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利用Hoechst 33342-PI荧光双染法评价氰氨化钙对茄病镰刀菌生物活性的影响 被引量:1
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作者 贲海燕 霍建飞 +5 位作者 姚玉荣 高苇 王万立 郝永娟 曲红云 张雪岩 《山东农业科学》 北大核心 2023年第2期127-134,共8页
本试验以茄病镰刀菌(Fusarium solani)为研究对象,探索了Hoechst 33342及PI荧光染剂对病菌不同活性孢子的色泽差异,明确了病原菌经Hoechst 33342染色后的活孢子发蓝色荧光,最佳染色浓度和时间为1μg/mL、20 min;碘化丙啶(PI)染色后的死... 本试验以茄病镰刀菌(Fusarium solani)为研究对象,探索了Hoechst 33342及PI荧光染剂对病菌不同活性孢子的色泽差异,明确了病原菌经Hoechst 33342染色后的活孢子发蓝色荧光,最佳染色浓度和时间为1μg/mL、20 min;碘化丙啶(PI)染色后的死孢子发红色荧光,最佳染色浓度和时间为3μg/mL、10 min。并由此建立了Hoechst 33342-PI荧光双染技术,应用该技术可快速、清晰地甄别出不同浓度氰氨化钙对茄病镰刀菌孢子活性和萌发的影响,结果表明,氰氨化钙对茄病镰刀菌的灭杀效果随着浓度增高而增强,且与处理时间呈正相关。2000 mg/L氰氨化钙处理3 h,孢子致死率高达83.97%;500~1000 mg/L处理3 h,孢子致死率为7.15%~26.80%,孢子萌发率为2.40%~3.59%,处理48 h时,孢子致死率达92.07%~100%。250 mg/L氰氨化钙对茄病镰刀菌的致死效果微弱或没有影响。本研究通过菌丝速率法和生物量法进一步验证了应用Hoechst 33342-PI荧光双染法评价氰氨化钙对茄病镰刀菌孢子活力的影响是可行的。这为突破植物病原微生物药剂室内常规筛选方法提供了新的思路和技术手段。 展开更多
关键词 Hoechst 33342-pi荧光双染法 氰氨化钙 茄病镰刀菌 生物活性
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Study on anti-hepatocarcinoma activity of tectorigenin from Pueraria Flos in vitro
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作者 WU Ji-liang1,WANG Xin-liang2,ZHANG Rui-xue1,OUYANG Chang-han1,WANG Xue-fang1(1.Department of Pharmacology,Xianning College,Xianning 437100,China 2.Central Lab of Xianning College,Xianning 437100,China) 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第S1期79-79,共1页
Objective To evaluate the inhibitory effect of tectorigenin on the proliferation of human hepatoma cells SMMC-7721.Methods Tectorigenin was added into SMMC-7721 human hepatoma cells in log phase.After 24 hours the mor... Objective To evaluate the inhibitory effect of tectorigenin on the proliferation of human hepatoma cells SMMC-7721.Methods Tectorigenin was added into SMMC-7721 human hepatoma cells in log phase.After 24 hours the morphologic change was observed with an inverted microscope.The inhibitory effect on the proliferation of tumor cells was evaluated by MTT.The early and late apoptosis rate were measured by flow cytometry using Annexin V-FITC /PI double staining and PI single staining respectively.Results