FLNA在鼻咽癌发生中的作用及其可能的分子机制

目的:探讨细丝蛋白A(filamin A,FLNA)在鼻咽癌中的表达水平及其过表达对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞生物表型的影响。方法:收集2008年1月至2008年12月唐山市人民医院病理科活检取得并经病理证实的新鲜NPC组织标本63例及21例距其癌组织边缘2 cm以上且镜下未见癌浸润的正常鼻咽组织(对照组),采用免疫组织化学及Western blotting方法检测NPC组织及正常鼻咽组织中FLNA及MMP-9蛋白的表达。以慢病毒转染建立FLNA过量表达的NPC CNE2细胞株,采用RT-PCR及Western blotting检测转染后NPC CNE2细胞株中FLNA的表达变化;MTT法检测FLNA蛋白过量表达对NPC细胞增殖的影响,Transwell实验检测CNE2细胞的侵袭能力。结果:FLNA蛋白在NPC组织中的阳性表达率明显低于正常鼻咽组织(36.5%vs 66.7%,P<0.05),其在NPC组织的相对表达量较正常鼻咽组织的相对表达量明显降低[(0.378±0.031)vs(0.835±0.078),P<0.05],FLNA蛋白的表达水平与NPC T分期、有无淋巴结转移、临床分期以及组织分级有关(P<0.05)。FLNA蛋白高表达的CNE2细胞其增殖能力明显减弱、侵袭转移能力明显降低、MMP-9蛋白表达量明显下调。结论:NPC组织中FLNA蛋白表达明显降低可能是鼻咽黏膜恶性转变的重要生物学标志,对预测NPC发生、浸润、转移有重要意义。

同卵双胎FLNA基因半合子突变相关癫痫合并智力障碍临床及基因分析

目的探讨同卵双胎癫痫合并智力障碍患儿的临床特征和FLNA基因突变特点。方法回顾分析1对明确诊断的FLNA基因半合子突变相关癫痫合并智力障碍的同卵双胎患儿的临床资料及基因检测结果。以"FLNA"为检索词通过PubMed、单核苷酸多态性数据库、人类基因组突变数据库和在线人类孟德尔遗传数据库等对相关文献进行检索复习。结果同卵男性双胞胎,3岁3个月,因反复抽搐,伴运动、语言、认知发育落后就诊。神经元特异性烯醇化酶升高;视频脑电图提示癫痫波;颅脑磁共振示脑外间隙增宽。基因检测发现同卵双胞胎患儿存在FLNA基因半合子突变,c. 7568 G>A,p.Ser 2523 Asn,为错义变异,该变异的致病性尚未见文献报道。结论当临床表现为反复癫痫发作,伴不同程度智力障碍、脑发育不良时,FLNA基因检测有助于确诊。本研究扩展了FLNA致病基因突变谱。

FLNA基因突变导致新生儿耳-腭-指综合征1型1例报告

目的 探讨FLNA基因突变导致新生儿耳-腭-指综合征(OPDS)患儿的遗传学特征及临床特征,为临床诊治提供参考。方法 报告1例耳-腭-指综合征患儿的临床表现、实验室及影像学检查、基因突变检测,并进行相关文献复习。结果 患儿女,足月新生儿,生后发现腭裂(Ⅱ度),面容表现为眼距宽,下颌小,双足第2趾较长。基因检查提示患儿FLNA基因发现一处杂合变异:c.514C>G(p.L172V),家系验证结果显示其父母此位点无变异。结论 该例患儿诊断为耳-腭-指综合征明确,出现明显指趾异常及特征面容,通过总结临床及实验室检查特点,加强临床医生对本病的认识,以及探讨如何在新生儿期甚至在产前诊断中提高对本病的早期诊断准确率,同时随访该病患儿的远期预后情况。

