1、TIMP-1含量相较于治疗前均明显降低,且研究组低于对照组(P<0.05);治疗后两组血清FGF23水平相较于治疗前均明显降低,且研究组低于对照组(P<0.05),治疗后两组血清Klotho蛋白水平相较于治疗前均明显升高,且研究组高于对照组(P<0.05);治疗后两组Cys-c、NAG含量相较于治疗前均明显降低,且研究组低于对照组(P<0.05)。结论:益气化瘀通腑法对慢性肾脏病早中期患者疗效较好,可有效改善患者肾间质纤维化、调节血清FGF23及Klotho蛋白水平,并可能通过纠正钙磷紊乱的作用机制保护肾小管间质。

和肾络宁风颗粒干预FGF23/Klotho轴对慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱模型大鼠的影响

目的观察和肾络宁风颗粒通过FGF23/Klotho轴对慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱模型大鼠的干预机制。方法采用5/6肾切除及高磷饮食喂养构建慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱大鼠模型,模型复制成功后给予和肾络宁风颗粒灌胃,持续给药8周。以PAS染色观察肾组织变化,检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血钙(Ca2+)、血磷(P3+)、血清碱性磷酸酶(ALP)、血清甲状旁腺激素(PTH)等,免疫组化、Western Blot法和RT-PCR法检测大鼠肾脏Klotho和股骨FGF23的蛋白及基因表达。结果 1. PAS染色观察模型组大鼠肾小球结构紊乱、肾小管扩张,间质有大量炎性细胞浸润;与模型组比较,和肾络宁风颗粒中、高剂量组肾小球轻度增生,肾小管轻度扩张,间质炎性细胞浸润数目减少。2.与正常组比较,模型组大鼠血Scr、BUN、P3+、PTH、ALP明显升高,体质量和血Ca2+下降(P<0.01),Klotho蛋白及mRNA表达下调(P<0.05,P<0.01),FGF23蛋白及mRNA表达上调(P<0.01)。与模型组比,和肾络宁风颗粒中、高剂量组血Scr、BUN、P3+、PTH、ALP明显降低,体质量和血Ca2+升高(P<0.01),Klotho蛋白及mRNA表达上调(P<0.01),FGF23蛋白及mRNA表达下调(P<0.01)。与骨化三醇组比较,和肾络宁风颗粒中、高剂量组血Scr、BUN和P3+降低(P<0.01,P<0.05),FGF23蛋白和基因表达下降(P<0.01,P<0.05)。结论和肾络宁风颗粒可能通过对FGF23/Klotho轴的调控改善慢性肾衰钙磷代谢紊乱模型大鼠的肾功能和钙磷代谢,在一定范围内呈剂量依赖性。

缬沙坦在老年心脏瓣膜病患者中的应用及对FGF23、Klotho蛋白的影响

目的探讨缬沙坦在老年心脏瓣膜病中的治疗效果及对FGF23、Klotho蛋白变化的影响。方法取老年心脏瓣膜病患者90例,随机分为两组,对照组45例,观察组45例。对照组采用常规方法对症治疗,观察组联合缬沙坦治疗,采用酶联免疫吸附法检两组治疗前、后FGF23、Klotho蛋白水平,比较两组临床疗效及对FGF23、Klotho蛋白的影响。应用SPSS18.0软件,所获数据采用方差分析和t检验。结果对照组治疗前后EF、LVDD变化比较,P>0.05;对照组治疗前后FS变化比较,P<0.01。观察组治疗前后EF、FS变化比较,P<0.0005;观察组治疗前后LVDD变化比较,P>0.05。两组治疗后EF变化比较,P<0.0005;两组治疗后FS变化比较,P<0.01;两组治疗后LVDD变化比较,P>0.05。对照组治疗前后FGF23、Klotho蛋白水平比较,P<0.0005。观察组治疗前后FGF23、Klotho蛋白水平比较,P<0.0005。两组治疗后FGF23、Klotho蛋白水平比较,P<0.0005。两组副作用发生率均为8.89%。两组比较,P>0.05。结论老年心脏瓣膜病患者在常规对症治疗基础上联合缬沙坦治疗效果理想,能提高血清Klotho蛋白水平,降低FGF23蛋白水平,值得推广应用。

“精血同源”现代生物学本质理论探析

“精血同源”是中医基础理论的经典概念之一,中医认为肾藏精、精血互生。研究显示中医学肾本质可能与维生素D(Vitamin D)轴有关,Vitamin D可以通过与Vitamin D-成纤维生长因子23-Klotho蛋白(Vitamin D-FGF23-Klotho)轴与血液系统产生关联并相互干预,这一机制与中医“精血同源”理论中精与血之间关系有较多关联及相似之处。提出Vitamin D-FGF23-Klotho轴与血液系统之间相互影响、相互干预的关系可能是“精血同源”的现代生物学本质之一,为后续的相关实验研究提供理论依据,同时可进一步探索益精补血药物的潜在作用靶点。

