以FK506结合蛋白52为靶点的高通量药物筛选模型的建立及应用

目的发现新的FKBP52抑制剂类药物,建立以人FKBP52为靶点的高通量药物筛选模型。方法通过大肠埃希菌表达系统重组表达FKBP52蛋白,并进行纯化。基于FKBP52的肽基-脯氨酰顺反异构酶(peptidyl-prolyl cis-trans isomerase,PPIase)的活性特性,建立FKBP52高通量药物筛选体系。对本公司化合物库中的31558个放线菌及真菌次级代谢产物粗提物进行筛选。结果成功构建重组表达菌株BL21(rosetta)/pET-30a/FKBP52。纯化后的重组表达人FKBP52蛋白纯度大于90%,并具有很好的PPIase活性。阳性药FK506能剂量依赖地抑制FKBP52活性,IC50为12.035ng/m L。筛选得到121个抑制率大于80%的样品,其中11株放线菌的次级代谢产物中含FK506,6株放线菌的次级代谢产物中含FK520,7株放线菌的次级代谢产物中含雷帕霉素。对随机抽取的100块96孔板筛选数据进行统计,模型的信号/本底比平均值为2.35±0.26,Z'因子平均值为0.78±0.1。结论本研究成功建立了人FKBP52抑制剂高通量药物筛选模型,该方法具有快捷、灵敏度高、稳定性好的特点,不仅可以快速进行新FKBP52抑制剂的筛选,还可以实现对FKBP52已知抑制剂如FK506、FK520和雷帕霉素等产生菌的定向筛选。

中国黑龙江地区汉族人群FK506结合蛋白5基因多态性与精神分裂症的关联研究

目的:探讨中国黑龙江地区汉族人群FK506结合蛋白5(FKBP5)基因多态性与精神分裂症的关系。方法:采用SNaPshot测序法检测和分析49例汉族精神分裂症患者(患者组)和49名汉族健康对照者(对照组)的FKBP5基因rs3800373、rs1360780、rs9296158和rs9470080位点基因型和等位基因频率。结果:FKBP5 rs3800373位点基因型频率两组间差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析显示,FKBP5基因rs3800373位点TT基因型携带者精神分裂症发生风险明显高于GT基因型携带者(95%CI:0.117~0.756,P=0.01)。结论:FKBP5基因rs3800373位点基因多态性可能与中国黑龙江地区汉族人群精神分裂症发病风险有关。

FK506结合蛋白52的结构、生物学功能及其与女性生殖系统疾病关系的研究进展

FKBP52属于FK506结合蛋白(FKBPS)家族,该家族具有保守的肽基脯氨酰基顺反异构酶PPIase)域为特征。在FKBP52三个主要结构区中FK1区的FK506结合位点具有可调控靶蛋白的PPIse活性,而TRP区可为Hsp90提供结合位点,FK2区未发现功能。单个的FKBP52分子只能稳定的结合单个的甾体激素受体。FKBP52与甾体激素受体伴侣复合物联合,特别增强了雄性激素受体(AR)、孕激素受体(PR)和糖皮质激素受体(GR)的活性,是一种已知的AR、GR和PR活性调节剂。由于FKBP52对于甾体激素受体信号通路的调节作用,其与妊娠相关性疾病、子宫内膜异位症、乳腺癌的发生发展有关。

FK506结合蛋白51(FKBP51)的研究进展

FK506结合蛋白51(FKBP51)是一种具有多种结构域,多种生物学功能的免疫大分子,在机体免疫、类固醇激素的调节、癌症的发生和治疗以及抑郁症中发挥着重要作用,同时在畜禽研究中发现该基因是免疫性状的重要候选基因。文章对FKBP51基因的结构、分布及功能等方面进行了综述。

