基于同源重组原理快速验证fim家族基因簇对鲍曼不动杆菌蹭动的影响

目的旨在利用含有抗生素耐药盒的线性PCR片段对鲍曼不动杆菌靶基因片段进行同源重组替换,实现基因的快速敲除及功能验证。方法以鲍曼不动杆菌Ab4294菌株为研究对象,PCR分别扩增fim基因簇(全长4980 bp)上游901 bp、下游1028 bp的序列作为重组的同源臂;从pUC57质粒中扩增获得卡那霉素抗生素耐药盒(KanR);利用重叠延伸PCR技术将上述3个片段连接,并将连接片段转化至鲍曼不动杆菌Ab4294中,筛选获得基因缺失突变株,构建质粒回补株,对所得菌株进行表型鉴定,探究fim基因簇的功能。结果利用含有抗生素耐药盒的线性PCR片段同源替换的方法成功构建了fim基因簇缺失的鲍曼不动杆菌Ab4294突变菌株;缺失菌株与野生株相比生长速率无明显差异,蹭动运动能力明显下降,回补该基因簇后表型恢复。结论利用含有抗性耐药盒的线性PCR片段同源替换的方法成功敲除鲍曼不动杆菌Ab4294的fim家族基因簇,该基因簇编码产物参与鲍曼不动杆菌的蹭动运动。

早期康复治疗在脊柱骨折伴脊髓损伤患者中的实施效果及对FIM评分的影响探究与讨论

讨论与分析脊柱骨折伴脊髓损伤围治疗期结合早期康复治疗作用价值,以及探析是否会对FIM评分有积极影响。方法 研究2022年3月-2023年8月,80例脊柱骨折伴脊髓损伤患者,利用随机抽签法展开分组,给予对照组骨折病患应用常规治疗,另外观察组骨折病患应用早期康复治疗,参与者均为40例。评析对比:(1)FIM评分;(2)治疗有效率;(3)康复时间;(4)血液流变学指标;(5)并发症发生率。结果 (1)从FIM评分中两个方面进行评估,观察组在运动功能与认知功能两个方面评分均比对照组两项评分更高(P<0.05)。(2)观察组在治疗方案取得效果上显著高于对照组取得疗效(P<0.05)。(3)观察组围术期记录指标与对照组围术期记录指标相比明显更好(P<0.05)。(4)从血液流变学中不同指标展开分析发现,观察组调节效果显著比对照组调节效果更好(P<0.05)。(5)尽早开展康复治疗措施可有效避免并发症出现,为此观察组统计发现并发症人数明显少于对照组并发症人数(P<0.05)。结论 脊柱骨折伴脊髓损伤患者经过早期康复治疗后运动能力及生活能力均明显升高,康复速度加快的同时,对患处血流灌注情况有明显改善作用,并发症减少,整体治疗效果升高,是一项值得推广的应用。

介绍FIM──一种残疾程度评测方法

介绍ＦＩＭ──一种残疾程度评测方法北京医院康复医学科高霞，王茂斌１９８３年美国康复医学会（ＴｈｅＡｍｅｒｉｃａｎＣｏｎｇｒｅｓｓｏｆＲｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎＭｅｄｉｃｉｎｅ）和美国物理医学与康复学会（ＴｈｅＡｍｅｒｉｃａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＰｈｙ...

偏瘫患者有关躯体功能的FIM量表评测可行性的初步研究

偏瘫患者有关躯体功能的ＦＩＭ量表评测可行性的初步研究鲁杰１张健１郑萍１对脑卒中患者进行运动功能评定迄今国际上尚无统一标准，如何结合我国实际情况，制定出一种既简便、实用，又可信的评定残疾严重程度的方法是十分必要的。我科从１９９６年１０月至１９９７年４月...

