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FITC标记的抗Brdu单克隆抗体的研制 被引量:5
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作者 徐志伟 邓鸿业 +3 位作者 韩淑红 邓玉兰 黄大无 丁桂凤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期164-165,共2页
关键词 BRDU 单克隆抗体 亲和纯化 fitc标记 增殖细胞
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FITC标记单克隆抗体检测icIL-1ra的方法研究
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作者 甘起霓 陈英玉 +2 位作者 宋泉声 张颖妹 马大龙 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期230-233,共4页
目的 建立用单克隆抗体技术检测细胞内IL 1ra的方法。方法 制备异硫氰酸荧光素 (FITC)标记的抗人IL 1ra单克隆抗体 ,使其进入U937细胞内与icIL 1ra结合 ,然后用流式细胞仪 (FACS)检测荧光强度 ,并比较U937细胞在刺激前后荧光强度的变... 目的 建立用单克隆抗体技术检测细胞内IL 1ra的方法。方法 制备异硫氰酸荧光素 (FITC)标记的抗人IL 1ra单克隆抗体 ,使其进入U937细胞内与icIL 1ra结合 ,然后用流式细胞仪 (FACS)检测荧光强度 ,并比较U937细胞在刺激前后荧光强度的变化情况是否与icIL 1ra表达的变化情况相一致。结果 在一定剂量范围内 ,经PMA分化和LPS刺激的U937细胞的icIL 1ra表达量增加 ,其检测荧光强度相应增加。结论 用单克隆抗体检测细胞内icIL 1ra是一种快速、准确的方法 ,本实验方法能够满足实际研究工作中对icIL 展开更多
关键词 fitc标记 单克隆抗体 检测 icIL-1ra 方法
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拟南芥Ran2小GTP结合蛋白抗血清的制备及其FITC荧光标记 被引量:2
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作者 马立安 江涛 张忠明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期439-442,共4页
将原核表达、纯化的Ran2蛋白对新西兰兔进行免疫制备抗血清,ELISA测定其效价为1∶51 200。免疫印迹分析表明,原核表达、纯化的Ran2和拟南芥可溶性蛋白杂交带均在26 ku处。FITC荧光标记抗体检测Ran2绿色杂交带主要出现在细胞分裂间期的... 将原核表达、纯化的Ran2蛋白对新西兰兔进行免疫制备抗血清,ELISA测定其效价为1∶51 200。免疫印迹分析表明,原核表达、纯化的Ran2和拟南芥可溶性蛋白杂交带均在26 ku处。FITC荧光标记抗体检测Ran2绿色杂交带主要出现在细胞分裂间期的核膜上。 展开更多
关键词 Ran2小GTP结合蛋白 抗血清 免疫印迹 fitc荧光标记
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利用荧光标记的T7噬菌体研究配体/受体的相互作用 被引量:1
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作者 李姣 王爱萍 +6 位作者 张红 张改平 王选年 易明林 鲁琨 王秋霞 冯丽丽 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1335-1339,共5页
将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2展示到T7噬菌体表面,以FITC标记纯化的重组噬菌体,通过荧光显微镜观察与流式细胞仪检测,研究标记噬菌体与病毒受体细胞——法氏囊B细胞的相互作用。结果展示有IBDVVP2蛋白的噬菌体经FITC标记后... 将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2展示到T7噬菌体表面,以FITC标记纯化的重组噬菌体,通过荧光显微镜观察与流式细胞仪检测,研究标记噬菌体与病毒受体细胞——法氏囊B细胞的相互作用。结果展示有IBDVVP2蛋白的噬菌体经FITC标记后仍然具有与受体细胞结合的特性,荧光显微镜下可见绿色荧光,流式数据显示其平均荧光强度明显高于阴性对照,且IBDV疫苗株TAD可明显阻断其结合。由此得出结论,FITC标记与噬菌体展示技术相结合,可进行配体/受体间相互作用的研究。 展开更多
关键词 噬菌体展示 fitc标记 传染性法氏囊病病毒(IBDV) VP2蛋白