FK506结合蛋白52在先兆流产患者外周血中的水平及对Th1/Th2影响的研究

目的:探讨FK506结合蛋白52(FKBP52)在先兆流产患者外周血清中的表达及对Th1/Th2的影响。方法:将60例先兆流产患者随机数字表法随机分为Ⅰ组和Ⅱ组各30例。Ⅰ组每天交替肌内注射绒毛膜促性腺激素2000 U与黄体酮20 mg,持续10 d;Ⅱ组肌内注射黄体酮20 mg,1次/d,持续2周。选择60例正常健康早孕妇女作为对照组,检测外周血FKBP52、IFN-γ和IL-4水平,并进行相关性分析。结果:Ⅰ、Ⅱ组FKBP52、IL-4水平低于对照组,Ⅰ、Ⅱ组IFN-γ水平高于对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ组FKBP52、IFN-γ和IL-4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅰ、Ⅱ组治疗后FKBP52、IL-4水平均较治疗前升高,且I组升高幅度大于Ⅱ组,比较差异有统计学意义(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ组治疗后IFN-γ水平均较治疗前降低,且Ⅰ组降低幅度大于Ⅱ组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前:FKBP52和IFN-γ水平呈负相关(r=-0.516,P=0.000),FKBP52和IL-4水平呈正相关(r=0.602,P=0.000)。治疗后:FKBP52和IFN-γ水平呈负相关(r=-0.564,P=0.000),FKBP52和IL-4水平呈正相关(r=0.618,P=0.000)。结论:先兆流产患者外周血中FKBP52的表达下调,FKBP52的表达下调可促进Th1/Th2平衡向Th1转移;黄体酮联合绒毛膜促性腺激素治疗可以提高先兆流产患者外周血中FKBP52的水平,并促进Th1/Th2平衡向Th2转移。

FK506结合蛋白51在脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义

目的 探讨FK506结合蛋白51（FKBP51）在脑胶质细胞瘤组织中的表达及其临床意义。方法 选取本院2013年1月～2015年1月的223例脑胶质瘤患者作为研究对象,选取同期来自于颅脑损伤手术患者的23例正常脑组织进行对照研究。采用免疫组织化学法检测FKBP51的表达水平,分析其表达水平与脑胶质瘤病理组织类型和病理分级的关系。结果 脑胶质瘤的FKBP51阳性率显著高于正常脑组织,差异有统计学意义（P〈0.05）。不同病理类型脑胶质瘤组织的FKBP51阳性率比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。恶性的胶质母细胞瘤FKBP51的表达水平显著高于良性的星形细胞瘤,差异有统计学意义（P〈0.05）。FKBP51的表达水平与脑胶质瘤分级呈正相关（r=0.30,P〈0.05）。结论 FKBP51表达与脑胶质瘤的病理类型和临床病理分级具有相关性,有可能作为脑胶质瘤标志物用于临床病理特征分析和预后判断。

对硝基苯酚降解产物与FK506结合蛋白相互作用分子机制

对硝基苯酚(p-nitrophenol,p-NP)作为典型内分泌干扰物,其环境污染与人体健康问题一直是环境领域的研究热点.环境中对硝基苯酚降解产物(p-NP degradation products,p-NP-DPs)与FK506结合蛋白(FK506 binding protein,FKBP5)结合形成p-NP-DPs-FKBP5加合物是p-NP-DPs产生雌激素和抗雄激素活性的主要机制.然而,p-NP-DPs与FKBP5相互作用的分子水平机制尚未引起足够的重视.本文采用分子对接技术模拟计算p-NP-DPs与FKBP5相互作用的结合能和结合面积.结果表明,p-NP-DPs与FKBP5相互作用结合面积顺序为213Å^(2)(4-硝基邻苯二酚)>200Å^(2)(p-NP)>184Å^(2)(邻苯二酚)>175Å^(2)(对苯二酚)>173Å^(2)(苯酚)>171Å^(2)(对苯醌),结合能顺序为−3.69 kcal·mol^(−1)(4-硝基邻苯二酚)>−3.76 kcal·mol^(−1)(p-NP)>−3.81 kcal·mol^(−1)(对苯二酚/邻苯二酚)>−3.83 kcal·mol^(−1)(对苯醌)>−3.91 kcal·mol^(−1)(苯酚),高频氨基酸残基为Pro221、Gly224、Glu227、Ala228、Gly282、Lys283、Tyr284、Met285和Gln286,p-NP-DPs药效团主要包括氢键供体(—OH)、氢键受体(—NO_(2)和C=O)、芳香中心(苯环)和疏水中心(C原子).p-NP-DPs理化性质对p-NP-DPs与FKBP5相互作用强度的影响主要取决于分子量和拓扑极表面积(100%)、氢键受体数量(75%)、密度(50%)和闪点(25%).本研究对认识水环境中p-NP-DPs分子水平健康效应和环境风险具有重要科学意义.

