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牛α-IFN及FMDV P12A3C双表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达
1
作者
杨彬
兰喜
+3 位作者
李宝玉
殷相平
李学瑞
柳纪省
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期80-84,共5页
从口蹄疫病毒Asia I/Jiangsu毒株的细胞毒中提取总RNA,通过RT-PCR方法分别获得FMDV的P12A及3C基因;同时以pMD18-T-α-IFN质粒为模板,PCR扩增得到α-IFN基因。将α-IFN基因及FMDV P12A及3C基因连接至双启动子表达载体pBudCE4.1上,构建成...
从口蹄疫病毒Asia I/Jiangsu毒株的细胞毒中提取总RNA,通过RT-PCR方法分别获得FMDV的P12A及3C基因;同时以pMD18-T-α-IFN质粒为模板,PCR扩增得到α-IFN基因。将α-IFN基因及FMDV P12A及3C基因连接至双启动子表达载体pBudCE4.1上,构建成双效表达质粒pBudCE4.1-α-IFN-P12A3C,经电泳、PCR、双酶切和DNA测序鉴定表明双效质粒载体构建成功。用此重组质粒转染BHK-21细胞后并对其表达情况进行检测,表明该双表达质粒在BHK-21细胞中能够成功表达。以此重组质粒免疫乳鼠后12 h,按100 TCID50/0.1 mL的量进行攻毒,结果发现该质粒能够抑制病毒的增殖,对乳鼠有一定的保护作用。结果表明成功构建了牛α-IFN及FMDV P12A3C组合基因双表达载体,为进一步研究口蹄疫基因疫苗提供前期基础。
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关键词
口蹄疫病毒
p
12a
基因
3
c
基因
Α-干扰素
pbudce
4.1
载体
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职称材料
题名
牛α-IFN及FMDV P12A3C双表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达
1
作者
杨彬
兰喜
李宝玉
殷相平
李学瑞
柳纪省
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所、家畜疫病病原生物学国家重点实验室、农业部畜禽病毒学重点开放实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期80-84,共5页
文摘
从口蹄疫病毒Asia I/Jiangsu毒株的细胞毒中提取总RNA,通过RT-PCR方法分别获得FMDV的P12A及3C基因;同时以pMD18-T-α-IFN质粒为模板,PCR扩增得到α-IFN基因。将α-IFN基因及FMDV P12A及3C基因连接至双启动子表达载体pBudCE4.1上,构建成双效表达质粒pBudCE4.1-α-IFN-P12A3C,经电泳、PCR、双酶切和DNA测序鉴定表明双效质粒载体构建成功。用此重组质粒转染BHK-21细胞后并对其表达情况进行检测,表明该双表达质粒在BHK-21细胞中能够成功表达。以此重组质粒免疫乳鼠后12 h,按100 TCID50/0.1 mL的量进行攻毒,结果发现该质粒能够抑制病毒的增殖,对乳鼠有一定的保护作用。结果表明成功构建了牛α-IFN及FMDV P12A3C组合基因双表达载体,为进一步研究口蹄疫基因疫苗提供前期基础。
关键词
口蹄疫病毒
p
12a
基因
3
c
基因
Α-干扰素
pbudce
4.1
载体
Keywords
fmdv p12a3c gene α-ifn pbudce4.1 vector
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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作者
出处
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1
牛α-IFN及FMDV P12A3C双表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达
杨彬
兰喜
李宝玉
殷相平
李学瑞
柳纪省
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
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