保护氨基酸与羟基树脂的连接反应

在多肽固相合成中,分别采用酰氯法和活化酯法,研究了20种Fmoc-氨基酸与W ang树脂的连接反应.除精氨酸外,其他氨基酸与树脂的连接效率均能达到80%以上.酰氯法反应速率快、操作简便,优于活化酯法.在酰氯法中,对于精氨酸,选择弱极法溶剂如DCM,延长反应时间至20 h,连接效率接近80%.

六胜肽的固相合成

采用多肽同相合成方法,全程在无水环境中,以Fmoc-保护基保护的氨基酸和氨基树脂为原料,经N-二异丙基乙胺(DIEA)、六氟磷酸苯骈三唑-1-基-氟基三吡咯烷基(PyBoP)、I-氧-3-双二甲胺羰基苯骈三氮唑四氟化硼盐(TBTU)缩合,再用切割试剂把粗品从氨基树脂上切下来,得到目标粗肽,最后经纯化分离得到纯度在95%以上的目标肽。

Fmoc固相合成JFT的工艺研究

目的:研究多肽JFT的合成工艺。方法:本实验采用固相合成法(spps),以Fmoc—氨基酸为原料,TBTU\HoBt\DIEA混合试剂缩合,用三氟乙酸\苯甲硫醚\巯基乙醇\苯酚\水脱保护,将多肽从MBHA树脂上切割下来。结果:粗肽的收率为62%,经RP-HPLC纯化,即可获得纯度在98%以上的目标肽。经MALDI—MS质谱分析其分子量与理论值一致。结论:此工艺操作简单,便于推广,适合大规模生产。

AoGDW肽固相合成工艺研究

用Wang树脂，以HBTU／HOBT／DIEA（1：1：2），HOBT／DIC（1：1）为缩合剂，DCM、DMF、NMP、THF、DMF／DCM（1：1）、DMF／DCM（1：7）为溶剂，Fmoc-氨基酸物质的量为4倍，不同的反应浓度，从而筛选出AoGDW肽合成的最佳缩合剂、溶剂、反应浓度。树脂．肽复合物用TFA／H2O／TIS（95：2．5：2．5）为裂解液，粗肽经ESI／MS鉴定，用RP-HPLC分离纯化。结果证明：Wang树脂在以HOTU／HOBT／DIEA（1：1：2）为缩合剂，以DCM，DMF／DCM（1：1），DMF／DCM（1：7）为溶剂，反应浓度在0．124-0．248mol／L时，氨基酸的连接率及肽的最终产率最高。粗肽经ESI／MS分析，证明相对分子质量与理论值一致；经RPHPLC纯化，获得纯度为99．7％的目标肽。

生物活性肽SSDI固相合成工艺的研究

目的:研究生物活性肽SSDI的固相合成工艺,并为大规模合成目标肽提供理论依据。方法:采用固相合成法,原料氨基酸以Fmoc形式保护,用Wang树脂为载体,经1-氧3-双二甲胺羰基苯骈三氮唑四氟化硼盐(TBTU)\1-羟基-苯并-三氮唑(HOBt)\二-异丙基乙胺(DIEA)混合试剂缩合,20%哌啶的DMF溶液脱保护,用三氟乙酸\茴香硫醚\巯基乙醇\苯酚\水混合作为切割试剂将多肽从Wang树脂上切割下来。结果:多肽粗品的得率高达70%,经RP-HPLC纯化,可获得纯度在98%以上的目标肽,经MALDI-MS质谱鉴定其分子量与理论值一致。结论:此合成方法操作简单,产品得率高,适合大规模合成目标肽。

曲普瑞林的液相合成

采用液相多肽合成法,以侧链保护的Fmoc-氨基酸为原料,逐步缩合合成十肽曲普瑞林,总收率12.4%。关键中间体及最终化合物的结构经质谱得到确证。