CD71荧光抗体和PI染色的微核流式细胞术检测研究

目的探索CD71荧光抗体和PI染色的微核流式细胞术自动化检测方法。方法采用-85℃甲醇固定细胞,CD71荧光抗体和PI染色,以伯氏疟原虫感染小鼠血细胞为微核模式生物调校流式细胞仪,建立微核流式细胞术检测方法,并对秋水仙素(COL)诱导的小鼠外周血含微核网织红细胞进行了检测。结果所建立的方法能明确分辨外周血含与不含微核的网织红细胞和成熟红细胞,COL处理小鼠的外周血含微核网织红细胞率呈明显的剂量依赖性升高,流式细胞术与显微镜检测的外周血含微核网织红细胞率有良好相关性(r=098)。结论微核流式细胞术检测方法能准确地检测小鼠外周血含微核网织红细胞。

FITC-AnnexinV/PI双染色FCM检测非小细胞肺癌药物敏感性

目的 检测非小细胞肺癌 ( NSCLC)体外化疗药物敏感性。方法 采用 FITC-Annexin V/PI双染色双变量流式细胞分析法。结果 49例非小细胞肺癌对化疗药物的敏感度由高至低依次为泰素、顺铂、丝裂霉素、诺维本、长春地辛和依托泊苷。结论 本试验是一种新的化疗药物敏感性检测方法。 6种化疗药物对 NSCLC标本的敏感度与临床单剂化疗疗效基本一致 ,提示该检测对提供临床个体化化疗方案的选择具有重要的参考价值。

用YO-PRO-1和PI联合染色定量检测细胞凋亡

经不同浓度staurosporine处理诱导凋亡的G7细胞样品,分别用YO-PRO-1/PI和AV/PI进行荧光染色,借助流式细胞仪检测凋亡情况,将两种检测方法得到的结果进行统计学分析显示,二者有显著的相关性(r=0.9659,P<0.01),且没有显著性差异(P<0.05);另外,上述凋亡细胞样品经YO-PRO-1/PI染色后在荧光显微镜下计数凋亡细胞比例的结果与AV/PI流式细胞仪的检测结果也有显著的相关性(r=0.9903,P<0.01),且没有显著性差异(P<0.05)。以上这些结果表明,用YO-PRO-1/PI对细胞进行染色、借助流式细胞仪和荧光显微镜均能准确地检测细胞凋亡,可替代AV/PI流式细胞仪方法用于细胞凋亡的检测。

贝类精子质量检测与评价方法的研究Ⅴ:栉江珧精子线粒体活性的荧光检测

采用罗丹明123(Rh123)和碘化丙啶(PI)两种荧光染料对栉江珧(Atrina pectinata)精子线粒体活性进行检测,比较不同染液浓度和染色时间的检测效果,并用该方法检测和比较超低温冷冻保存对线粒体活性的影响。结果显示:Rh123和PI染色的最适染液浓度均为10μg/mL,染色时间控制在10 min之内;染色后具有线粒体活性的精子发出绿色荧光,死精子发出红色荧光,质膜受损但线粒体还未受损的精子发出红绿色荧光,表明Rh123和PI双荧光染色检测栉江珧精子线粒体活性是可行的;精液经冷冻后,线粒体活性为61.9%、质膜完整率56.8%,显著低于新鲜精液组(95.3%、93.5%),表明冷冻对精子结构会造成不同程度的损伤,Rh123和PI双荧光染色法可用来检测栉江珧精子质量。

AO/PI荧光染色法快速检测啤酒酵母细胞死亡率

(AO/PI)双重荧光染色多用于医学、药理学、病毒学等专业领域,用于检测细胞活性及形态变化。该研究采用吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)荧光染色原理建立酵母死亡率的快速检测方法,并进行准确性及精密度验证。结果表明:基于AO/PI荧光染色原理的自动计数仪法,在酵母死亡率检测准确性方面与理论死亡率R²为0.9885,具有良好的线性关系;同时标准差为0.122,相对偏差为2.50%,检测结果的精密度优于显微镜计数法;检测时间较传统方法节约了60%以上,效率大大提高。

番茄的CPD带型和45S rDNA位点的鉴别(英文)

采用CPD(PI和DAPI组合)染色对番茄减数分裂粗线期和有丝分裂中期染色体进行了显带分析,随后用两种不同的45SrDNA克隆在相同的分裂相进行了荧光原位杂交定位分析。CPD染色在8条粗线期染色体上显示出了10条红色的CPD带纹,在6对有丝分裂中期染色体上显示出了12条CPD带纹。有丝分裂中期染色体上的CPD带纹与粗线期染色体上显著的带纹具有对应性。用改良的CPD染色程序清晰而稳定地显示出这些特征性的CPD带纹为番茄的染色体,特别是有丝分裂中期染色体提供了新的识别标记。用番茄的一个45S rDNA克隆进行的荧光原位杂交,不仅在位于2号染色体短臂的随体上显示了强的杂交信号,而且在粗线期染色体的5个CPD带区或有丝分裂中期染色体的4对CPD带区显示了弱的杂交信号。然而,用来自小麦的45S rDNA克隆pTa71进行的原位杂交却只在随体上显示了杂交信号。鉴于所用的两个45S rDNA克隆在序列上的差异,推断在番茄基因组中只有随体含有45S rDNA单位的编码区,即番茄只有一对45S rDNA位点。

没食子软膏对二硝基氯苯致大鼠湿疹的保护作用及机制研究

目的:分析没食子软膏治疗大鼠湿疹可能的作用机制。方法:选取健康SD大鼠60只,按随机数字表法分为正常组、模型组、阳性组(地塞米松)、没食子软膏低剂量组、没食子软膏中剂量组、没食子软膏高剂量组,除正常组外,其余组均利用7%二硝基氯苯丙酮溶液涂抹背颈部皮肤构建湿疹大鼠模型,模型建立成功后各组连续给予相应药物14 d,取样。试剂盒检测大鼠血液学;苏木精-伊红(HE)染色观察湿疹大鼠病灶处皮肤组织的病理改变;免疫组织化学法测定皮肤中白细胞介素-4受体α、白细胞介素-5、JAK1、p-信号转导及转录激活因子6蛋白表达水平;荧光定量PCR(qRT-PCR)测定皮肤中PI3K、AKT基因表达水平。结果:没食子软膏低剂量组、没食子软膏高剂量组可以显著降低湿疹大鼠血液中单核细胞百分比,没食子软膏中剂量组、没食子软膏高剂量组可以显著降低湿疹大鼠血液中嗜酸性粒细胞百分比;没食子软膏可以显著改善湿疹大鼠的皮肤病理特征,下调皮肤中白细胞介素-4受体α、白细胞介素-5、JAK1、p-STAT6蛋白表达水平,PI3K、AKT基因表达水平。讨论:没食子软膏能够起到治疗湿疹大鼠的作用,其机制可能与影响JAK1/STAT6/PI3K/AKT信号通路有关。