1例罕见Melnick-Needles综合征患者基因变异分析

目的 研究1例Melnick-Needles综合征家系的致病基因并为该家系提供遗传咨询依据。方法 采集先证者即1例不明原因骨骼发育异常、身材矮小的青年女性患者及其父母外周血标本,提取基因组DNA,采用家系全外显子组测序(Trio-WES)筛查先证者致病基因及突变位点,并通过Sanger测序进行验证。结果 先证者位于X染色体上的FLNA基因有一杂合变异位点:NM_001110556.2:c.3562G>A(p.A1188T),父母均为野生型。根据ACMG指南,提示FLNA基因的c.3562G>A突变为1个致病突变位点,与X连锁显性遗传疾病Melnick-Needles综合征相关。国内未见该致病位点报道。结论 确诊1例罕见Melnick-Needles综合征,致病FLNA突变c.3562G>A在国内为首次报道,为患者及家属遗传咨询提供了依据。

FLNA基因变异所致Melnick-Needles综合征胎儿1例的临床特征及遗传学分析

目的探讨1例Melnick-Needles综合征(MNS)胎儿的临床及遗传学特征。方法选取2020年11月至宁波市妇女儿童医院确诊的1例MNS胎儿为研究对象。采集胎儿的临床资料,应用家系全外显子组测序(trio-WES)对胎儿及其父母进行致病性变异筛选,对候选变异进行Sanger测序家系验证。结果产前超声提示胎儿偏小、双侧股骨弯曲、脐膨出、单脐动脉,合并羊水过少。Trio-WES发现其携带FLNA基因c.3562G>A(p.A1188T)半合子错义变异,Sanger测序验证为母源性,胎儿父亲该位点为野生型。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)相关指南,评估为可能致病性变异(PS4+PM2Supporting+PP3+PP4)。结论FLNA基因c.3562G>A(p.A1188T)半合子变异可能为该MNS胎儿的遗传学病因。基因诊断有助于MNS的精准诊断,可为家系遗传咨询和再生育提供依据。

耳腭指综合征1型一个家系的表型与基因变异分析

目的对1个耳腭指综合征1型(OPD1)家系的临床表型及基因变异特点进行分析,明确其致病原因。方法选取2020年12月3日就诊于中部战区总医院内分泌科的1个家系作为研究对象。分析先证者的临床表型及其遗传特点,应用全外显子组测序技术筛查先证者的基因变异,用Sanger测序法对先证者母亲、舅舅、大姨、二姨进行家系验证,并对变异进行致病性分析。结果先证者为16岁男性,表现为眉弓轻度突出、眼裂下斜、宽眼距、塌鼻梁等特殊面容,双手拇指末端增粗,双足大趾短趾畸形,合并中枢性尿崩症。基因测序发现先证者携带FLNA基因(NM_001110556.2)c.586C>T(p.R196W)半合错义变异,其母亲、舅舅均携带相同变异。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)相关指南,判定该变异为可能致病性(PM1+PM2_Supporting+PP2+PP3+PS4 Supporting)。结论FLNA基因c.586C>T(p.R196W)杂合变异可能是该OPD1家系的遗传学病因。先证者的中枢性尿崩症是OPD 1型新发现的表型。上述结果为充分认识OPD 1型的临床表现及致病机制提供了重要的信息。