mTOR抑制剂FIM-A对人骨肉瘤细胞株MG-63的抑制作用及其机制

目的:观察新型哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalia target of rapamycin,mTOR)抑制剂含磷西罗莫司衍生物FIM-A对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响。方法:不同浓度(1×10-9～1×10-5mol/L)FIM-A处理MG-63细胞后,采用CCK-8法检测MG-63细胞的增殖,流式细胞术检测MG-63细胞周期和凋亡情况,ELISA法检测血管内皮细胞生长因子(vascu-lar endothelial cell growth factor,VEGF)和低氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的分泌量,RT-PCR和Western blot-ting分别检测FIM-A对MG-63细胞中mTOR、p70核糖体S6激酶(p70S6 kinase protein,p70s6k)及4E结合蛋白1(4E-bindingprotein 1,4E-BP1)mRNA和蛋白表达的影响。结果:与人成骨hF-OB1.19细胞相比,人骨肉瘤MG-63细胞中mTOR、p70s6k及4E-BP1 mRNA的表达水平明显升高(P<0.05)。FIM-A可有效抑制MG-63细胞的增殖(P<0.05),且呈剂量依赖性(r=0.940,P<0.01)。1×10-6mol/L FIM-A处理24 h后与对照组相比,G0/G1期MG-63细胞比例明显增加[(56.4±3.2)%vs(43.4±6.9)%,P<0.05],而MG-63细胞的凋亡率没有明显改变。不同浓度FIM-A作用24 h后,MG-63细胞中HIF-1α和VEGF表达均明显低于对照组(P<0.05),且具有剂量依赖性(HIF-1α,r=-0.988,P<0.01;VEGF,r=-0.998,P<0.01)。同时,FIM-A对MG-63细胞中mTOR(r=-0.919,P<0.01)、p70s6k(r=-0.843,P<0.01)及4EBP1(r=-0.818,P<0.01)蛋白的磷酸化也具有浓度依赖性抑制作用。结论:FIM-A能抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,并阻滞细胞周期于G0/G1期,其机制可能与影响mTOR信号通路蛋白磷酸化有关。

BI、FIM及ICF的应用

1常用ADL评定工具概述 1.1 Barthel指数Barthel指数（barthel index,BI）是从1955年开始就在美国Maryland州的部分医院中使用,Mahoney和Barthel于1965年报道,当时称为马利兰残疾指数（marylanddisability index,MDI）,包括进食、洗涤、修饰、穿衣、大小便控制、用厕、床椅转移、平地行走、上下楼梯10项内容,根据是否需要帮助及帮助程度的多少将其分为15、10、

西罗莫司F904及其衍生物FIM-A(AP23573)的体外抗癌活性

采用SRB和MTT法检测国产西罗莫司(西罗莫司F904)及其衍生物FIM-A的体外抗癌活性.结果表明,西罗莫司F904对白血病细胞株HL-60、胃癌细胞株MKN-45、肺癌细胞株A549、卵巢癌细胞株Ho-8910及乳腺癌细胞株MCF-7均具抑制能力,FIM-A对白血病细胞株HL-60、肺癌细胞株A549有抑制作用.

海洋青铜小单孢菌FIM 02-523全基因组测序及分析

青铜小单孢菌(Micromonospora chalcea, M. chalcea)FIM 02-523能够合成对乏氧肿瘤细胞、艰难梭菌等具有活性的环脂肽类化合物rakicidins。利用Illumina HiSeq高通量测序平台,本研究首次对M. chalcea FIM 02-523进行全基因组测序,得到总长约6.74Mb的序列信息。分析表明基因组GC含量为72.89%,包含了6167个蛋白编码序列。利用AntiSMASH预测基因组中存在19个生物合成基因簇。结合PKS/NRPS生物合成特征和rakicidins化学结构特点,定位到了rakicidins的生物合成基因簇,并初步推测其生物合成途径。研究为M. chalcea FIM 02-523的功能基因组学研究和代谢调控提供了理论基础。

基于FIM和SIM机制的移动通信业务融合问题解决方法研究

在业务特征模块化解决思路的基础上,对WIN(无线智能网)中提出的FIM(特征交互管理)和SIM(业务交互管理)功能实体进行了扩展,提出了交换机和SCP(业务控制点)中的业务特征模块调用机制,给出了用户同时申请FNS(亲情号码)、3PC(第三方计费)和CLIR(主叫号码屏蔽)三个业务情况下使用业务特征模块调用机制的模拟呼叫信令图.信令图表明,通过FIM和SIM机制的扩展,可以将多个功能上不冲突的业务组合在一起,解决业务融合问题.

