miR-214-5p靶向FGFRL1对甲状腺癌细胞TPC-1增殖、侵袭和迁移影响

目的探讨微小RNA-214-5p(miR-214-5p)靶向成纤维细胞生长因子受体样1(FGFRL1)调控甲状腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制。方法2019年1~5月收集来自榆林市第一医院的47例甲状腺癌患者的癌组织及其癌旁组织,体外培养甲状腺癌BCPAP、TPC-1、SW1736细胞和正常甲状腺HT-ori3细胞,采用qRT-PCR法检测miR-214-5p与FGFRL1的表达;免疫组化检测甲状腺癌组织中FGFRL1阳性率;miR-214-5p模拟物/抑制剂(mi R-214-5p mimics/anti-miR-214-5p)及阴性对照(mi R-con/anti-miR-con)、FGFRL1小干扰RNA(si-FGFRL1)及其阴性对照(si-con)、miR-214-5p mimics与pcDNA-con、miR-214-5p mimics与FGFRL1过表达载体(pcDNA-FGFRL1)转染至TPC-1细胞;采用甲基噻唑基四唑(MTT)与Transwell迁移及侵袭实验分别检测miR-214-5p、FGFRL1对TPC-1细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。双荧光素酶报告基因实验验证miR-214-5p与FGFRL1的关系。结果与癌旁组织比较,甲状腺癌组织中miR-214-5p的表达量降低,FGFRL1的表达量升高,FGFRL1阳性率升高,差异均有统计学意义(P<0.05);甲状腺癌细胞中miR-214-5p表达水平低于正常甲状腺细胞,而FGFRL1表达水平高于正常甲状腺细胞,差异均有统计学意义(P<0.05);转染miR-214-5p mimics后,TPC-1细胞存活率降低,迁移及侵袭细胞数减少,差异均有统计学意义(P<0.05);转染anti-miR-214-5p后,TPC-1细胞存活率升高,迁移及侵袭细胞数增多,差异均有统计学意义(P<0.05);敲减FGFRL1可明显抑制TPC-1细胞增殖、迁移及侵袭,差异均有统计学意义(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证明miR-214-5可靶向结合FGFRL1;FGFRL1过表达可逆转上调miR-214-5p表达对TPC-1细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论miR-214-5p通过靶向FGFRL1而减弱甲状腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。

过表达FGFRL1抑制HCT116人结肠癌细胞的增殖和迁移并促进其凋亡

目的探讨成纤维细胞生长因子受体样蛋白1(FGFRL1)过表达对HCT116结肠癌细胞生物学行为的影响。方法构建可在哺乳动物细胞内表达FGFRL1的重组质粒pcDNA3.1-FGFRL1,转染结肠癌HCT116细胞后,通过持续的G418筛选获取稳定表达细胞系,实时定量PCR和Western blot法检测HCT116细胞FGFRL1的表达。随后将细胞分成空白组(未经处理的HCT116细胞)、阴性对照组(稳定转染空载体的HCT116细胞)及实验组(稳定转染pcDNA3.1-FGFRL1的HCT116细胞)。采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力,Transwell^(TM)小室实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡。结果FGFRL1过表达组FGFRL1 mRNA和蛋白水平显著升高。过表达FGFRL1后,HCT116细胞增殖明显降低、细胞迁移能力明显下降、细胞凋亡明显增加。结论过表达FGFRL1抑制HCT116结肠癌细胞的增殖和迁移,并促进其凋亡。