FK506结合蛋白样蛋白在疾病中的作用的研究进展

FK506结合蛋白样蛋白(FK506-binding protein like,FKBPL)是亲免素家族的一员,其功能十分广泛,可以调控类固醇受体的信号转导,抑制肿瘤干细胞及肿瘤细胞的生长,并且能够作为肿瘤预后的生物学标志物。最新研究发现,它的N端区域存在抗血管生成结构域,可在体内和体外发挥抗血管生成作用。此外,FKBPL还与炎症、眼部疾病、心理疾病等诸多问题相关。文章主要从FKBPL的结构和功能出发,对FKBPL的功能研究进展进行综述,并探讨其在临床应用中的前景。

FK506结合蛋白5基因多态性与重性抑郁障碍的关联研究

目的 探讨FK506结合蛋白5（FK506-binding proteins 5,FKBP5）基因rs1360780多态性与中国汉族人群重性抑郁障碍（major depressive disorder,MDD）之间的关联.方法 以250例MDD患者及300例健康对照作为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）对FKBP5基因rs 1360780进行分型,比较研究组和对照组之间基因型和等位基因频率分布差异.并采用t检验、Hardy-Weinberg平衡检验及x2检验进行统计学分析.结果 （1）病例组FKBP5 rs1360780位点基因分布（CC、CT、TT基因型频率分别为59.6％、36.0％、4.4％,C、T等位基因频率分别为78.2％和21.8％）与对照组（CC、CT、TT基因型频率分别为59.0％、36.3％、4.7％,C、T等位基因频率分别为77.2％和22.8％）相比,均差异无统计学意义（P=0.983;P=0.682）;（2）在男性中,病例组FKBP5 rs1360780位点基因分布（CC、CT、TT基因型频率分别为60.3％、33.8％、5.9％,C、T等位基因频率分别为77.2％和22.8％）与对照组（CC、CT、TT基因型频率分别为78.6％、19.0％、2.4％,C、T等位基因频率分别为88.1％和11.9％）相比,均差异有统计学意义（P=0.046;P=0.012）,男性中携带T等位基因的人群患MDD的危险度是携带C等位基因的2.185倍（OR=2.185,95％ CI=1.181～4.042）.（3） FKBP5基因rs 1360780位点多态性可能与MDD患者的HAMD总分,迟滞、睡眠、Maier、焦虑/躯体化以及核心因子分均无显著关联（P＞0.05）.结论 FKBP5基因rs1360780位点多态性可能与中国男性汉族人群MDD发病相关,且携带T可能增加男性患MDD的危险性.

复发性流产病人绒毛组织中FK506结合蛋白52的表达及意义

目的探讨复发性流产(RSA)病人及正常早孕妇女绒毛组织中FK506结合蛋白52(FKBP52)基因和蛋白的表达。方法选取2012年2月至2013年6月广西医科大学第一附属医院妇产科门诊就诊的30例RSA妊娠妇女(复发性流产组)及同期正常早孕妇女30例(对照组),收集其新鲜绒毛组织,分别应用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学方法检测两组绒毛组织中FKBP52基因和蛋白的表达。结果 FKBP52在两组妇女的绒毛组织中均有表达,但与对照组相比,复发性流产组凝胶成像系统半定量分析FKBP52 m RNA(1.484±0.198对1.109±0.292,P<0.05)及蛋白表达(91.8±5.3对68.2±8.4,P<0.01)均明显降低。结论 FKBP52的表达可能在胚胎着床和早期妊娠的维持中起重要作用,其表达降低可能与RSA的发病密切相关。

FK506结合蛋白5对人前列腺癌LNCaP细胞株及裸鼠移植瘤的影响

目的观察抑制FK506结合蛋白5（FKBP5）基因表达对前列腺癌LNCaP细胞株及裸鼠移植肿瘤生长的影响。方法利用特异性针对FKBP5的短发夹RNA（shRNA）和FKBP5抑制剂他克莫司（FK506）处理前列腺癌LNCaP细胞，然后用噻唑蓝比色法（MTr）检测细胞生长情况，并通过Westernblot检测FK506处理过的LNCaP细胞中凋亡相关蛋白的变化；另外构建LNCaP细胞裸鼠皮下移植瘤模型，并用FK506给裸鼠灌胃，对比实验组及对照组皮下肿瘤生长情况。结果利用shRNA抑制LNCaP细胞中FKBP5的表达后，实验组细胞的增殖活性明显低于对照组。MTF法检测实验组的吸光度（A）值为0．359±0．021，而对照组为0．631±0．025（P〈0．05）。此外，FK506对细胞生长的抑制作用具有浓度依赖性，MTY法检测实验组（0．1、1．0、10．0μmol／L）A值分别为1．309±0．209、0．875±0．142、0．390±0．046，对照组为1．403±0．103（P〈0．05）。Westernblot检测天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）表达量亦随之增加；此外，利用FKS06抑制体内FKBP5的表达后，小鼠肿瘤生长受到明显抑制。非去势组中，处理组小鼠肿瘤体积为（123．53±6．56）mm3明显小于对照组[（220．88±6．44）mm2，P〈0．05]；去势组中，处理组小鼠肿瘤体积为（103．71±7．17）mm2，而对照组为[（194．07±4．93）mm2，P〈0．05]。结论FKBP5对于前列腺癌的生长起着重要作用。

