可诱导表达hFGFR1α稳定细胞系的建立与表达优化

目的:构建hFGFR1α(human fibroblast growth factor receptor 1 alpha, hFGFRα)稳定细胞系,优化获得最适诱导表达条件,实现可诱导的、高效的稳定表达。方法:将hFGFR1α基因编码区全长克隆入pcDNA5/FRT/TO/2 × Flag表达载体,连同pOG44重组酶质粒共转染人宿主细胞Flp-InTM-T-RexTM-293细胞系(HEK293H),潮霉素B筛选获得阳性克隆细胞系HEK293H/hFGFR1ɑ。用不同浓度强力霉素(doxycline, Dox)或者不同作用时间对HEK293H/hFGFR1ɑ细胞系进行诱导表达,Western Blot鉴定hFGFR1ɑ蛋白的表达情况。结果:构建了pcDNA5-FRT/TO/2 × Flag/hFGFR1ɑ重组表达载体,获得了可被Dox诱导表达的HEK293H/hFGFR1ɑ稳定细胞系;0.001μg/mL Dox即可诱导hFGFR1ɑ蛋白表达,0.01μg/mL Dox即可诱导表达量达峰值;Dox对该细胞系作用2 h即诱导hFGFR1ɑ蛋白表达,对其作用24 h后该细胞系的表达明显增强。结论:成功构建了可诱导的、高效的稳定表达细胞系HEK293H/hFGFR1ɑ;Dox诱导该细胞系表达具有剂量差异性和时间依赖性。

静态磁场通过激活FGFR1/JAK2/STAT3信号通路促进皮肤成纤维细胞的增殖活性和迁移表型

目的:通过体外实验探讨静态磁场(SMF)对皮肤成纤维细胞增殖活性和迁移表型的调控作用与潜在机制。方法:将人皮肤成纤维细胞(HSFs)分为5组,包括对照组、SMF组、SMF+阿魏酸组、SMF+芦可替尼组、SMF+Stattic组。对照组为正常培养的HSFs;SMF组的HSFs细胞暴露于1mT的SMF中。其余三组分别将FGFR1、JAK2、STAT3的抑制剂(3μmoL/L阿魏酸、3nmoL/L芦可替尼、20μmoL/L的Stattic)与HSFs一起预培养,并暴露于1mT的SMF中,所有组均处理24h。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析细胞的增殖活性。用ELISA试剂盒法检测人类B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(BAX)的水平。用Western blot检测凋亡标志蛋白cleaved-caspase3及FGFR1、JAK2、STAT3、磷酸化的(p)-FGFR1、p-JAK2、p-STAT3的表达以及细胞迁移相关表型高迁移率组蛋白1(HMGB1)、波形蛋白(vimentin)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、MMP-2的表达。结果:与对照组比,SMF组的细胞增殖活性增加,BAX的水平减少,cleaved-caspase3的蛋白表达水平下调,p-FGFR1、p-JAK2、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达水平均显著上调(均P<0.05)。与SMF组比,SMF+阿魏酸组的细胞增殖活性降低,BAX的水平增加,cleaved-caspase3的蛋白表达水平上调,而p-FGFR1、p-JAK2、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达均显著下调(均P<0.05)。与SMF组比,SMF+芦可替尼组的细胞增殖活性降低,BAX的水平增加,cleaved-caspase3的蛋白表达水平上调,JAK2、p-JAK2、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达水平均显著下调(均P<0.05)。与SMF组比,SMF+Stattic组的细胞增殖活性降低,BAX的水平增加,cleaved-caspase3的蛋白表达水平上调,STAT3、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达水平均显著下调(均P<0.05)。结论:SMF通过激活FGFR1/JAK2/STAT3信号通路促进皮肤成纤维细胞的增殖活性和迁移表型。

FGFR1在骨骼发育、稳态维持和损伤修复中的作用研究进展

骨骼是全身最大的器官之一,其发育及稳态维持异常可引起多种骨骼疾病,如骨骼遗传病、骨退行性疾病(如骨质疏松症、骨性关节炎)和骨折等。成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)家族重要成员FGFR1在骨骼发育和稳态维持中发挥关键作用。FGFR1功能增强点突变可引起囟门早闭综合征等骨骼遗传病,同时也参与调节骨形成、骨吸收过程以及关节炎的发生。此外,FGFR1在骨损伤修复不同阶段的骨骼相关细胞中均有表达,提示其参与骨修复过程。笔者总结了FGFR1在骨骼发育、稳态维持及损伤修复中的作用和机制研究进展,为从干预FGFR1信号角度治疗骨骼相关疾病提供借鉴。