基于Klotho-FGF23轴探讨加味六味地黄汤对CKD-MBD模型大鼠骨保护作用的机制

目的:观察加味六味地黄汤对高磷联合腺嘌呤大鼠血清成纤维细胞生长因子23(FGF23),全段甲状旁腺激素(iPTH)和1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]水平及肾骨组织Klotho和FGF23蛋白表达的影响,探讨加味六味地黄汤调控Klotho-FGF23对治疗肾性骨病的作用机制。方法:健康成年SD大鼠130只,随机分为正常组(n=10),高磷组(n=30),模型组(n=30),加味六味地黄汤组(n=30)和骨化三醇组(n=30)5组,各组组内分8,10,12周3个时间点。正常组大鼠普通饮食饲养,高磷组高磷饮食饲养,其他组大鼠腺嘌呤及高磷饮食饲养建立肾性骨病大鼠模型,正常组、高磷组、模型组大鼠均予以蒸馏水(10 mL·kg^(-1)·d^(-1))灌胃;加味六味地黄汤组予加味六味地黄汤药液(2.556 g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃;骨化三醇组予骨化三醇(0.09μg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃。结果:与正常组和高磷组8,10,12周比较,模型组大鼠血尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),血磷,iPTH,FGF23,肾间质纤维化评分,肾骨组织FGF23蛋白均显著增高,血清钙水平,1,25(OH)2D3和肾、骨组织Klotho蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01);与模型组8,10,12周比较,加味六味地黄汤组和骨化三醇组大鼠BUN,SCr,血磷,iPTH,FGF23,小管间质半定量评分,肾骨组织FGF23蛋白表达均显著降低,血清钙水平,1,25(OH)2D3和肾、骨组织Klotho蛋白增高(P<0.05,P<0.01);而加味六味地黄汤组和骨化三醇组两组间BUN,SCr,血磷,iPTH,FGF23,肾间质纤维化评分,肾、骨组织FGF23蛋白表达差异无统计学意义。结论:Klotho-FGF23轴调控钙磷代谢可能参与了肾性骨病过程;加味六味地黄汤能有效改善肾功能、肾脏和骨组织病理,调节钙磷代谢紊乱,其骨保护作用机制与调控Klotho-FGF23轴有关。

骨源性激素样蛋白FGF23对骨外器官的代谢调控

成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)由骨骼中的成骨细胞和骨细胞分泌,作为激素样蛋白在复杂的内分泌网络中发挥核心作用,是调节细胞外基质矿化的局部骨源因子和参与矿物代谢的全身激素。FGF23主要靶向肾脏调节磷酸盐的重吸收,1,25-二羟基维生素D的产生和分解代谢以及抗衰老激素α-Klotho的表达,调节磷酸盐和维生素D动态平衡。该文具体阐述骨源性激素样FGF23对骨外器官包括肾脏、心脏、肌肉等的代谢调控,为遗传性低磷酸盐血症、高磷酸盐血症以及后天的磷酸盐代谢疾病(慢性肾脏疾病)的发病机理提供了新见解。为今后筛选基因辅助治疗提供关键性靶点,深入研究后有望为许多临床疾病提供新思路和治疗方案。

缬沙坦治疗对老年心脏瓣膜病患者血清FGF23、Klotho蛋白水平的影响

目的观察缬沙坦在老年心脏瓣膜病治疗中的应用效果。方法选择2015年1月—2016年7月老年心脏瓣膜病患者90例,随机分为对照组和观察组各45例。对照组采用常规方法对症治疗,观察组在对照组基础上联合缬沙坦口服治疗,每天早晨40 mg,1次/d,根据患者耐受每1~2周剂量加倍,最大剂量每天不得超过120 mg,长期维持,连续治疗6个月。治疗前、治疗后6个月采用超声测定两组心功能指标:射血分数(ejection fraction,EF)、左心室缩短分数(left ventricular fractional shortening,FS)及左心室舒张期内径(left ventricular diastolic diameter,LVDD),检测成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor23,FGF-23)、Klotho蛋白水平,记录治疗期间发生的不良反应。计量资料比较采用t检验,计数资料比较采用χ~2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果两组治疗前EF、FS及LVDD比较差异无统计学意义(均P>0.05);疗后6个月观察组EF、FS及LVDD分别为[(63.26±3.12)%、(31.25±3.91)%及(3.13±0.44)mm]低于对照组[(66.31±4.01)%、(33.51±4.26)%及(3.20±0.41)mm](均P<0.05)。两组治疗前FGF23、Klotho蛋白水平比较差异无统计学意义(均P>0.05);治疗6个月,观察组FGF23蛋白水平[(35.31±8.29)ng/L]低于对照组[(78.47±10.91)ng/L],Klotho蛋白水平[(172.31±11.49)U/L]高于对照组[(153.26±10.91)U/L](均P<0.05)。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论老年心脏瓣膜病患者缬沙坦治疗可提高血清Klotho蛋白水平,降低FGF23蛋白水平。