西罗莫司产生菌——吸水链霉菌的FK506结合蛋白

目的 分离吸水链霉菌菌体蛋白质 ,探讨西罗莫司产生菌—吸水链霉菌的 FK5 0 6结合蛋白 (FKBPs)。方法 制备西罗莫司产生菌—吸水链霉菌菌体蛋白 ,分离蛋白质并进行 PPIase酶活性测定。 结果 获得吸水链霉菌的蛋白谱型 ,其中 2 5 k D蛋白质及 15 .5 k D蛋白质具有 PPIase活性 ,初步认定相当于 FKBP2 5及 FKBP12。 结论 西罗莫司产生菌—吸水链霉菌中存在二种 FKBPs,即 FKBP2 5和 FKBP12 ,与前人报告不合。

西罗莫司高产菌株与野生菌株中FKBP25的初步比较

目的 对比西罗莫司高产突变菌株———吸水链霉菌R2 7、R388、R4 4 1和野生菌株———吸水链霉菌ATCC 36 7817的蛋白质电泳图谱及FKBP2 5含量的差异 ,探讨FKBP2 5与西罗莫司产量的可能关系。方法 制备、分离高产突变株与野生菌株的菌体蛋白质并进行PPIase活性测定 ,比较 3株西罗莫司高产突变株与野生菌株的蛋白质电泳图谱及PPI ase酶活性。结果 西罗莫司低产的野生菌株的FKBP2 5含量比西罗莫司高产突变菌株高。结论 初步认为在吸水链霉菌中西罗莫司的产量与FKBP2

阿尔茨海默病患者血清中Apelin13和FKBP5的表达水平及临床意义

目的探究阿尔茨海默病(AD)患者血清中Apelin13和FK506结合蛋白51(FKBP5)的表达水平及意义。方法选取93例AD患者(AD组),同时选取同年龄层体检的90例健康者(对照组)。比较2组血清Apelin13、FKBP5 mRNA水平差异。Pearson相关分析Apelin13、FKBP5 mRNA与简易精神状态量表(MMSE)评分的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估Apelin13、FKBP5 mRNA对AD患者重度认知功能障碍的诊断价值。结果AD组患者MMSE评分、血清Apelin13水平较对照组降低,而FKBP5 mRNA水平较对照组升高(均P<0.01)。轻、中及重度组AD患者血清中Apelin13水平依次降低,而FKBP5 mRNA水平依次升高(均P<0.05)。二元Logistic回归分析显示,较高的MMSE评分、Apelin13是AD发生的保护因素,而较高的FKBP5 mRNA是AD发生的危险因素(均P<0.05)。AD患者MMSE评分与血清FKBP5 mRNA水平呈负相关,而与Apelin13水平呈正相关(均P<0.05)。ROC曲线显示,Apelin13联合FKBP5 mRNA诊断重度认知功能障碍的曲线下面积(AUC)及95%CI[0.884(0.808~0.961)]明显高于单一Apelin13[0.776(0.673~0.879)]或FKBP5 mRNA[0.801(0.699~0.902)],其敏感度和特异度分别为81.25%和86.89%(均P<0.05)。结论AD患者血清中Apelin13水平降低,而FKBP5 mRNA水平升高,Apelin13联合FKBP5 mRNA对AD患者重度认知功能障碍具有良好的诊断效能。