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FITC示踪在优化小麦花粉管通道转化方法中的应用 被引量:2
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作者 仇泽 苏乔 安利佳 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期611-616,共6页
利用FITC(fluorescein is othiocyanate,异硫氰酸荧光素)标记的外源DNA对小麦进行了花粉管通道法转化,在荧光显微镜下观察了外源DNA进入小麦胚囊的情况,并初步研究了转化时间及转化溶液组成对DNA进入胚囊效率的影响。结果表明,外源DNA... 利用FITC(fluorescein is othiocyanate,异硫氰酸荧光素)标记的外源DNA对小麦进行了花粉管通道法转化,在荧光显微镜下观察了外源DNA进入小麦胚囊的情况,并初步研究了转化时间及转化溶液组成对DNA进入胚囊效率的影响。结果表明,外源DNA沿着花粉管生长过程中形成的花粉管通道进入胚囊;授粉45 min和60min进行转化外源DNA进入胚囊的几率较大,因此在此段时间开始转化较为合适;相对于TE缓冲液,将0.05%Silwet L-77和5%蔗糖作为转化溶液可以缩短DNA进入胚囊的时间,但不能提高外源DNA进入胚囊的几率。研究表明,使用FITC标记观察外源DNA进入胚囊效率的方法,可简便有效地应用于花粉管通道法转化条件的初步优化。 展开更多
关键词 小麦 fitc标记 花粉管通道 外源DNA
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腺苷对肺再灌注损伤时中性粒细胞CD11b/CD18的影响 被引量:3
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作者 王锋 王佳祥 +3 位作者 崔识远 张建卿 程兆云 谢周良 《天津医药》 CAS 北大核心 2005年第5期287-289,共3页
目的:探讨腺苷预处理对肺缺血再灌注(I/R)全身炎性反应损伤的抑制作用。方法:60只大耳白兔无特定病原体动物(SPF)随机分为3组,每组20只。I组未行缺血再灌注处理;II组行左肺缺血再灌注处理;III组行左肺缺血再灌注处理,并于术前10min经颈... 目的:探讨腺苷预处理对肺缺血再灌注(I/R)全身炎性反应损伤的抑制作用。方法:60只大耳白兔无特定病原体动物(SPF)随机分为3组,每组20只。I组未行缺血再灌注处理;II组行左肺缺血再灌注处理;III组行左肺缺血再灌注处理,并于术前10min经颈静脉给予腺苷(adenosine)。采用在体肺缺血再灌注损伤模型,分别于缺血45min,再灌注1,2,4h流式细胞仪测定CD11b/CD18-FITC标记的中性粒细胞(PMN)阳性细胞百分率及左肺组织湿干质量比的变化。结果:Ⅱ组再灌注后各时点CD11b/CD18表达及左肺组织湿干质量比显著高于I组和III组(P<0.01或P<0.05),结论:腺苷预处理可抑制PMN表面CD11b/CD18表达的上调,减轻肺血管内皮细胞的损伤。 展开更多
关键词 CD11B/CD18 中性粒细胞 肺再灌注损伤 肺缺血再灌注 无特定病原体动物 肺血管内皮细胞 腺苷预处理 全身炎性反应 fitc标记 流式细胞仪 抑制作用 大耳白兔 经颈静脉 损伤模型 阳性细胞 肺组织 百分率 表达及 PMN 量比
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豚鼠螺旋神经节细胞中钙磷脂结合蛋白Ⅵ表达及意义
7
作者 吴先光 周梁 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2005年第4期251-253,共3页
目的钙离子在耳蜗功能中具有重要作用。本实验探讨与钙离子结合蛋白相关annexin家族中重要成员annexinⅥ在螺旋神经节细胞中的表达和意义。方法用原位杂交的方法检测正常和经过倍频窄带噪声刺激6小时的豚鼠基底膜铺片和石蜡包埋中轴切片... 目的钙离子在耳蜗功能中具有重要作用。本实验探讨与钙离子结合蛋白相关annexin家族中重要成员annexinⅥ在螺旋神经节细胞中的表达和意义。方法用原位杂交的方法检测正常和经过倍频窄带噪声刺激6小时的豚鼠基底膜铺片和石蜡包埋中轴切片中annexinⅥmRNA表达,所选用的探针为经过FITC标记的寡核苷酸。结果在正常未经处理的和接受噪声刺激的豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞中均可见annexinⅥmRNA表达。接受噪声刺激的豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞的染色明显较正常豚鼠强烈。结论annexinⅥ参于内耳的生理活动,短期的噪声刺激后annexinⅥ在螺旋神经节细胞中表达增高。 展开更多
