少突胶质细胞条件性敲除FGF9基因小鼠模型的建立、鉴定及初步表型

目的建立少突胶质细胞特异性敲除成纤维生长因子9(FGF9)小鼠模型,进一步研究FGF9在神经发育中的作用。方法将Olig1-Cre转基因小鼠与FGF9转基因小鼠(FGF9^(flox/flox))杂交,选取雌性FGF9^(flox/wt)/Olig1-Cre^(+)与雄性FGF9^(flox/flox)合笼交配,F3代获得少突胶质细胞特异性敲除FGF9基因小鼠(FGF9^(flox/flox)/Olig1-Cre^(+))。为了证实条件性基因敲除的特异性及有效性,提取鼠尾组织基因组DNA,通过PCR技术鉴定其基因型,利用蛋白电泳以及激光共聚焦验证FGF9蛋白的表达,并对其表型进行观察。结果从基因水平和蛋白水平证实了成功构建了FGF9^(flox/flox)/Olig1-Cre^(+)小鼠。初步表型分析显示,敲除组小鼠可活可育,生存期与对照组相同,但发育缓慢体重显著减轻。结论成功获得少突胶质细胞中特异性敲除FGF9基因小鼠,FGF9基因条件性敲除后引起小鼠发育缓慢。

TFGF9转基因小鼠的功能及组织表达谱的研究

目的:研究突变FGF9转基因小鼠的功能变化,分析Fgf9及其受体Fgfr3的组织表达谱。方法:采用RT-PCR法克隆FGF9,在该基因296位引入点突变为(G→A)后插入pcDNA3.1(-)B载体,通过显微注射建立转基因小鼠;利用PCR法鉴定转基因小鼠基因型,RT-PCR及免疫组化鉴定转基因小鼠内源性Fgf9和Fgfr3的组织表达谱。结果:建立了12个系的转基因小鼠模型,虽未检测到转入基因的表达,但检测到内源性Fgf9和Fgfr3在心、脑、肾、肌肉和骨关节等组织中的表达情况。结论:获得Fgf9和Fgfr3组织表达谱及在不同时期小鼠骨关节中的表达情况;推测转入基因未表达与FGF9转入后被沉默或抑制有关,为此正在建立特异点突变FGF9基因敲入小鼠模型。

人类遗传病致病基因克隆及其生物学功能研究进展

近20年来,遗传病致病基因克隆及其生物学功能研究取得了快速发展。然而,仍有许多突变基因的致病机制仍未明确。该文简要介绍了遗传病的基本特征,综述了遗传病致病基因克隆和机制研究的进展,并介绍了遗传病基因功能研究的2项进展,其中之一是成纤维细胞生长因子9(FGF9)的错义突变(S99N)导致多发性骨性连接综合征;另一个例子是Palladin敲除小鼠出现神经管闭合不全,伴有内脏外露、胎肝萎缩及胚胎造血功能障碍,最后导致胚胎死亡。

非综合征性先天性关节融合的遗传学研究进展

先天性关节融合(CJS)是胚胎发育过程中关节形态发生失败所导致的异常,在临床上又分为综合征性(sCJS)和非综合征性(nsCJS)。常见的sCJS包括染色体病(如克氏综合征等)和单基因病(如Apert/Pfeiffer/Crouzon综合征、Holt-Oram综合征、Ehlers-Danlos综合征和尺桡骨融合伴血小板减少症等),可累及多个系统及器官,而nsCJS仅累及单一或多个关节。迄今为止,已发现7个基因(NOG、GDF5、FGF9、GDF6、FGF16、SMAD6和MECOM)的变异可能导致nsCJS。本文聚焦于这些基因,并对nsCJS的临床表型、遗传模式、常见变异及其作用机制进行文献回顾,同时通过对关节形态发生的相关信号通路进行分析,探讨可能导致nsCJS的其他候选基因。