基于改进FIM-未确知测度的尾矿库风险评价模型及应用

为了准确评估尾矿库运行安全风险状况,预防溃坝事故的发生,基于因子交互作用矩阵(FIM)和未确知测度理论构建了金属矿山尾矿库的安全性等级评价模型。结合实际情况从防洪强度指标、运行稳定性、结构破坏、尾矿输送与回水、安全管理和环境破坏6个方面选取影响尾矿库稳定性的16个因素指标,构建了各评价指标的未确知测度函数。该模型针对尾矿库危险评价过程的复杂性和指标的不确定性,根据实际情况分别对其进行定性和定量分析,利用FIM方法计算各评价指标的权重,并通过盲数理论对定性指标进行处理,运用兰氏距离函数对等级归属判定进行优化,最后得出最小距离为0.857,对应尾矿库安全等级为Ⅱ级(良好)。研究表明,该评价模型能够综合考虑影响尾矿库安全的各种因素,有效降低了尾矿库危险性评价中主观因素的影响,可为尾矿库的安全评价提供理论依据和可行性参考。

小单孢菌FIM98-160产生的抗分枝杆菌抗生素labilomycin

在筛选抗结核杆菌药物的过程中 ,从福州水库底土样品中分离到小单孢菌FIM98 1 60 ,对该菌株作分类鉴定 ,抗菌物质的分离纯化 ,所得化合物含有三个组分 ,其中A组分经理化性质、光谱特征和生物学活性研究 ,证明它与链霉菌产生的labilomycin同质。它是首次从小单孢菌代谢产物中分离得到。

小单孢菌FIM060152中抗肿瘤活性成分的提取分离纯化

本文是探讨分离和提取纯化小单孢菌FIM060152发酵液中的抗肿瘤抗生素的方法。实验采用HZ816大孔吸附树脂柱层析、萃取、硅胶柱层析、半制备色谱等方法对菌株FIM060152的发酵液中次级代谢产物进行提取分离纯化,获得化合物FIM060152-C1。理化性质和UV、MS以及NMR波谱分析结果表明化合物FIM060152-C1为Calicheamicinγ_1~I。化合物FIM060152-C1的抗肿瘤活性通过DNA断裂法进行检测,其断裂质粒pBR的最低浓度约为0.20μg/mL。

牙龈卟啉单胞菌菌毛fimA基因型在牙周牙髓联合病变中的分布

目的分析牙龈卟啉单胞菌菌毛不同fimA基因型在牙周源性牙周牙髓联合病变患牙根管内的分布状况。方法收集因牙周损害导致的牙周牙髓联合病变患牙43例,开髓揭髓顶后用纸尖采集根管内组织液,提取DNA。采用16SrRNA PCR检测牙龈卟啉单胞菌,并根据各fimA基因型的特异性引物,用聚合酶链反应检测不同fimA基因型菌株的分布。结果 16S rRNA PCR检测牙龈卟啉单胞菌阳性率76.7%。牙龈卟啉单胞菌fimA各基因型在牙龈卟啉单胞菌携带者的检出率分别为:TypeⅠfimA为24.2%;TypeⅠb fimA为27.2%;TypeⅡfimA为75.8%;TypeⅢfimA为9.1%;TypeⅣfimA为48.5%;TypeⅤfimA未检出;同时检测出TypeⅠ和Ⅰb fimA为3.0%;TypeⅡ和ⅣfimA为39.4%;TypeⅠ、Ⅰb和ⅡfimA为21.2%。TypeⅡ和ⅣfimA基因型的检出率显著高于其他基因型(P<0.05)。结论牙周源性牙周牙髓联合病变根管内牙龈卟啉单胞菌存在fimA基因多态性。TypeⅡ和ⅣfimA基因型牙龈卟啉单胞菌菌株是牙周牙髓联合病变根管内的主要定植菌,可能与牙周牙髓联合病变的发生、发展相关密切。

尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛fim H基因真核表达载体的构建及鉴定

目的构建以尿路致病性大肠杆菌临床分离株Ⅰ型菌毛编码基因fimH为目的基因的真核表达载体pcDNA3.0-fimH。方法提取尿路致病性大肠杆菌临床株基因组DNA,PCR扩增fimH基因片段,然后克隆至TA载体,通过PCR、酶切及测序鉴定后,将fimH基因片段用限制性内切酶切下克隆至真核表达载体pcDNA3.0,构建pcDNA3.0-fimH重组质粒。通过PCR、酶切对重组质粒pcDNA3.0-fimH进行鉴定。结果 PCR法克隆出全长为903 bp的fimH基因并构建了pcDNA3.0-fimH重组质粒。结论本研究成功构建尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛fimH基因真核表达质粒pcDNA3.0-fimH,为尿路致病性大肠杆菌基因疫苗的研制奠定了基础。

FimH_(1-156)融合基因的构建及其原核蛋白表达与纯化

目的构建含有与溶酶体膜蛋白2(LAMP-2)P41-49完全同源序列的尿路致病性大肠杆菌(UPEC)Ⅰ型菌毛FimH1-156为目的基因的原核载体,表达并纯化FimH1-156融合蛋白。方法采用PCR克隆pPKL241质粒获取FimH1-156基因,插入原核表达载体pET28a(+);将重组表达质粒转染感受态E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达FimH1-156融合蛋白,超声裂解细菌,NiNTA层析法进行纯化,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析、蛋白免疫印迹法(Western blot)对其进行鉴定。结果成功构建表达载体,经对融合蛋白表达条件的优化,在IPTG浓度为1mmol/L,诱导4h目的蛋白表达量最高,主要以包涵体形式存在;Western blot证实该FimH1-156融合蛋白可与抗6×His单克隆抗体发生结合反应。结论成功克隆FimH1-156融合蛋白表达基因并构建至原核表达载体,获得了包涵体纯化的FimH1-156融合蛋白,为下一步建立实验动物模型奠定了基础。

无细胞百日咳疫苗生产用菌种CMCC58003Fim2、Fim3抗原成分的血清学检测

目的检测无细胞百日咳疫苗生产用菌种CMCC58003(简称CMCC58003)的Fim2、Fim3抗原成分。方法运用玻片凝集试验法进行检测。结果现有5个批次CMCC58003的Fim2、Fim3抗原成分的玻片凝集试验均为阳性。结论 5个批次CMCC58003的Fim2、Fim3抗原成分的血清学检测结论为合格。

优于《新巴塞尔资本协议》的FIMS系统及STV模型分析

美国次级债危机后,不得不让人们反思,依据《新巴塞尔资本协议》资本充足率及其三大支柱的要求,为银行业设计的以内部评级法为风险管理核心的体系框架,能使商业银行安全的经营吗?本文介绍了美联储的金融机构监管系统(FIMS系统),认为其虽具有较高的风险敏感度,但更多地关注银行流动性风险。在资本配置和分配方面,STV模型比新资本协议有更好的实用性。因此,新协议并非是当代最优越的风险管理系统框架。

不同时间接受康复治疗对股骨颈骨折患者术后FIM评分的影响

目的观察不同时间接受康复治疗对股骨颈骨折患者术后FIM评分的影响。方法选择近期进行加压螺钉联合带血管蒂髂骨瓣转移手术治疗股骨颈骨折患者65例,入选对象分别在术后不同时间接受了康复干预治疗以及功能独立性测量量表(FIM)评估。结果两组患者术后6个月时FIM总分及多数分项评分明显高于3个月时测评结果,同时早期干预组术后不同时间段的FIM总分及大部分分项评分也明显高于对照组同期结果(P均<0.01～0.05)。结论尽早开始康复干预治疗可明显改善股骨颈骨折术后患者FIM评分。

基于DP-FIM的社区医疗物联网敏感数据保护方法

利用当前方法对敏感数据进行保护时,存在信息损失度高、隐匿率低、保护时间短的问题,为此提出了基于DP-FIM的社区医疗物联网敏感数据保护方法。基于物联网技术建立了社区医疗物联网结构,并采用DBSCAN算法对其中的敏感数据进行聚类,将匿名后的敏感数据标记记录隐藏在记录分组中;采用DP-FIM模型保护敏感数据,同时在模型中引入两种不同的噪声机制,使该模型的保护效果更佳。实验证明该方法的安全性强、有效性高。