关键词 磷脂结合蛋白 豚鼠 耳蜗螺旋神经节细胞 annexin 表达及 mRNA表达 fitc标记 声刺激 耳蜗功能 蛋白相关 石蜡包埋 原位杂交 寡核苷酸 生理活动 钙离子 基底膜 接受
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Pharmacokinetics and Biodegradation Performance of a Hydroxypropyl Chitosan Derivative 被引量:5
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作者 SHAO Kai HAN Baoqin +3 位作者 DONG Wen SONG Fulai LIU Weizhi LIU Wanshun 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS 2015年第5期888-896,共9页
Hydroxypropyl chitosan(HP-chitosan) has been shown to have promising applications in a wide range of areas due to its biocompatibility, biodegradability and various biological activities, especially in the biomedical ... Hydroxypropyl chitosan(HP-chitosan) has been shown to have promising applications in a wide range of areas due to its biocompatibility, biodegradability and various biological activities, especially in the biomedical and pharmaceutical fields. However, it is not yet known about its pharmacokinetics and biodegradation performance, which are crucial for its clinical applications. In order to lay a foundation for its further applications and exploitations, here we carried out fluorescence intensity and GPC analyses to determine the pharmacokinetics mode of fluorescein isothiocyanate-labeled HP-chitosan(FITC-HP-chitosan) and its biodegradability. The results showed that after intraperitoneal administration at a dose of 10 mg per rat, FITC-HP-chitosan could be absorbed rapidly and distributed to liver, kidney and spleen through blood. It was indicated that FITC-HP-chitosan could be utilized effectively, and 88.47% of the FITC-HP-chitosan could be excreted by urine within 11 days with a molecular weight less than 10 k Da. Moreover, our data indicated that there was an obvious degradation process occurred in liver(< 10 k Da at 24 h). In summary, HP-chitosan has excellent bioavailability and biodegradability, suggesting the potential applications of hydroxypropyl-modified chitosan as materials in drug delivery, tissue engineering and biomedical area. 展开更多
关键词 hydroxypropyl chitosan fluorescein isothiocyanate PHARMACOKINETICS biodegradation performance biomedicalmaterial