脑缺血再灌注损伤中 FK506结合蛋白51对半胱氨酸蛋白酶－3及大鼠海马 CA1区神经元坏死的影响

目的：探讨脑缺血再灌注损伤中FK506结合蛋白51（FKBP51）对半胱氨酸蛋白酶－3（Caspase－3）及大鼠海马CA1区神经元坏死的影响。方法将清洁级SD大鼠随机分成假手术组（ Sham组）、缺血再灌注组（ I／R组）、溶剂对照组（ TE组）、FKBP51反义寡核苷酸组（ FKBP51 ASODN组）和FKBP51错义寡核苷酸组（ FKBP51 MSODN组），采用四血管阻塞模型大鼠全脑缺血模型造模。应用免疫印迹法测定FKBP51蛋白表达、FKBP51 ASODN对FKBP51蛋白水平的表达和Caspase－3活性的影响；采用苏木精－伊红溶液染色法测定FKBP51 ASODN对大鼠海马CA1区神经元坏死的影响。结果（1）在Sham组和I／R组（缺血再灌注0 min、15 min、30 min、1 h、3 h、6 h、1 d、3 d）中，FKBP51蛋白均有表达，并且表达量间的差异无统计学意义（F＝0．64，P＞0．05）。（2）FKBP51 ASODN组的FKBP51蛋白表达量明显减少，与Sham组差异有统计学意义（t＝8．21，P＜0．05）。（3）Sham组活化Caspase－3的表达量明显低于其他各组，差异有统计学意义（F＝12．31，P＜0．05）；与FKBP51 MSODN组比较，FKBP51 ASODN组的表达量相对较低，差异有统计学意义（ t＝9．71，P＜0．05）。（4）Sham组海马CA1区锥体细胞数量多[（186．3±2．5）个]并且排列密集，核大且圆，核仁明显；I／R 5 d组[（15．4±2．6）个]、TE组[（18．5±2．2）个]和FKBP51 MSODN组[（17．5±1．8）个]海马CA1区锥体细胞几乎完全消失，仅残留少数细胞，大量变性锥体细胞核固缩深染，胞浆嗜伊红，胞膜破裂，胞内容物释放， Sham组与其余各组之间的差异有统计学意义（χ^2＝81．91，P＜0．05）；FKBP51 ASODN组[（92．8±2．6）个]海马CA1区锥体细胞存活数增加，与其余各组的差异有统计学意义（χ^2＝52．36，P＜0．05）。结论在脑缺血再灌注损伤中，FKBP51可以增强活化的Caspase－3的表达并抑制神经元的存活。而FKBP51 ASODN可以有效地抑制FKBP51蛋白的表达，进而促进海马CA1区神经元的存活，这为研究脑缺血再灌注损伤提供了新的视野和新的思路。

