急性髓系白血病FLT3基因突变研究

本研究探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因内部串联重复突变(ITD)及第二酪氨酸激酶结构域(TKD)点突变及其临床意义。采用基因组DNA-PCR方法检测131例初发AML患者骨髓单个核细胞FLT3基因外显子14、15中ITD突变,采用基因组DNA-PCR结合限制性内切酶酶切方法检测FLT3基因外显子20中TKD点突变。结果表明:131例初治AML患者中,21例(16.0%)FLT3-ITD突变阳性,3例(2.3%)FLT3-TKD点突变阳性,无同一患者同时发生两种突变。FLT3-ITD阳性组初诊时白细胞计数(WBC)及骨髓原始细胞比例高于野生型FLT3(FLT3-wt)组。FLT3-ITD阳性组患者完全缓解(CR)率47.6%,显著低于FLT3-wt88.1%(p<0.05)。20例M3患者中,FLT3-ITD阳性组及阴性组患者缓解率差异无统计学意义;非M3FLT3-ITD阳性组患者CR率为37.5(6/16例),显著低于非M3FLT3-wt组患者CR率90.6%(48/53例)(p<0.05)。阳性组患者完全缓解后14个月(2-20个月)内复发3例,复发率为50%(3/6),高于FLT3-wt组29.2%(14/48例)。由于FLT3-TKD阳性患者仅3例,未单独进行统计学分析。结论:FLT3基因突变是AML患者中常见的突变,FLT3-ITD突变较FLT3-TKD点突变发生率高,FLT3-ITD有突变的AML患者预后差;FLT3-TKD点突变对预后的影响不明显。临床上早期FLT3基因突变检测对AML患者今后的靶向治疗及了解临床预后有重要意义。

急性髓系白血病FLT3基因突变的研究

目的:检测初发AML患者FLT3基因突变,探讨其在AML疾病特征和预后评估中的意义。方法:应用聚合酶链反应(PCR)检测54例初发成人AML患者的骨髓标本FLT3基因突变。结果:54例初发成人AML患者中FLT3-ITD突变检出率为22.22%,发生FLT3-ITD基因阳性的AML患者中伴染色体正常核型10例(占83.3%),复杂异常核型2例(占16.7%)。FLT3-ITD基因突变阳性的AML患者的白细胞及骨髓白血病细胞比例显著高于未发生突变者(P<0.05),但在性别、年龄、诱导化疗第1疗程CR率、生存率等方面两组之间差异无统计学意义。2例出现FLT3-TKD基因突变的患者与FLT3-TKD阴性AML患者相比,在初诊时性别、年龄、白细胞计数、骨髓原始细胞比例以及第1疗程CR率差异均无统计学意义。结论:FLT3-ITD突变阳性在染色体正常核型AML患者中比例较高;FLT3-ITD突变的阳性组在外周血白细胞数量和骨髓原始细胞数量方面明显高于该突变阴性组患者。

微芯片电泳及毛细管电泳在筛查急性髓系白血病FLT3-ITD基因突变中的应用研究

本研究旨在比较微芯片电泳及毛细管电泳在急性髓系白血病(AML)FLT3-ITD基因突变检测中的可靠性。应用PCR-微芯片电泳和PCR-毛细管电泳法同时检测214例初治AML患者DNA样本FLT3-ITD基因突变,并通过直接测序法进行序列分析。PCR-微芯片电泳结果显示,FLT3-ITD突变阴性151例,阳性58例(58/214,27.1%),可疑阳性5例(5/214,2.3%);PCR-毛细管电泳结果显示,FLT3-ITD突变阴性147例,阳性67例(67/214,31.3%)。在毛细管电泳结果为阳性的67例样本中,其中4例微芯片电泳结果为阴性,5例为可疑阳性,用直接测序法进行检测,结果均为突变阳性。这一结果揭示,PCR-毛细管电泳法用于检测FLT3-ITD突变更为准确,虽然微芯片电泳组与毛细管电泳组FLT3-ITD突变检测阳性率并无显著差异(卡方检验,P>0.05)。结论:PCR-微芯片电泳与PCR-毛细管电泳均可作为简便的FLT3-ITD基因突变筛查方法,但作为新的检测手段,PCR-毛细管电泳法准确度与测序法一致、可用,而PCR-微芯片电泳法作为诊断检测的方法,其准确度有待于改进。