FGFR1抑制剂在实体瘤治疗中的安全性与有效性的临床试验研究Meta分析

目的:系统性评价临床试验研究报道中FGFR1抑制剂在实体瘤治疗中的安全性和有效性。方法:检索PubMed、Embase、CochraneLibrary、Clinicaltrials、维普、中国知网、万方数据库,筛选FGFR1抑制剂在实体瘤患者治疗中的临床试验报道,用CMA3.7软件进行Meta分析。结果:最终纳入12篇关于FGFR1抑制剂的临床试验研究报道,包括BGJ398、lucitanib、pazopanib、ARQ087、AZD4547、ASP5878、Infigratinib、rogaratinib和dovitinib共9种FGFR1抑制剂,共计700例实体瘤患者,均为单臂研究。Meta分析结果显示FGFR1抑制剂应用后引起的所有级别的总的不良反应率为96.7%。常见的有:①血液系统改变:血小板减少(6.0%)、贫血(8.7%)、白细胞减少(3.6%);②非血液系统改变:腹泻(39.3%)、转氨酶升高(31.7%)、恶心(31.4%)。严重的不良反应(AE)(≥3级)发生率为47.3%。常见的有:①血液系统改变:血小板减少(1.6%)、贫血(1.0%)、白细胞减少(0.9%);②非血液系统改变:高血压(14.0%)、转氨酶异常(9.1%)、乏力(4.6%)。单药治疗后疾病完全缓解率(CR)为5.9%、部分缓解率(PR)为8.9%;疾病稳定(SD)39.7%;疾病进展(PD)的发生率45.5%,总体疾病控制率达到为54.5%。结论:FGFR1抑制剂使用后产生的副作用可耐受和调控。临床试验研究证实FGFR1抑制剂对部分实体瘤的治疗有一定疗效,期待进一步增加临床试验研究,通过改变给药剂量或/和考虑联合用药以提高其疗效。

FGFR1在泛癌组织中的表达及与其预后和免疫浸润的关系

目的分析成纤维母细胞生长因子受体1(FGFR1)在泛癌组织中的表达水平,并探究其与泛癌患者的预后和免疫浸润的关系。方法通过加利福尼亚大学圣克鲁兹分校(UCSC)Xena平台从TCGA数据库下载数据,分别在TCGA GTEx样本、TCGA样本和TCGA配对样本中分析FGFR1的表达水平,采用Kaplan-Meier方法分析FGFR1表达水平与患者预后的相关性及临床相关分析,受试者操作特征曲线(ROC)评估FGFR1基因对泛癌的诊断价值。应用TIMER2.0及TISIDB数据库分析FGFR1表达与多种免疫细胞及免疫亚型之间的相关性。结果FGFR1基因在多种肿瘤中差异表达,表达的高低与不同肿瘤患者的预后密切相关;在BLCA和KIRP中,FGFR1表达与病理分期相关。FGFR1在多种肿瘤中差异表达,与肿瘤的免疫微环境和分子亚型相关。结论通过对FGFR1的泛癌分析表明,FGFR1表达与患者预后、病理分期、免疫浸润及免疫亚型存在相关性,FGFR1基因有望成为肿瘤有效的预后生物标志物,为临床诊疗提供帮助。

成熟成骨细胞中敲除基因fgfr1小鼠的制备

目的制备在成熟成骨细胞中敲除基因fgfr1的特定细胞阶段性基因敲除小鼠。方法从美国NIH引进SPF级fgfr1条件性基因敲除(fgfr1flox/flox)小鼠,进行饲养、繁殖和PCR鉴定;fgfr1flox/flox小鼠与在成熟成骨细胞表达Cre重组酶的OC-Cre小鼠交配,获得在成熟成骨细胞中敲除一个基因拷贝的杂合子小鼠;杂合子小鼠之间交配,或者杂合子小鼠与fgfr1flox/flox小鼠交配,可以获得在成熟成骨细胞中敲除fgfr1基因的小鼠fgfr1△/△/OC-CreTG/+。结果成功制备在成熟成骨细胞中敲除fgfr1的细胞特异性敲除小鼠。结论成功引进fgfr1flox/flox小鼠,应用合理的基因条件性敲除繁殖策略,获得在成熟成骨细胞中敲除fgfr1的基因敲除小鼠。