FK506结合蛋白5基因rs1360780位点多态性对抑郁症患者脑静息态磁共振局部一致性的影响

目的探讨FK506结合蛋白5(FK506-binding protein 5,FKBP5)基因rs1360780位点T风险等位基因对抑郁症患者静息态脑功能的影响及与临床症状群、免疫功能的关联。方法纳入147例抑郁症患者及61例性别、年龄及受教育年限均匹配的正常对照,进行3.0 T静息态磁共振扫描、基因分型及外周血清免疫球蛋白和补体浓度测定。计算脑功能局部一致性(regional homogeneity,ReHo),采用双因素方差分析疾病主效应、基因多态性主效应、疾病与基因多态性交互效应下全脑ReHo的差异,并在方差分析的基础上进行事后检验分析抑郁症患者携带与不携带T风险等位基因个体的脑功能特征上的差异,将有差异的脑区与汉密尔顿17项量表总分、5项因子分及外周血清免疫球蛋白、补体进行Pearson相关分析。结果(1)疾病与基因多态性交互效应的脑区:左侧额下回岛盖部(MNI:x,y,z=-42,6,9;F=10.83)、右侧额下回岛盖部(MNI:x,y,z=30,6,33;F=15.05)、左侧内侧额上回(MNI:x,y,z=-9,54,0;F=9.17)、左侧苍白球(MNI:x,y,z=-12,6,-6;F=11.37)(Alphasim校正后P<0.05)。(2)事后分析比较,基因多态性为主效应下,抑郁症患者携带rs1360780 T风险等位基因较不携带者ReHo值升高的脑区为右侧额下回岛盖部(MNI:x,y,z=60,12,6;t=2.88);交互效应下,抑郁症患者携带rs1360780 T风险等位基因较不携带者ReHo值升高的脑区为右侧额下回岛盖部(MNI:x,y,z=30,6,33;t=2.96),ReHo下降的脑区为左侧额下回眶部(MNI:x,y,z=-21,9,-18;t=-3.21)(Alphasim校正后P<0.05)。(3)Pearson相关分析表明,携带rs1360780 T等位基因的抑郁症患者右侧额下回岛盖部脑区的ReHo值与焦虑躯体因子分呈正相关(r=0.421,P<0.001),与外周血清IgG浓度呈负相关(r=-0.528,P=0.0016),均通过Bonferroni校正。结论本研究发现携带FKBP5基因rs1360780位点T风险等位基因的抑郁症患者右侧额下回岛盖局部神经元协同性活动异常,这可能是焦虑躯体化症状群及免疫功能异常潜在的神经病理机制之一。

FK506结合蛋白52对人子宫内膜间质细胞增殖作用的影响

目的探讨FK506结合蛋白52(FKBP52)对人子宫内膜间质细胞(HESCs)增殖的影响,为薄型子宫内膜的治疗提供新的依据和靶点。方法分离并培养原代HESCs,分别感染过表达FKBP52的慢病毒和转染靶向沉默FKBP52的小干扰RNA(siRNA),CCK8法检测细胞增殖活性,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞分析法检测细胞周期的变化,Western blotting法检测FKBP52及细胞周期相关蛋白表达水平。结果过表达FKBP52后,子宫内膜间质细胞的增殖活性增强(P <0. 05),细胞克隆形成能力提高(P <0. 01),细胞周期进程加快(P <0. 01),细胞周期素依赖激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期素依赖激酶2(CDK2)及细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)的蛋白表达水平均升高(P <0. 05);干扰FKBP52后,子宫内膜间质细胞的增殖能力减弱(P <0. 05),细胞克隆形成能力降低(P <0. 05),细胞周期进程受阻滞(P <0. 05),CDK4、Cyclin D1、CDK2、Cy-clin E1的表达均被抑制(P <0. 05)。结论 FKBP52可通过促进HESCs的细胞周期进程来促进HESCs的增殖,有可能作为薄型子宫内膜治疗的靶点。

棉铃虫(Helicoverpa armigera)FK506结合蛋白基因的克隆、表达与纯化

为了深入了解FK506结合蛋白基因的作用和探索调控棉铃虫CYP6B6的表达机制,基于单酵母杂杂交结果采用RT-PCR的方法从棉铃虫的中肠cDNA中扩增得到了FK506结合蛋白基因,将测序正确的目的片段克隆至原核表达载体pET32a中,在大肠杆菌BL21中用异丙基-β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导表达,通过镍柱离子亲和层析纯化目的蛋白。用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达和纯化结果,并用Western blotting进行验证。结果表明,克隆得到的目的基因大小为327 bp,编码108个氨基酸残基,预测蛋白质分子量和等电点分别是11.78 kD和7.87。氨基酸序列分析表明该序列具有完整的开放阅读框,且没有信号肽。重组质粒pET32a-FKBP在大肠杆菌BL21中获得表达,主要以可溶性形式存在,经亲和层析柱纯化获得目的蛋白,Western blotting检测发现纯化的目的蛋白大小正确且纯度高。