After cultivated with tectorigenin for 24 hours,the hepatoma cells became smaller,rounder and thicker.The adherent cells in experimental group were much fewer.The results of MTT showed that tectorigenin could inhibit the cell proliferation in a concentration-dependence manner from 1.00 μg·mL-1 to 8.00 μg·mL-1.48-hour maximal inhibition rate could reach 76.57%,IC50 was(3.71±1.17)μg·mL-1(n=5).The 6-hour early apoptosis rate of hepatoma cells was(28.05±1.72)%,(56.17±2.14)% and(88.54±3.04)% respectively after cultivated with 5.00,10.00 and 20.00 μg·mL-1 tectorigenin.There were significant difference between the experimental groups and control group whose early apoptosis rate was(6.77±0.81)%(P<0.01).The 48-hour late apoptosis rate was(9.33±0.85)%,(17.02±1.38)% and(38.04±2.03)% respectively,there were also significant difference between the experimental groups and control group(P<0.05).Conclusions Tectorigenin has significant inhibitory effect on the proliferation of SMMC-7721 human hepatoma cells within the range of 1.00 to 16.00 μg·mL-1 and the mechansim may be related to promoting apoptosis. 展开更多
关键词 TECTORIGENIN apoptosis hepatome cell ANNEXIN v-pi double staining
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苯并(a)芘对神经细胞的毒性及细胞色素P4501A1的诱导表达 被引量:1
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作者 魏建宏 张红梅 +1 位作者 牛侨 聂继盛 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期608-613,共6页
目的探讨苯并(a)芘[B(a)P]对神经细胞毒性、细胞凋亡与细胞色素P4501A1(CYP1A1)诱导表达的关系。方法选用新生1~3d的SD大鼠,分离大脑皮质,进行神经元培养,在细胞培养第5天左右,选取生长良好的同批次神经细胞,以苯并(a)芘分别对神经细... 目的探讨苯并(a)芘[B(a)P]对神经细胞毒性、细胞凋亡与细胞色素P4501A1(CYP1A1)诱导表达的关系。方法选用新生1~3d的SD大鼠,分离大脑皮质,进行神经元培养,在细胞培养第5天左右,选取生长良好的同批次神经细胞,以苯并(a)芘分别对神经细胞染毒,使苯并(a)芘终浓度分别为0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L。继续培养40h,应用cck8试剂盒检测神经细胞活力、Annexin V和PI双染法进行细胞凋亡的检测,应用RT-PCR法检测神经细胞CYP1A1mRNA的表达,免疫组织化学SABC法检测神经元CYP1A1蛋白的表达。结果随着苯并[a]芘浓度的增加,神经细胞活力降低,早期凋亡率逐渐增高,细胞活力中高剂量组与对照组比较差异均有统计学意义,早期凋亡率仅高剂量组与对照组比较差异有统计学意义,趋势检验表明,细胞活力降低、凋亡率增高具有剂量依赖性。而且随B(a)P剂量的增高,CYP1A1mRNA及蛋白表达增多,有剂量-反应关系,CYP1A1基因和蛋白表达与神经细胞凋亡率的相关分析表明,神经细胞凋亡率与CYP1A1mRNA表达呈正相关(r=0.831,P<0.01);与CYP1A1蛋白表达呈正相关(r=0.780,P<0.01)。结论苯并[a]芘可致神经细胞凋亡,神经细胞CYP1A1诱导表达是神经细胞损伤的关键因素。 展开更多