大鼠液压冲击脑损伤后bFGF及其受体FGFR1的表达

目的观察脑损伤后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体FGFR1的表达及其时序性变化,探讨脑损伤的分子机制及法医学脑损伤时间推断。方法用免疫组织化学技术观察大鼠侧位中度液压冲击脑损伤后bFGF及FGFR1蛋白在伤后不同时间(30min,1,3,6,12h,1,3,7d)的表达情况,以正常大鼠及手术大鼠作为对照。结果正常对照组和手术对照组大鼠脑组织内有低水平的bFGF和FGFR1表达。脑冲击伤后6h,大脑皮层和脑干bFGF和FGFR1蛋白表达开始显著增加,1～3d达高峰,7d时已有所下降;海马冲击后3h即开始增加,1d达峰值,此后逐渐下降,7d时恢复正常。结论脑损伤可诱导bFGF/FGFR1的表达,提示机体对脑损伤存在自身保护机制,其表达的时序性改变可望用于法医学脑损伤时间推断。

靶向bFGF与FGFR1Ⅲc结合位点的单克隆抗体制备及其生物学活性研究

目的针对碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)与成纤维生长因子受体1c(FGFR1Ⅲc)的结合位点,制备鼠抗人b FGF单克隆抗体并研究其生物学活性。方法用重组表达的人b FGF免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾脏常规融合制备杂交瘤细胞,通过间接和竞争ELISA筛选出与FGFR1Ⅲc有共同结合位点的抗b FGF单抗。制备小鼠腹水并利用Protein G亲和柱纯化腹水单抗,SDSPAGE鉴定纯化产物;间接ELISA测定单抗亚类、亲和常数,竞争ELISA测定抗体IC50;Western blot和免疫荧光对单抗的生物学活性初步鉴定;CCK-8法检测单抗对肺癌细胞株LL/2的增殖抑制活性。结果筛选出了2株稳定表达b FGF抗体的细胞株Mab E12和Mab D9,竞争ELISA测得其IC50分别为1.564和1.96μg/ml,免疫球蛋白分类两者均为Ig G1,间接ELISA测得Mab E12的亲和常数为5.66×108L/mol;Western blot和免疫荧光表明该抗体能与LL/2细胞内天然合成的b FGF相结合,并对其增殖产生了较明显的抑制作用。结论成功建立了1株能特异性识别b FGF-FGFR1Ⅲc合位点的单抗,能有效的中和b FGF对肺癌细胞株LL/2促增殖作用,为研究肿瘤治疗途径奠定了基础。

bFGF mRNA、bFGF及FGFR1与神经胶质瘤细胞恶性行为的相关性

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)、成纤维细胞生长因子受体1(fibro-blastgrowthfactorreceptor1,FGFR1)及bFGFmRNA三者与肿瘤细胞(神经胶质瘤细胞)恶性行为的相关性。方法:设计、合成bFGF反义寡核苷酸,转染SWO-38神经胶质瘤细胞,用原位杂交、免疫组化及图像分析、间接ELISA、细胞增殖MTT法、细胞集落形成等方法,分别检测转染前后bFGF、FGFR1、bFGFmRNA表达的改变,观察不同剂量bFGF反义寡核苷酸转染后细胞生长、集落形成的变化。结果:大部分细胞bFGFmRNA和细胞生长可被bFGF反义寡核苷酸抑制,细胞生长的抑制呈浓度依赖性,最高抑制率可达到48%,其抑制作用可被外源性bFGF完全逆转;反义寡核苷酸处理组大部分细胞表达的FGFR1减少、细胞分泌的bFGF明显减少,集落形成抑制率达35%;外源性bFGF的逆转作用为8%。正义组和阴性对照组均无以上的明显改变。结论:揭示了反义寡核苷酸可特异性抑制bFGFmRNA和肿瘤细胞的bFGF合成表达,但不能拮抗外源性bFGF结合bFG-FR的生物学作用;FGFR1随肿瘤细胞SWO-38中bFGF表达水平的降低而下调。