核酸免疫制备鼠抗棉铃虫FK506结合蛋白的多克隆抗体

利用电注射基因导入法制备小鼠抗棉铃虫FK506结合蛋白(FKBP12)的多克隆抗体,并通过Western blot验证抗体与抗原的特异性结合。构建重组质粒pc DNA3-FKBP12并测序验证序列的正确性,利用基因导入法将重组质粒pc DNA3-FKBP12注射到小鼠体内,免疫4次后用ELISA检测法确定抗体的效价,并对抗体的特异性结合进行Western blot以及免疫组化检测。结果表明,小鼠抗FK506结合蛋白血清的效价达到1∶25 600,Western blot结果显示此抗血清能与融合蛋白His-FKBP12结合,免疫组化结果表明在棉铃虫3龄幼虫不同组织中FKBP12均有表达。说明电注射基因导入法制备的小鼠抗FK506结合蛋白的抗体在滴度和特异性结合方面都达到预期要求。

FK506结合蛋白5基因rs3800373多态性与抗抑郁治疗后皮质醇降低的关联研究

目的探讨在抑郁症治疗中,患者皮质醇水平的变化与FK506结合蛋白5(FKBP5)基因多态性的相关性。方法选取抑郁症患者106例,均接受足量足疗程抗抑郁药物(选择性5-羟色胺再摄取抑制药)的治疗。分别于治疗前及治疗6周后,收集汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17),并检测血清皮质醇水平,同时检测了FKBP5基因3个位点多态性。用配对t检验比较治疗前后以及不同停药率组间皮质醇水平的变化,使用单因素方差分析比较不同基因型患者皮质醇变化的差异。结果治疗前抑郁症患者HAMD-17评分为(26.35±3.28)分,治疗后的评分为(14.59±5.44)分,患者的HAMD-17评分显著下降(P<0.01)。治疗前患者的血清皮质醇浓度为(291.47±117.97)ng·mL^(-1),治疗后的血清皮质醇浓度为(229.99±130.67)ng·mL^(-1),血清皮质醇浓度显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。FKBP5的rs3800373多态性位点不同基因型皮质醇浓度变化的差异比较,GG型为(149.77±50.54)ng·mL^(-1),TT型为(101.53±83.16)ng·mL^(-1),差异有统计学意义(P<0.05)。FKBP5的rs3800373多态性位点的TT基因型携带者皮质醇水平下降最少。结论FKBP5基因rs3800373位点基因多态性与抑郁症治疗后皮质醇下降存在关联。

FK-506结合蛋白对钙释放通道的调控

细胞内自由钙作为一种重要的细胞信使广泛地参与细胞生理功能调控 .胞内钙库 (内质网系和肌浆网系 )对调节细胞内自由钙水平起着重要的作用 .钙库膜上的钙释放通道 (ryanodine受体和三磷酸肌醇受体 )受许多因素调控 ,其中之一就是新近研究得相当多的FK50 6结合蛋白 .免疫抑制剂FK50 6能特异地结合钙库上一种分子质量为 1 2ku左右的蛋白 ,这种FK50 6结合蛋白与钙释放通道形成一种紧密连接的复合体 ,在正常生理情况下对钙释放通道起着十分重要的调控作用 .

心脏移植后外周血FK506结合蛋白1A基因的表达

利用荧光差异显示PCR(DD PCR)技术检测心脏移植后外周血白细胞基因的表达。结果显示 :RPL2 3基因移植后有波动 ,排斥发生时表达增强 ;FK5 0 6结合蛋白 1A基因移植后表达较弱 ,排斥发生时明显增强。提示 :外周血DD PCR检测白细胞基因的表达可能对研究排斥反应机制及进行移植排斥反应诊断具有一定的意义。

FK506结合蛋白FKBP52对金龟子绿僵菌侵染东亚飞蝗的影响

为了明确东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis免疫相关FK506结合蛋白(FK506 binding protein,FKBP)的功能,本研究采用荧光定量PCR分析了FKBP52基因在成虫不同组织以及不同龄期中肠中的表达量;克隆并表达了FKBP52基因,纯化获得目的蛋白;测定了FKBP52蛋白对金龟子绿僵菌IMI330189侵染东亚飞蝗及东亚飞蝗体内保护酶酶活性的影响。研究结果发现FKBP52基因在成虫不同组织中均有表达,中肠中相对表达量最高;在不同龄期的中肠中,以卵期和成虫期的相对表达量较高。FKBP52基因全长1242 bp,编码蛋白分子量为46 kDa。生测及酶活力测定结果表明,金龟子绿僵菌IMI330189与FKBP52混合处理时,东亚飞蝗第10天累计死亡率显著提高到93.33%,东亚飞蝗体内的保护酶活力均显著降低。上述结果表明,FKBP52基因能够通过抑制东亚飞蝗体内保护酶活性,促进金龟子绿僵菌IMI330189的侵染。