关键词 苯并(A)芘 细胞毒性 CYP1A1 Annexinvpi双染法 反转录-聚合酶链反应 免疫组织化学 大鼠
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阴极极化对金属电极表面微生物膜的影响 被引量:2
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作者 李相波 王佳 《装备环境工程》 CAS 2004年第3期27-31,共5页
阴极极化对不锈钢表面微生物膜的附着有一定的影响,通过荧光显微镜记数和细菌双染色方法(AO+PI),对在不同电位下极化过的不锈钢表面进行了观察,同时做了对比实验.实验证明在一定的范围内(-800mV~-1000mV),阴极极化对微生物向洁净金属... 阴极极化对不锈钢表面微生物膜的附着有一定的影响,通过荧光显微镜记数和细菌双染色方法(AO+PI),对在不同电位下极化过的不锈钢表面进行了观察,同时做了对比实验.实验证明在一定的范围内(-800mV~-1000mV),阴极极化对微生物向洁净金属表面的附着有一定的抑制作用,但是对已经附着的微生物膜不能够起到脱除或完全杀灭作用,只能杀死靠近金属表面的微生物.通过模拟膜实验,从侧面证明了只有微生物膜附着而无生物活性时,钝性金属的开路电位不会发生正移. 展开更多
关键词 阴极极化 双染色方法(AO+pi) 模拟膜 开路电位
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水鬼蕉生物碱对人肝癌HepG-2细胞凋亡的影响
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作者 陈宁 赵丹 +5 位作者 郑威 李均 杜娟 凌娜 宋冬雪 徐昶儒 《黑龙江农业科学》 2019年第6期128-132,共5页
为揭示水鬼蕉生物碱(AHL)对HepG-2细胞作用,采用FITC-Annexin V/PI双染色法检测AHL对HepG-2细胞凋亡的影响,并检测了AHL对HepG-2细胞内Ca2+浓度、活性氧(ROS)、pH的影响。结果表明:AHL可以通过细胞内ROS、Ca^2+、pH三者间相互作用而诱... 为揭示水鬼蕉生物碱(AHL)对HepG-2细胞作用,采用FITC-Annexin V/PI双染色法检测AHL对HepG-2细胞凋亡的影响,并检测了AHL对HepG-2细胞内Ca2+浓度、活性氧(ROS)、pH的影响。结果表明:AHL可以通过细胞内ROS、Ca^2+、pH三者间相互作用而诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 水鬼蕉生物碱 fitc-annexin v/pi双染色法 CA^2+浓度 活性氧 pH
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淫羊藿素对大鼠软骨细胞作用的实验研究 被引量:10
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作者 何李乐 王万春 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期517-521,共5页
目的:研究淫羊藿素对大鼠软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法:将细胞随机分为6组,分别予以浓度为0,4,8,16,32,64μmol/L的淫羊藿素(纯度为99%)处理不同时间组。药物作用于细胞后,MTT比色法检测大鼠软骨细胞的增殖,Annexin V/PI双染色流式... 目的:研究淫羊藿素对大鼠软骨细胞增殖、凋亡的影响。方法:将细胞随机分为6组,分别予以浓度为0,4,8,16,32,64μmol/L的淫羊藿素(纯度为99%)处理不同时间组。药物作用于细胞后,MTT比色法检测大鼠软骨细胞的增殖,Annexin V/PI双染色流式细胞术检测细胞的凋亡。结果:MTT实验结果显示,4和8μmol/L的淫羊藿素作用于大鼠软骨细胞72 h,大鼠软骨细胞的增殖能力高于对照组(P<0.05);16,32,64μmol/L的淫羊藿素作用于大鼠软骨细胞72 h,大鼠软骨细胞的增殖能力低于对照组(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,在药物处理24 h和48 h后,4μmol/L的淫羊藿素所引起的细胞凋亡率较对照组明显降低(P<0.05);8,16,32μmol/L的淫羊藿素则会增加细胞的凋亡率(P<0.05)。结论:淫羊藿素在低浓度(4,8μmol/L)时能促进大鼠软骨细胞的体外增殖和抑制凋亡,而过高浓度的淫羊藿素反会抑制细胞增殖和促进凋亡。 展开更多
关键词 大鼠软骨细胞 淫羊藿素 MTT比色法 ANNEXIN v/pi双染色流式细胞术