PCR-SSCP检测急性髓系白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变

目的研究急性髓系白血病(AML)患者DNA水平FLT3基因及其内部串联重复(ITD)突变。方法采用多聚酶链反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测43例不同免疫分型AML患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变。结果43例AML患者经PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳FLT3基因检测全部阳性,未发现FLT3/ITD基因突变;SSCP电泳FLT3基因检测全部阳性,43例AML患者中有15例(35%)出现FLT3/ITD基因突变。结论PCR-SSCP适用于检测急性髓系白血病FLT3/ITD基因突变分析。

PCR-SSCP分析急性淋巴细胞白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变及意义(英文)

目的研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者DNA水平FLT3基因及其内部串联重复(ITD)突变情况。方法采用多聚酶链反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测63例不同免疫分型ALL患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变。结果63例ALL患者经PCR扩增发现41例(65.1%)FLT3基因检测阳性,其中前前B细胞ALL、前B细胞ALL、成熟B细胞ALL及T细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率分别为93.3%(14/15),77.8%(14/18),41.7%(5/12)和28.6%(4/14);前前B细胞ALL和前B细胞患者ALLFLT3基因检测阳性率84.8%,显著高于成熟B细胞ALL(41.7%,P<0.005);B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率为73.3%,显著高于T细胞系ALL患者(28.6%,P<0.001)。63例ALL患者中仅有2例(3.2%)出现FLT3/ITD基因突变,均为伴有两种髓系抗原表达、免疫学检查诊断为急性混合细胞白血病患者,均伴有外周血高白细胞数、骨髓中高白血病细胞比例,预后较差。结论B细胞系ALL和T细胞系ALL患者DNA水平均可检测出FLT3基因,但B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率显著高于T细胞系ALL;B细胞系ALL中细胞分化越成熟则FLT3基因检测率阳性越低。ALL患者一般不出现FLT3/ITD基因突变,FLT3/ITD基因突变检测可能有助于急性白血病基因分型及预后判断。

急性淋巴细胞白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变的检测及临床意义

目的:研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者FLT3基因及其内部串联重复(ITD)突变情况。方法:采用多聚酶链反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测76例不同免疫分型ALL患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变。结果:76例ALL患者经PCR扩增发现46例(60.5%)FLT3基因检测阳性,其中前前B细胞ALL、前B细胞ALL、成熟B细胞ALL及T细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率分别为88.2%(15/17),73.9%(17/23),40.0%(6/15)和23.5%(4/17);前前B细胞ALL和前B细胞患者ALL FLT3基因检测阳性率80.0%,显著高于成熟B细胞ALL(40.0%)(P<0.01);B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率为69.1%,显著高于T细胞系ALL患者(23.5%)(P<0.01)。76例ALL患者中仅有2例(2.6%)出现FLT3/ITD基因突变,此2例均为伴有2种髓系抗原表达,免疫学检查诊断为急性混合细胞白血病患者,均伴有外周血高白细胞数、骨髓中高白血病细胞比例及预后较差。结论:B细胞系ALL和T细胞系ALL患者均可检测出FLT3基因,但B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率显著高于T细胞系ALL;B细胞系ALL中细胞分化越成熟则FLT3基因检测率阳性越低。ALL患者一般不出现FLT3/ITD基因突变,FLT3/ITD基因突变检测可能有助于急性白血病基因分型及预后判断。

