FNDC1在肺腺癌中高表达并与不良预后相关

目的研究Ⅲ型纤连蛋白结构域1(FNDC1)蛋白在肺腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用GEO数据库及GEPIA预测FNDC1在肺腺癌的表达水平,进一步对92例肺腺癌组织及配对的相邻正常组织进行免疫组化染色,验证FNDC1的表达。分析FNDC1表达与肺腺癌患者临床特征之间的关系,使用Cox生存分析进一步研究其预后价值。结果GEO数据库及GEPIA结果显示,肺腺癌组织中FNDC1的表达水平高于其配对的正常组织(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,FNDC1蛋白表达量较高的患者的总生存期较短(P=0.035,0.036,0.00029)。免疫组化结果显示,与正常肺组织相比,肺腺癌组织FNDC1蛋白表达水平升高(P<0.001)。FNDC1蛋白的高表达与临床分期(P=0.044)、T分期(P=0.047)、N分期(P=0.003)存在相关性。Cox单变量及多变量回归生存分析结果显示,FNDC1表达水平增加是肺腺癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论FNDC1蛋白在肺腺癌患者中高表达且与肺腺癌的发生发展及预后密不可分,有可能成为判断肺腺癌患者生存预后的标志物。

FNDC1蛋白在食管癌组织中的表达及干扰FNDC1表达对食管癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白1(FNDC1)对食管癌发生、发展的影响及在紫杉醇(PTX)化疗中的应用前景。方法:采用免疫组化法检测食管癌及其癌旁正常组织(n=53)中FNDC1蛋白的表达。将食管癌TE13和KYSE180细胞各分为4组,空白组不做任何处理,Lipofectamine3000组、阴性对照组、FNDC1 siRNA3组分别转染Lipofectamine3000、阴性对照siRNA和FNDC1 siRNA3。48 h后,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭和转移能力。将TE13和KYSE180细胞各分为6组,分别转染阴性对照siRNA或FNDC1 siRNA3,48 h后再用不同浓度PTX(0、1.22和12.2μmol/L)处理24 h,CCK-8法检测细胞增殖能力。结果:①食管癌和癌旁正常组织中FNDC1蛋白阳性表达率分别为64.2%和24.5%,癌组织中的阳性率高于癌旁正常组织(P<0.05),且深层浸润或伴有淋巴结转移的食管癌组织中FNDC1阳性表达率高于浅层浸润或无淋巴结转移者(P<0.05)。②转染FNDC1 siRNA3的TE13和KYSE180细胞增殖能力、侵袭能力和转移能力均显著降低(P<0.05)。③FNDC1 siRNA3和PTX均可抑制TE13和KYSE180细胞的增殖,两者有协同增效的作用(P<0.05)。结论:FNDC1有望成为食管癌临床生物治疗的有效靶点。

FNDC1在胃腺癌中的表达及对细胞增殖的调控

目的检测胃腺癌组织中Ⅲ型纤维连接蛋白结构域1(fibronectin type III domain containing protein 1,FNDC1)的表达特征,分析其对肿瘤细胞增殖的调控作用。方法选择67例胃腺癌行根治性手术的患者作为研究对象,分别留取肿瘤组织和距肿物边缘>3 cm的正常胃粘膜组织。应用免疫组化法检测FNDC1和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。应用K-M生存分析分析FNDC1的表达与患者术后生存时间的关系。选择胃癌MGC803细胞系,载体转染siRNA-FNDC1的干扰质粒建立siRNA-FNDC1组,同时建立空载体转染组和空白对照组,应用CCK-8法检测细胞增殖活性,应用RT-qPCR法检测PCNA mRNA的表达。结果胃腺癌组织中FNDC1表达的阳性率明显高于对照组,胃腺癌中FNDC1在不同肿瘤最大径、淋巴结转移、浸润深度的的阳性率比较中差异有统计学意义(P<0.05),胃腺癌中FNDC1与PCNA具有正相关性。患者均进行术后60个月生存时间的随访,生存分析显示FNDC1的表达与术后生存时间有关。siRNA-FNDC1组中细胞增殖活性、PCNA mRNA的表达量均明显低于空载体转染组和空白对照组。结论FNDC1在胃腺癌中表达升高,参与肿瘤的形成和进展。FNDC1的作用可能与促进肿瘤细胞的增殖有关。检测组织中FNDC1的表达对判断预后可能有一定价值。