FLNA在肝癌中的表达及其对细胞增殖、侵袭转移的作用

[目的]探讨细丝蛋白A(FLNA)在肝癌组织中的表达及过表达对肝癌细胞生物表型的影响。[方法]采用免疫组织化学方法、Western Blot检测75例肝癌组织及距其癌组织边缘2cm以上的镜下未见癌浸润的37例正常肝脏组织中FLNA的表达情况。采用慢病毒转染建立FLNA过量表达的肝癌HepG2细胞株。荧光定量PCR及Western Blot检测FLNA转染后肝癌HepG2细胞株中FLNA表达含量的变化。MTT法、Transwell检测FLNA过量表达对肝癌细胞增殖及细胞侵袭转移的影响。[结果]免疫组织化学结果表明,FLNA蛋白在肝癌组织及正常肝脏组织中的表达阳性率分别为37.3%、89.2%,差异有统计学意义(P<0.05)。Western Blot结果表明,FLNA蛋白在肝癌组织的相对表达量较正常肝脏组织明显降低,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。FLNA蛋白表达水平与肝癌有无淋巴结转移、临床分期以及组织学分级有关(P<0.05),而与患者年龄、性别、肝癌病理类型及T分期无关(P>0.05)。FLNA高表达的肝癌细胞其增殖能力明显减弱、侵袭转移能力降低,MMP-9蛋白的表达量明显下调。[结论]肝癌组织中FLNA蛋白表达明显下降,可能是正常肝脏组织恶性转变的重要生物学标志,对预测肝癌发生、浸润转移有重要意义。

FLNA基因变异致额骨干骺端发育不良1型一例

目的探讨FLNA基因变异所致额骨干骺端发育不良1型(frontometaphyseal dysplasia 1,FMD1)的临床及遗传学特点。方法分析患儿的临床表型,应用全外显子测序技术对先证者进行致病基因变异筛查,用Sanger测序法对其父母进行验证。结果先证者男性,2岁9个月,表现为特殊面容:眉弓轻度突出、眼睑下斜、眼距宽,骨骼畸形:双下肢弯曲、右膝外翻、左膝内翻、双手食指及中指轻度畸形、小指屈曲挛缩,左肘关节活动受限。基因测序发现患儿FLNA基因存在错义变异c.3527G>A,p.Gly1176Glu(半合子),父母均未携带该变异。结论FLNA基因变异引起的FMD1在婴幼儿时期即可出现关节挛缩、长骨发育不良,并随年龄增长进展,需要长期随访治疗。本例患儿FLNA基因变异位点尚未见文献报道。

FLNA基因突变导致的耳腭指综合征家系遗传学分析

目的 采用高通量测序技术探讨一个与FLNA基因突变相关的X连锁遗传的耳腭指综合征家系的遗传学原因。方法 三维B超显示胎儿“小脑发育不良、面部畸形、胸廓发育不良、四肢畸形”。应用全外显子组测序对夫妻双方及胎儿进行致病位点筛查,并对孕妇父母及孕妇弟弟、大女儿通过Sanger测序对突变位点进行验证。结果 全外显子组测序结果显示胎儿FLNA基因的35号内含子存在一个半合子突变c. 5686+4A> G,孕妇本人为杂合携带者并且为新发突变。先证者临床症状与FLNA基因突变相关的X连锁显性遗传的耳腭指综合征2型(OPD2)疾病表型相符。结论 FLNA:c. 5686+4A> G突变很可能为该OPD2家系患者的遗传学病因,该位点未被报道,新的突变位点丰富了FLNA基因突变谱。

FLNA基因新变异致结节状灰质异位并癫痫发作三例

目的报告3例脑室周围结节状异位并癫痫发作的病例进行基因变异分析,明确其可能的致病原因。方法分析3例表现为脑室周围结节状异位并癫痫发作的患者临床资料,对患者行全外显子测序(whole exome sequencing,WES)检测,对可疑变异位点进行Sanger测序及双亲验证。结果3例均以癫痫发作就诊的女性患者,头颅MRI见双侧侧脑室结节性灰质异位,全外显子测序示例1及其母亲(例2)FLNA基因存在c.2720del T(p.Leu907Argfs*39)杂合变异,根据美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异标准与指南判定为致病性变异(PVS1+PM2+PP1);例3的FLNA基因存在c.1387_1390del GTGC(p.Val463Profs*34)杂合变异,判定为可能致病变异(PVS1+PM2)。结论FLNA基因c.2720del T和c.1387_1390del GTGC变异可能为3例患者的遗传学病因。