FLT3基因在成人急性淋巴细胞白血病中突变的特征及临床意义

目的探讨成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者FLT3基因突变特征及其临床意义。方法选择2017年1月至2020年3月在郑州大学第一附属医院确诊的250例初治成人ALL患者,应用二代测序(NGS)技术检测FLT3基因并分析其突变率、突变类型、发生位点及患者临床特征,采用非参数检验分析FLT3突变组与无突变组临床特征的差异,Kaplan-Meier生存曲线及log-rank检验评估其临床预后。结果250例成人ALL患者中,11例发生FLT3突变,突变率为4.40%,包括2个内串联重复(ITD)突变、5个酪氨酸激酶结构域(TKD)突变(2个D835和Y842C、D839G、836_837del共3个非D835)、2个膜旁插入缺失突变(JM-InDel)(Y597delinsPY、598_600del)和3个膜旁点突变(JM-PM)(Y589H、F594I、V592A),部分存在与CREBBP/PAX5基因共突变;FLT3突变组与无突变组年龄、性别、白细胞计数(WBC)、血红蛋白(Hb)、血小板计数(PLT)、淋巴细胞绝对值(LYM)、乳酸脱氢酶(LDH)、骨髓及外周血原始细胞比率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);FLT3突变组与无突变组总生存期(OS)及无进展生存期(PFS)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。1例初始高白细胞的急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者化疗半疗程未缓解,加用索拉菲尼后持续缓解。结论本研究发现了2种FLT3的新基因突变位点及2种共突变基因,FLT3基因突变在成人ALL中不常见,与生存无显著相关,FLT3抑制剂可能对FLT3突变的难治ALL患者有利,需扩大样本量进一步明确FLT3基因突变对预后的影响。

Gilteritinib为基础的方案桥接异基因造血干细胞移植对复发难治伴FLT3-ITD突变急性髓系白血病患者的疗效及安全性研究

目的探讨Gilteritinib(Gilt)为基础的方案桥接异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)对伴FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因内部串联重复(ITD)突变的复发难治性急性髓系白血病(R/R AML)患者的安全性、有效性,以及移植后Gilt维持治疗对FLT3-ITD阳性R/R AML患者预后的影响。方法回顾性分析2019年8月至2023年1月苏州大学附属第一医院收治的26例伴FLT3-ITD突变的R/R AML患者。统计所有纳入患者的复合完全缓解(CRc)率、总生存(OS)期、无病生存(DFS)期和不良反应。结果26例FLT3-ITD突变阳性R/R AML患者中,男14例,女12例,中位年龄38(18~65)岁。难治18例,复发8例。用药第14~21天疗效:完全缓解(CR)率为26.9%(7/26),CR伴血液学不完全恢复(CRi)率为57.7%(15/26),部分缓解(PR)率为7.7%(2/26),CRc率为84.6%(22/26),微小残留病(MRD)转阴率为65.4%。所有患者12、24个月累计OS率分别为79.0%和72.0%。中位OS期未达到。中位随访时间为16.0个月。全部治疗有效患者12、24个月累计DFS率分别为78.0%和71.0%。中位DFS期未达到。接受allo-HSCT的患者中位OS期未达到,较未接受allo-HSCT的患者(3.3个月,95%CI 2.2~4.3个月)显著延长(P=0.005)。移植后是否应用Gilt维持治疗的患者中位OS期均未达到,且移植后维持治疗的患者OS明显优于移植后未进行维持治疗的患者(P=0.019)。本研究中FLT3-ITD基因突变清除率为38.5%,且FLT3-ITD基因突变转阴的患者中位OS期未达到,明显长于未转阴的患者(15.0个月)(P=0.018)。Gilt为基础的方案最常见的3级及以上血液学不良反应包括白细胞减少(76.9%)、中性粒细胞减少(76.9%)、中性粒细胞减少性发热(61.5%)、血小板减少(69.2%)和贫血(57.7%)。其中1例患者在移植后口服Gilt维持治疗时出现分化综合征,治疗后好转。结论Gilt为基础的方案桥接allo-HSCT治疗FLT3-ITD突变阳性R/R AML患者的CRc率较高,MRD转阴率也较高,起效迅速,有效延长患者生存期。此外,FLT3-ITD基因突变清除率较高,且桥接移植和移植后Gilt维持治疗明显改善患者生存。治疗过程中不良事件的监测和管理至关重要。