FGF21及其受体FGFR1和FGFR2在小鼠毛囊第1生长周期的表达

旨在通过对FGF21、受体FGFR1和FGFR2在小鼠毛囊第1生长周期中的定位和表达情况的研究,以探索FGF21、受体FGFR1和FGFR2在毛囊发育过程中的作用。选取1、3、5、8、12、17、21和23日龄小鼠背部皮肤,采用免疫组织化学技术,实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测FGF21、FGFR1和FGFR2 mRNA及蛋白表达。结果显示:在小鼠毛囊第1生长周期中,FGF21主要表达于毛囊毛乳头、毛基质、内外根鞘以及毛囊周围的结缔组织中;FGFR1在毛囊各部均有表达,且在退化期(12～17日龄)和静止期(18～21日龄)主要表达于内外根鞘中;FGFR2广泛表达于毛囊各部。1、3、5、8、12、17日龄FGF 21 mRNA表达量极显著低于23日龄(P<0.01),21日龄的表达量低于23日龄,差异不显著(P>0.05);1～5日龄和23日龄FGF21蛋白表达量较高。1、3、5、8、12、21、23日龄FGFR1 mRNA表达量极显著低于17日龄(P<0.01);FGFR1蛋白表达量从12日龄开始上升,在17日龄时达到最高,之后又呈下降趋势。1、5、8、12、21和23日龄FGFR2 mRNA表达量极显著低于17日龄(P<0.01),在3日龄的表达量低于17日龄,差异不显著(P>0.05);FGFR2蛋白在1～17日龄都有较高表达。综上表明,在第1个毛囊生长周期中,FGF21对参与毛囊形成的成纤维细胞的增殖和分化具有重要作用,诱导毛囊由生长期进入退化期。FGFR1对内外根鞘细胞的增殖、分化有着明显作用,诱导毛囊由退化期进入静止期。FGFR2对毛囊内细胞增殖、分化具有重要作用,诱导毛囊由生长期和退化期进入静止期。

辛伐他汀对大鼠血管平滑肌细胞增殖及FGFR1与p21ras表达的干预作用

目的:观察辛伐他汀对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中FGFR1、p21ras蛋白表达的影响。方法:体外培养大鼠VSMC,建立VSMC增殖模型,应用不同浓度的辛伐他汀干预,MTT法测定细胞增殖活力;免疫印迹法检测FGFR1与p21ras蛋白的表达。结果:与对照组比较,辛伐他汀各浓度组细胞增殖活力均显著降低(P<0.05);与对照组(FGFR1208.07±10.70,p21ras202.43±12.36)相比,低剂量组(FGFR1181.47±7.43,p21ras182.00±8.98)的FGFR1、p21ras表达差异无显著性(P>0.05),中剂量组(FGFR1144.90±9.03,p21ras147.03±9.13)、高剂量组(FGFR1104.43±8.08,p21ras100.3±8.37)的表达均较明显降低(P<0.05),中、高剂量组FGFR1、p21ras表达较低剂量组均显著降低(P<0.05),高剂量组表达又较中剂量组显著降低(P<0.05),呈剂量依赖性。结论:辛伐他汀能抑制VSMC增殖,该作用是通过抑制FGFR1、p21ras蛋白表达实现的,这可能是辛伐他汀治疗动脉粥样硬化、再狭窄及高血压等心血管疾病的重要机制之一。

加减地黄饮子对局灶性脑缺血大鼠脑组织bFGF和FGFR1表达的影响

目的:研究加减地黄饮子对局灶性脑缺血大鼠脑组织bFGF和FGFR1表达的影响。方法:采用栓线法制作大鼠局灶性脑缺血损伤模型(MCAO)[1]。120只Wistar大鼠随机分成6组:空白组、假损伤组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、西药对照组,每组20只。均连续灌胃7天后,实施手术。结果:空白组、假损伤组bFGF和FGFR1呈弱阳性(+)表达,模型组、对照组和中药高剂量组呈阳性表达(++),但对照组和中药高剂量组bFGF和FGFR1表达更强,中药低剂量组呈强阳性(+++)表达。结论:说明加减地黄饮子低剂量可以明显增强缺血脑组织Bfgfey FGFR1的表达,从而保护神经组织并促进其功能修复。