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葛花鸢尾异黄酮对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用 被引量:11
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作者 汪新亮 吴基良 +1 位作者 郑敏 赵骥 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期168-171,共4页
目的:研究葛花中的鸢尾异黄酮对SMMC-7721人肝癌细胞株增殖的抑制作用。方法:将野葛花的甲醇提取物用盐酸加热水解得到葛花总异黄酮,总异黄酮经硅胶柱层析分离获得鸢尾异黄酮。SMMC-7721人肝癌细胞培养至对数生长期后,加入不同浓度... 目的:研究葛花中的鸢尾异黄酮对SMMC-7721人肝癌细胞株增殖的抑制作用。方法:将野葛花的甲醇提取物用盐酸加热水解得到葛花总异黄酮,总异黄酮经硅胶柱层析分离获得鸢尾异黄酮。SMMC-7721人肝癌细胞培养至对数生长期后,加入不同浓度鸢尾异黄酮进行干预,在倒置显微镜下观察细胞形态的变化;采用四甲基偶氮唑(MTT,methyl thiazolyl tetrazolium)法分析肝癌细胞生长抑制作用;使用Annexin V-FITC/PI双染色,经流式细胞仪检测鸢尾异黄酮对细胞早期凋亡率的影响。结果:鸢尾异黄酮明显减少肝癌细胞贴壁数量,使癌细胞变小变圆;在1.0~8.0μg·mL^-1范围内浓度依赖性地抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖;鸢尾异黄酮在5.00,10.00和20.00μg·mL^-1浓度下均能显著提高肝癌细胞株早期凋亡率(P〈0.01)。结论:鸢尾异黄酮对人肝癌细胞SMMC-7721增殖具有明显的抑制作用,其机制可能与促进癌细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 鸢尾异黄酮 细胞凋亡 抗肿瘤活性 ANNEXIN v/pi双染色法
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蒙药珍宝丸对新生大鼠缺氧性脑损伤脑组织的保护作用研究 被引量:6
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作者 张艳 石博 +1 位作者 黄可欣 闻春艳 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2014年第16期2596-2598,共3页
目的:探讨蒙药珍宝丸对新生大鼠缺氧性脑损伤脑组织的保护作用。方法:取新生7天Wistar大鼠200只,雌雄不限,随机分成5组,每组40只;将新生Wistar大鼠置于8%O2+92%N2(V/V)的缺氧箱内建立新生鼠缺氧模型。在造模前每日一次连续7天灌胃给予... 目的:探讨蒙药珍宝丸对新生大鼠缺氧性脑损伤脑组织的保护作用。方法:取新生7天Wistar大鼠200只,雌雄不限,随机分成5组,每组40只;将新生Wistar大鼠置于8%O2+92%N2(V/V)的缺氧箱内建立新生鼠缺氧模型。在造模前每日一次连续7天灌胃给予生理盐水和珍宝丸,缺氧期间也同样剂量给药,分别于缺氧后12 h、24 h、48 h、72 h处死动物取血及脑组织。采用ELISA法检测大鼠血清及脑组织中IGF-1的蛋白含量;采用Annexin V/PI双染色法检测各组大鼠脑组织中神经元细胞凋亡率。结果:ELISA法检测结果显示,与正常对照组比较,大鼠血清及脑组织中IGF-1蛋白含量,在模型缺氧1h、4 h组均随时间的延续逐渐降低(P<0.01);珍宝丸缺氧1 h和4 h治疗组在12 h、24 h、48 h、72 h时间点IGF-1蛋白含量均略降低,12 h时间点差异有统计学意义(P<0.05),其他各时间点无统计学差异(P>0.05);1 h组在各时间点上明显高于4h组。Annexin V/PI双染色法检测结果显示,与正常对照组比较,模型缺氧1 h、4 h组均在24 h时间点细胞凋亡率最高,随时间的延续细胞凋亡率下降,至72 h时间点细胞凋亡率低于12 h(P<0.01);珍宝丸缺氧1 h和4 h治疗组12 h细胞凋亡率明显升高(P<0.01),24 h、48 h、72 h时间点细胞凋亡率略升高(P<0.01)。结论:珍宝丸可通过上调缺氧性脑损伤大鼠血清及脑组织中IGF-1蛋白含量,降低神经元细胞的凋亡率,从而对缺氧性脑损伤具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 珍宝丸 缺氧性脑损伤 ELISA法 胰岛素样生长因子-1 ANNEXIN v/pi双染 细胞凋亡
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