FLT3-ITD突变与附加染色体核型对急性早幼粒细胞白血病患者预后的影响

目的探讨FLT3-ITD突变与附加染色体核型对急性早幼粒细胞白血病(APL)患者预后的影响。方法回顾性分析2012年1月~2021年3月安徽医科大学第二附属医院新诊断为APL的患者112例,收集患者临床和实验室资料,根据危险度分层选择治疗方案,通过电话或查看门诊或住院病历来完成随访总生存(OS)。结果APL患者合并FLT3-ITD基因突变28例(25.0%),有附加染色体核型患者19例(16.9%),早期死亡(ED)9例(8.0%)。有无FLT3-ITD突变患者完全缓解率(CR)差异无统计学意义(P>0.05);ED及高危分层无明显相关性(P>0.05)。有无附加染色体核型患者CR率差异无统计学意义(P>0.05),与ED及高危分层无明显相关性(P>0.05)。中位随访68.5(0.1~108.0)月,总体生存率80.4%,有无高危FLT3-ITD突变的生存率差异无统计学意义(P>0.05)。有无附加染色体核型患者的生存率分别为78.9%、80.6%(P>0.05)。结论FLT3-ITD突变与附加染色体核型对APL患者长期生存没有影响。

DNMT3A、FLT3-ITD合并NPM1基因突变正常核型急性髓系白血病患者的临床特征及预后分析

目的分析DNMT3A、FLT3-ITD合并NPMl基因突变的正常核型急性髓系白血病（AML）患者的临床特征，探讨该类患者的预后。方法回顾性分析2005年12月至2014年6月就诊的109例正常核型AML患者的临床特征及预后。其中DNMT3A／FLT3-ITD／NPM1＋AML患者共25例，单独FLT3-ITD＋AML患者共32例，单独NPMl＋AML患者24例，单独DNMT3A＋AML患者28例。结果25例DNMT3A／FLT3-ITD／NPM1＋AML患者平均年龄46岁，伴有高白细胞（81．7×10^9／L）及较高的骨髓原始细胞（66．3％）。其中，17例选择大剂量化疗，8例行异基因造血干细胞移植，与DNMT3A＋、FLT3．ITD＋、NPM1＋AML组比较，差异均无统计学意义。25例DNMT3A／FLT3．ITD／NPMl＋患者的3年总生存率为17．65％，3年无病生存率为13．88％，与DNMT3A＋、FLT3．ITD＋,NPM1＋AML组差异均有统计学意义（P值分别为0．0499、0．0361、0．0134），3年无病生存率差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论DNMT3A、FLT3-ITD合并NPM1基因突变的正常AML患者往往合并高的外周血白细胞及骨髓原始细胞，预后较差。

NPM1与FLT3-ITD基因突变在急性髓系白血病的临床意义

目的探讨成人急性髓系白血病患者核仁磷酸蛋白1(NPM1)与FMS样酪氨酸激酶-3(FLT3)基因突变情况及临床意义。方法回顾性分析75例成人急性髓系白血病(AML)患者NPM1和FLT3-ITD基因突变情况,比较其结果。结果 NPM1,FLT3-ITD基因突变阳性率分别为20. 0%,10. 7%,NPM1和FLT3-ITD基因同时突变阳性率为5. 2%. NPM1突变阳性组初诊时血WBC、PLT、骨髓原始细胞比例较高,差异均有统计学意义,1疗程CR率最高。FLT3突变阳性组初诊时WBC明显升高,骨髓原始细胞比例高,1疗程CR率最低。NPM1和FLT3同时突变组WBC和骨髓原始幼稚细胞升高明显,差异有统计学意义。结论对于初诊AML患者检测NPM1和FLT3-ITD基因突变,有利于对疾病诊断、危险分层以及指导治疗。

初诊急性髓系白血病NPM1突变患者临床特征的研究

本研究探讨急性髓系白血病(AML)患者NPM1基因第12外显子突变的临床特点及其与FLT3-ITD和IDH1突变的相互关系。收集AML患者骨髓标本,收集患者的临床资料,按WHO标准诊断分型。抽提基因组DNA,采用PCR后测序方法检测NPM1突变。结果表明,对389例AML的标本检测发现,NPM1突变的发生率为14.1%(55/389);FLT3-ITD突变的发生率为14.7%(57/389),IDH1突变的发生率为6.4%(25/389)。在AML1-ETO、PML-RARA和CBF-MYH11融合基因的AML中没有发现NPM1突变,NPM1突变组FLT3-ITD和IDH1突变的发生率分别为29.1%和12.7%,显著高于NPM1未突变组的12.3%和5.4%。NPM突变易于发生在正常核型AML中,发生率为26.5%(35/132)。NPM1突变的AML具有发病年龄偏大、血小板数高、易于发生在AML-M5、CD34阳性比例低、易于与FLT3-ITD和IDH1突变伴发等临床特点。NPM1突变阴性组的1个疗程CR率为69.8%,NPM1突变阳性组的1个疗程CR率为72.2%,两组之间无统计学差异(P=0.07)。结论:NPM1突变的AML具有独特的临床特点,易于与FLT3-ITD和IDH1突变共存,而不会与AML1-ETO、PML-RARA和CBF-MYH11融合基因共存。