FGFR1和IGF1R在肺鳞癌中的表达及其临床意义

目的探讨成纤维生长因子受体1(FGFR1)、胰岛素样生长因子受体1(IGF1R)在肺鳞癌组织中的表达及两者的临床意义。方法采用免疫组化法检测260例肺鳞癌术后患者的癌组织及40例癌旁正常组织中FGFR1、IGF1R的表达,分析两者表达与临床病理特征及预后的关系。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,用Cox回归模型分析影响肺鳞癌预后的独立因素。结果 FGFR1、IGF1R在肺鳞癌组织中的阳性表达率分别为51.92%(135/260)、55.4%(144/260),均明显高于癌旁正常组织的32.5%(13/40)、30.0%(12/40),差异均有统计学意义(P<0.05)。FGFR1在肺鳞癌组织中的表达与吸烟、淋巴结转移有关,IGF1R表达仅与淋巴结转移有关(P<0.005)。FGFR1、IGF1R蛋白阳性表达者的中位OS分别为38.21个月、38.48个月,均低于阴性表达者的42.55个月、42.51个月(P>0.05)。Cox多因素分析显示,FGFR1、IGF1R表达及淋巴结转移为肺鳞癌患者术后的独立预后因子。结论 FGFR1、IGF1R均参与了肺鳞癌的发生、发展,并且二者均为肺鳞癌的不良预后指标,并有望成为分子靶向治疗的新靶点。

miR-195在宫腔粘连组织中的表达及其与TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK通路的关系

目的:探讨miR-195在宫腔粘连(IUA)组织中的表达及其与TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK通路的关系。方法:选取2017年9月~2019年2月在本院接受宫腔镜治疗的IUA患者118例作为IUA组,同期在本院进行宫腔镜下诊刮的功能失调性子宫出血患者80例作为对照组。比较两组宫腔镜所得组织中miR-195及转化生长因子-β1(TGF-β1)/信号传导蛋白(Smads)、成纤维细胞生长因子(FGF2)/成纤维细胞生长因子受体(FGFR1)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路相关分子表达量的差异,采用Pearson检验评估IUA患者宫腔粘连组织中miR-195表达量与TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK通路的相关性。结果:IUA组中miR-195的表达量高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。IUA组中TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达量均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);IUA组中FGF2、FGFR1、ERKmRNA的表达量高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Pearson检验发现,IUA组中miR-195表达量与TGF-β1/Smads通路相关分子TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达量呈正相关,与FGF2/FGFR1/ERK通路相关分子FGF2、FGFR1、ERK mRNA的表达量呈正相关(P<0.05)。结论:miR-195在IUA病灶组织中高表达,可能通过激活TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK信号通路促进病情进展。

肺鳞癌FGFR1表达与临床病理特征及预后的相关性分析

目的:探讨肺鳞癌成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)蛋白表达与临床病理特征及预后的相关性。方法:收集南京医科大学第一附属医院2011—2013年临床病理资料完整的肺鳞癌标本149例,制作石蜡组织芯片,采用免疫组织化学MaxVision法检测肿瘤细胞FGFR1、bFGF、PTEN蛋白表达水平,并通过电话和门诊对患者进行术后随访。结果:①肿瘤细胞FGFR1阳性率为51.7%(77/149),其表达与吸烟史(P=0.019)、淋巴结转移(P<0.001)及分化程度(P<0.001)相关;bFGF阳性率为61.7%(92/149),其表达与淋巴结转移、T分期相关(P<0.05);PTEN阴性表达率为57.0%(85/149),其表达缺失仅与分化程度相关(P<0.05)。FGFR1表达与b FGF表达、PTEN表达缺失存在相关性(P<0.05)。②单因素生存分析显示,肿瘤细胞FGFR1、bFGF阳性与无复发生存期(relapse free survival,RFS)和总生存期(overall survival,OS)均呈显著相关(P<0.05);PTEN表达缺失与预后无明显相关性。③Cox多因素生存分析显示,FGFR1表达情况是肺鳞癌患者RFS和OS的独立预后因子(P<0.05)。结论:肺鳞癌FGFR1阳性表达与肿瘤低分化、有淋巴结转移及吸烟史显著相关,且与bFGF表达及PTEN表达缺失显著相关,肿瘤细胞FGFR1阳性提示患者生存期较短,是肺鳞癌患者的独立预后因素。

FGFR1在乳腺浸润性小叶癌中的表达及其与脉管生成的关系

目的:探讨成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR1)在乳腺浸润性小叶癌中的表达情况和对血管及淋巴管生成的影响。方法:采用免疫组织化学染色检测FGFR1在45例乳腺浸润性小叶癌、40例乳腺浸润性导管癌中的表达,同时采用CD34和D2-40双标免疫组织化学染色分别标记血管和淋巴管,检测乳腺浸润性小叶癌的微血管密度和微淋巴管密度。结果:乳腺浸润性小叶癌的RGRR1表达阳性率比乳腺浸润性导管癌高,其染色强度也比乳腺浸润性导管癌强,差异均具有统计学意义(P<0.05);FGFR1在乳腺浸润性小叶癌中的阳性表达与微血管密度相关(P<0.05),而与微淋巴管密度无关(P>0.05)。结论:初步推测FGFR1的过表达与乳腺浸润性小叶癌的发生有关,FGFR1的过表达能促进癌组织中的血管生成。