AMOTL2与FKBP51表达水平与胶质母细胞瘤病人预后的关系

目的探讨胶质母细胞瘤(GBM)类血管动蛋白-2(AMOTL2)与FK506结合蛋白51(FKBP51)表达变化及临床意义。方法收集2016年6月~2019年6月手术切除的GBM标本92例,以取同期颅脑损伤内减压术切除的非肿瘤脑组织48例为对照。采用免疫组化染色法检测AMOTL2、FKBP51表达。GBM病人术后随访2年,记录无进展生存期和总生存期。结果GBM组织AMOTL2低表达率、FKBP51高表达率均明显高于对照组(P<0.05)。GBM组织AMOTL2表达水平与P53、EGFR呈明显负相关(P<0.05),FKBP51表达水平与P53、EGFR呈明显正相关(P<0.05)。Cox比例回归风险模型分析显示,AMOTL2低表达、FKBP51高表达是GBM生存预后不良的独立危险因素(P<0.05)。生存曲线分析显示,AMOTL2高表达组病人无进展生存期、总生存期较低表达组均明显延长(P<0.05),FKBP51高表达组无进展生存期、总生存期较低表达组均明显缩短(P<0.05)。结论GBM组织AMOTL2呈低表达,而FKBP51呈高表达,二者均与P53、EGFR表达相关,与病人预后密切相关。

FK506对大鼠脊髓损伤后轴突导向因子slit－2表达的影响

目的探讨大鼠脊髓损伤后FKS06对轴突导向因子slit－2表达的影响。方法75只成年sD大鼠按随机数字表法分为假手术组、损伤组和FKS06治疗组，用Allen法建立大鼠脊髓损伤模型，分别于损伤后1，3，7，14和28d取损伤脊髓组织，用RT—PCR和免疫组化法检测slit－2的表达水平。结果slit－2表达随时间而变化。大鼠脊髓损伤后1d即可检测到slit－2的表达，伤后7 d slit－2表达量最高，之后呈逐渐下降，且实验组表达量治疗组高于损伤组（P〈0．05）。结论FKS06对脊髓损伤后slit－2的表达具有明显的促进作用，可能对再生轴突的导向性生长发挥重要作用。

他克莫司对犬急性脊髓损伤神经保护作用的实验研究

目的探讨他克莫司(FK506)对犬急性脊髓损伤的神经保护作用。方法采用Allen′s法制成犬急性脊髓损伤实验模型。动物随机分为:A组(n=8),经动脉插管注入生理盐水;B组(n=8),FK5060.18mg/kg;C组(n=8),FK5060.3mg/kg。B组、C组均在致伤后2h经动脉插管单次给药。致伤后行脊髓MRI影像学检查、脊髓功能评分、脊髓组织病理观察、神经丝蛋白(NF200)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的免疫组织化学分析。结果脊髓功能评分C组优于A组(P<0.05);B组优于A组,但无统计学差异;MRI显示:脊髓损伤后C组病变范围小,恢复快,B组次之,A组最差。C组NF和GFAP表达高于A组(P<0.05),B组与A组无统计学差异。结论局部应用FK506(0.3mg/kg)对急性脊髓损伤具有神经保护作用,可减轻继发损伤,加快脊髓功能的恢复;局部应用FK506对急性脊髓损伤治疗有一定的剂量-效应依赖关系。

重组腺病毒Ad5/F35-HF2S在白血病K562细胞的定位及与Bcr-Abl的相互作用

目的:研究重组腺病毒载体Ad5/F35-HF2S在慢性粒细胞白血病K562细胞中的定位及与融合蛋白BcrAbl的相互作用。方法:将Ad5/F35-HF2S腺病毒载体感染K562细胞,然后RT-PCR和蛋白质印迹法鉴定其表达情况,采用免疫荧光和蛋白质印迹法鉴定融合蛋白HF2S在K562细胞中的定位,免疫荧光法检测HF2S与Bcr-Abl在细胞质中的共定位情况,免疫共沉淀技术验证二者之间是否存在相互作用。结果:重组腺病毒Ad5/F35-HF2S能高效感染白血病K562细胞,并进行了正确表达。重组蛋白HF2S与Bcr-Abl共定位于细胞质,并能相互结合。结论:在K562细胞质中成功表达能与Bcr-Abl相互作用的HF2S蛋白,为后续靶向转运Bcr-Abl入核并治疗慢性粒细胞白血病奠定了基础。