治疗急性髓系白血病及系统性肥大细胞增生症新药——米哚妥林(midostaurin)

米哚妥林(midostaurin)由瑞士诺华制药公司研发,是多重酪氨酸激酶受体抑制药,美国食品药品管理局(FDA)于2016年2月19日授予米哚妥林与其他化学治疗(化疗)药联用,治疗新诊断为FLT3基因突变的急性髓系白血病(AML)成年患者突破性治疗药的地位,并给予快速通道审评的待遇。2017年4月28日获得FDA批准上市,商品名为Rydapt~。此外,同时获批可用于治疗成人侵袭性系统性肥大细胞增多症(ASM)、伴有血液肿瘤的系统性肥大细胞增多症(SM-AHN)和肥大细胞白血病(MCL)等适应证。该文对米哚妥林的非临床和临床药理毒理学、临床研究、不良反应、适应证、剂量与用法、用药注意事项及知识产权状态和国内外研究进展等进行介绍。

急性髓系白血病患者miRNA-181b表达特点及预后意义

目的 探讨微小RNA-181b（miR-181b）在急性髓性白血病（AML）中的表达特点及预后意义.方法 采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测158例初诊AML患者及20例健康供者骨髓单个核细胞中miR-181b的表达水平.同时采用基因组DNA-PCR结合测序方法检测158例AML患者核磷蛋白1（NPM1）基因第12号外显子突变和fms样酪氨酸激酶3（FLT3）基因内部串联重复（ITD）突变（FLT3-ITD）.结果 AML中miR-181b表达水平较正常对照组显著升高（Z =-2.386,P=0.017）,各FAB亚型中M1、M5及M6型miR-181b表达水平较对照组明显升高（P＜0.05）.miR-181b高表达与低血红蛋白、高乳酸脱氢酶及NPMI野生型有关.miR-181b高表达完全缓解率较低（x2 =7.717,P=0.005）、总生存期较短（P＜0.05）.结论 miR-181b在AML某些亚型中高表达,miR-181b高表达是AML患者不利的预后因素.

奎扎替尼治疗急性髓系白血病及其耐药机制研究进展

急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)是一组以髓系造血干祖细胞增殖失控、分化障碍、凋亡受阻为特点的高度异质性疾病,多种基因突变是其主要的发病基础[1]。近年来,随着二代测序技术的发展和应用,越来越多的AML相关基因突变被发现,FMS样酪氨酸激酶-3(FMS-like tyrosine kinase 3,FLT3)突变是AML患者最常见的基因突变之一,与AML的高风险复发和不良预后相关[2],尤其是FLT3-内部串联重复(internal tandem duplications,ITD)阳性患者,其抑制剂的相关研究始终是众多学者期望改善高危AML患者的突破点。

新型酪氨酸激酶抑制剂AC220治疗急性髓系白血病的研究进展

急性髓系白血病（AML）是一种高度异质性疾病，多个信号通路异常可导致其发病。AML的主要发病因素之一是FLT3基因突变，其主要形式是内部串联重复（ITD），与AML患者的不良预后密切相关。鉴于FLT3-ITD突变阳性在AML患者预后作用中的重要性，认识FLT3的通路以及开发针对FLT3突变的靶向药物显得十分关键。虽然FLT3抑制剂表现出一定程度的抗白血病活性，但单药使用的临床疗效仍有一定局限性。AC220（quizartinib）是强效的二代选择性FLT3抑制剂，以AML患者对FLT3抑制剂的耐药机制为基础，越来越多的学者开始研究AC220单药以及联合细胞毒性化疗药物、蛋白激酶抑制剂对FLT3-ITD细胞株及原始白血病细胞的抑制作用。但各组合方案的临床疗效还有待深入研究。