胶质瘤中FGFR1OP和PTEN的表达及其临床意义

目的探讨FGFR1OP和PTEN在胶质瘤中的表达情况及其临床意义。方法选取54例胶质瘤患者的手术切除标本,采用链霉菌抗生物素过氧化酶(SP)免疫组化法检测FGFR1OP和PTEN的表达。结果FGFR1OP和PTEN在胶质瘤中的阳性表达率分别为66.7%和48.1%。FGFR1OP在高度恶性胶质瘤(Ⅲ～Ⅳ级)中的OD值为(0.131±0.010),在低度恶性胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)中的OD值为(0.118±0.010),两者间差异有统计学意义(t=-5.497,P=0.000)。PTEN在高度恶性胶质瘤(Ⅲ～Ⅳ级)中的OD值为(0.113±0.008),在低度恶性胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)中的OD值为(0.135±0.016),两者间差异有统计学意义(t=0.239,P=0.026)。FGFR1OP和PTEN在表达强度上未见明显的相关性(r=0.245,P=0.327)。结论FGFR1OP的高表达与PTEN的低表达可能参与胶质瘤的生长分化和进展。

非小细胞肺癌FGFR1OP和p57/Kip2的表达及临床意义

探讨FGFR1OP和p57/Kip2在非小细胞肺癌中的表达情况。选取58倒非小细胞肺癌手术切除标本,采用SP法进行免疫组织化学染色。FGFR1OP和p57/Kip2在肺癌中的阳性表达率分别为91.4%和56.9%。FGFR1OP的表达强度与肿瘤的分化程度、病理类型密切相关,在低分化腺癌(P=0.003)和低分化鳞癌(P=0.001)中的表达强度要高于高分化的腺癌和鳞癌,在鳞癌中的表达强度高于腺癌(P=0.002);与之相反,p57/Kip2随着肿瘤分化程度降低(腺癌P=0.008,鳞癌P=0.000),表达强度也显著下降,在鳞癌中的表达强度要低于腺癌(P=0.000)。FGFR1OP的高表达与p57/Kip2的低表达可能参与肿瘤的生长分化和进展,并提示预后不良。

小鼠真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1的构建及表达

目的:通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1,并检测其在CHO细胞中的表达。方法:通过PCR扩增FGFR1的全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,经限制内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体包裹转染CHO细胞,Western blot检测FGFR1目的蛋白的表达。结果:经酶切和测序鉴定证实本实验构建的重组表达质粒正确,该质粒在体外转染CHO细胞后可表达FGFR1目的蛋白。结论:成功构建的pcDNA3.1(+)-FGFR1重组质粒能在体外表达FGFR1目的蛋白。

bFGF、FGFR1和FGFR2在子宫内膜癌的表达和临床意义

目的探讨成纤维细胞生长因子(bFGF)及其1型受体(FGFR1)、2型受体(FGFR2)在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SABC法,检测bFGF、FGFR1和FGFR2三种蛋白在正常子宫内膜组织、非典型增生子宫内膜、子宫内膜癌组织中的表达水平。结果研究可见在子宫内膜癌组织中bFGF、FGFR1和FGFR2的积分光密度(IOD)表达率平均为163.32±24.7、153.86±23.48、174.25±42.15,与正常子宫内膜组织(74.45±12.53、78.45±14.21、83.32±12.42)、非典型增生子宫内膜(112.34±26.8、109.06±24.43、114.43±21.48)比较差异显著,有统计学意义(P<0.05)。bFGFF、GFR1和FGFR2蛋白表达患者年龄、临床分期无明显的统计学意义(P>0.05)。G3低分化子宫内膜癌组织的表达量明显高于G2中分化子宫内膜癌、G1高分化子宫内膜癌高分化组(P<0.05)。结论 bFGF、FGFR1、FGFR2在子宫内膜癌中高表达;bFGFF、GFR1和FGFR2蛋白的表达强度与子宫内膜癌分化均呈正相关;而与患者年龄、临床分期无明显相关性。