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小鼠肺泡巨噬细胞的分离及鉴定 被引量:4
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作者 黄燕霞 许娜 +6 位作者 赵红 孙成彪 刘洋 陈华鑫 万家余 刘文森 金宁一 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期413-416,共4页
目的分离小鼠肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM),并鉴定其纯度和吞噬活性。方法采用肺泡灌洗法分离小鼠AM,分别通过瑞氏-姬姆萨染色法和Diff-Quik染色法鉴定AM的纯度;将FITC标记的大肠埃希菌与AM按不同比例混合(10∶1、15∶1、20∶1... 目的分离小鼠肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM),并鉴定其纯度和吞噬活性。方法采用肺泡灌洗法分离小鼠AM,分别通过瑞氏-姬姆萨染色法和Diff-Quik染色法鉴定AM的纯度;将FITC标记的大肠埃希菌与AM按不同比例混合(10∶1、15∶1、20∶1)后孵育不同时间(20、25、30 min),荧光倒置显微镜下观察AM的吞噬活性。结果两种染色方法染色时,阳性细胞百分率均在94%以上,Diff-Quik染色法细胞阳性率略高于瑞氏-姬姆萨染色法,染色时间较瑞氏-姬姆萨染色法短,且背景干净无杂质。小鼠AM的吞噬率和吞噬指数随着FITC标记的细菌与AM比例的增加而增大,且随孵育时间的延长呈先升高再降低的趋势。当细菌与细胞比例为20∶1,孵育时间为25 min时,吞噬率和吞噬指数达最大,分别为(63.67±4.04)%和1.41±0.07。结论贴壁培养法可获得较高纯度的小鼠AM,Diff-Quik染色法鉴定巨噬细胞纯度优于瑞氏-姬姆萨染色法,其可代替瑞氏-姬姆萨染色法,成为一种快速、高效的鉴定巨噬细胞纯度的方法。 展开更多
关键词 小鼠肺泡巨噬细胞 Diff-Quik染色法 吞噬活性 fitc标记大肠埃希菌
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血管紧张素Ⅰ型受体反义寡核苷酸对大鼠肾脏局部肾素-血管紧张素系统的阻断作用 被引量:1
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作者 刘英莉 马骥 +4 位作者 孙晶 陆福明 刘少军 林善锬 顾勇 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期199-203,共5页
目的 研究血管紧张素Ⅰ型受体(AT1)反义(AS)寡核苷酸(ODN)对大鼠肾脏局 部肾素-血管紧张素系统(RAS)的阻断作用。方法 采用单侧肾动脉注射+原位电穿孔的方法, 将AT1 AS-ODN导入到Wistar大鼠的一侧肾脏,观察以FITC荧光标记的ODN在肾脏的... 目的 研究血管紧张素Ⅰ型受体(AT1)反义(AS)寡核苷酸(ODN)对大鼠肾脏局 部肾素-血管紧张素系统(RAS)的阻断作用。方法 采用单侧肾动脉注射+原位电穿孔的方法, 将AT1 AS-ODN导入到Wistar大鼠的一侧肾脏,观察以FITC荧光标记的ODN在肾脏的转移位 置,以AT1放射自显影定量分析的方法观察转移基因的时间-效应曲线。在基因转移3d后以 RT-PCR、Western印迹及免疫组织化学方法检测肾脏AT1的mRNA和蛋白表达与分布,并与正 义(Sen)ODN转移、假注射+肾脏原位电穿孔(Sham)作为对照。结果FITC标记的ODN在基因 转移10 min后主要定位于转移侧肾脏的肾小球,而对侧肾脏FITC荧光阴性。AT1放射自显影定 量分析显示在基因转移后的3 d内,结合有血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的AT1较未转移的对侧肾脏 减少约70%。AT1 AS-ODN基因转移后3 d,转移侧肾脏AT1 mRNA水平较对侧肾脏下降约 43%,蛋白水平下降约67%,而与AT1 Sen-ODN和Sham组转移侧肾脏比较,AT1的mRNA水平 下降分别约47%和51%,蛋白水平下降分别约63%和71%。免疫组化检查发现AT1的阻断以系 膜区的表达减少为主。结论 本研究所用的单侧肾动脉注射+原位电穿孔的基因转移方法成功 地抑制了单侧肾脏的肾小球AT1受体的表达,为研究全身性疾病肾损害中肾脏局部RAS的短 展开更多
关键词 局部肾素-血管紧张素系统 阻断作用 Ⅰ型受体 反义寡核苷酸 大鼠 血管紧张素Ⅱ(AngⅡ) WESTERN印迹 免疫组织化学方法 AS-ODN mRNA水平 放射自显影 RT-PCR fitc标记 免疫组化检查 基因转移方法 动脉注射 定量分析 蛋白水平
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