Flt3L刺激体外培养小鼠骨髓源CD8α^+树突状细胞及其成熟状态分析

目的建立体外快速制备大量具有免疫活性的小鼠骨髓来源不成熟CD8α+DCs方法。方法实验分2组。Flt3L组:将小鼠骨髓前体细胞用含终浓度为100ng/ml Flt3L的BMDC培养基混悬后接种于细胞培养皿中,每平皿10ml,37℃培养至第7d收集细胞;GM-CSF+IL-4组:将骨髓前体细胞用含终浓度为20ng/ml GM-CSF、5ng/ml IL-4的BMDC培养基混悬后接种于细胞培养皿中,每平皿10ml,分别于37℃培养第3d和第5d半量换液,培养第7d收集细胞,采用磁选法分离CD11c+BMDCs,用流式细胞仪检测。结果 Flt3L刺激组CD11c+BMDCs得率为(95.07±0.09)%,GM-CSF+IL-4刺激组为(83.97±0.43)%,差异有统计学意义(P<0.01)。Flt3L刺激组CD11c+CD8α+BMDCs得率为(9.83±0.33)%,GM-CSF+IL-4刺激组刺激组为(4.06±0.17)%,差异有统计学意义(P<0.01)。Flt3L刺激组CD11c+CD8α+BMDCs表面几乎不表达CD40、CD80、CD86,仅低表达MHCI、MHCII,处于未成熟阶段。结论采用Flt3L刺激小鼠骨髓前体细胞的方法可获得大量未成熟的CD11c+CD8α+BMDCs,方法简单,得率较高,为开展CD8α+DCs相关基础和临床研究奠定了基础。