基于转录组测序及生物信息学分析FNDC1基因在口腔鳞癌组织中的表达及意义

目的探讨FNDC1基因在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达水平及功能。方法采用生物信息学、转录组测序和细胞实验,检测FNDC1在OSCC中的表达水平及其在OSCC中可能的作用机制。结果FNDC1在OSCC组织中高表达(P<0.05),FNDC1表达的曲线下面积(AUC)为0.804,表明FNDC1与OSCC诊断之间的强相关性。同时还发现FNDC1的表达水平与吸烟(P<0.05)、临床分期(P<0.001)和病理分期(P<0.001)相关。FNDC1与细胞恶变具有较高的相关性,并且在成纤维细胞、肌成纤维细胞具有更高水平的表达。FNDC1与多种免疫细胞具有较高的相关性。结论本研究证实FNDC1在OSCC中高表达,且与OSCC的进展相关。

运动激活PGC-1a/FNDC5/BDNF通路延缓APP/PS1小鼠病理进程的机制研究

探讨PGC-1a/FNDC5/BDNF信号通路在运动改善APP/PS1小鼠认知功能障碍中的作用机制。选用12只4月龄APPswe/PS1转基因雄性小鼠和12只同窝野生型小鼠,随机分AD对照组(AD-C,n=6)、AD运动组(AD-E,n=6)、野生对照组(WT-C,n=6)和野生运动组(WT-E,n=6)。WT-C组和ADC组小鼠安静饲养,WT-E组和AD-E组进行10周中等强度跑台运动干预。采用Western blot法检测实验小鼠海马PGC-1a、FNDC5、BDNF和Aβ蛋白表达情况。结果表明:与AD-C组小鼠相比,AD-E组小鼠海马内Aβ蛋白表达水平显著下(P<0.01),PGC-1a蛋白表达水平显著上升(P<0.01),FNDC5蛋白表达水平显著上升(P<0.01),BDNF蛋白表达显著上升(P<0.01),Aβ蛋白含量显著下降(P<0.01)。由此得到如下结论:长期中等强度的有氧运动激活APP/PS1小鼠海马PGC-1a/FNDC5/BDNF信号通路,降低海马区Aβ蛋白表达,改善APP/PS1小鼠空间学习记忆能力。

跑台运动通过p38信号上调FNDC5激活Akt改善Ⅱ型糖尿病小鼠认知功能障碍

目的探讨8周跑台运动对db/dbT2DM小鼠认知功能的影响及其分子机制。方法24只8周龄db/dbT2DM小鼠和8只同龄对照m/m小鼠,将db/db小鼠随机分为模型组(db/db)、运动干预组(db+Exe)、运动联合p38抑制剂组(db+Exe+SB203580)。db+Exe组进行8周跑台训练,db+Exe+SB203580组进行8周跑台运动联合SB203580抑制剂灌胃处理(5mg/kg,3d/W,8W)。每周定时检测小鼠的体重和空腹血糖;干预结束后,取全脑及海马组织,免疫组织化学染色观察海马不同区域的神经元损伤状态;Western Blot检测海马组织中AD样病理、神经炎症、突触可塑性、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)/Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白5(FNDC5)、Akt激酶等蛋白的表达。结果显示(1)跑台运动可明显改善db/db小鼠的认知功能障碍。(2)减轻db/db小鼠的海马神经元损伤。(3)降低海马内AD样病理、神经炎症蛋白的表达,增加突触蛋白的表达水平。(4)通过p38信号上调PGC-1α/FNDC5的表达。(5)跑台运动可激活Akt激酶,而p38抑制剂可降低跑台运动对Akt激酶的激活作用。结论8周跑台运动可明显改善db/db小鼠的认知功能障碍,其机制可能是通过p38上调PGC-1α/FNDC5,激活Akt激酶,减弱AD病理进程,降低炎性反应,增加突触可塑性,改善其空间学习记忆能力。

芪参颗粒调控SIRT1/PGC-1α/FNDC5通路介导的线粒体稳态防治心力衰竭心室重构的作用机制

目的:探讨芪参颗粒调控SIRT1/PGC-1α/FNDC5通路介导的线粒体稳态防治心力衰竭心室重构的作用机制。方法:体内研究方面,通过胸主动脉结扎术构建慢性心力衰竭小鼠模型,并随机分为模型组,芪参颗粒低、中、高剂量组(简称低、中、高剂量组),培哚普利组,每组10只,另外10只假手术小鼠做假手术组。低、中、高剂量组造模4周后分别给予芪参颗粒1.42、2.83、5.66g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,培哚普利组给予培哚普利0.607 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,假手术组及模型组给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃。连续给药8周后小动物超声观察各组小鼠心功能水平变化,苏木素伊红(HE)染色、Masson染色、WGA染色法观察各组小鼠心脏组织形态学变化及胶原纤维沉积情况。Western Blot法检测心脏组织SIRT1/PGC-1α/FNDC5通路及线粒体稳定相关蛋白表达。体外研究方面,培养HL-1心肌细胞,通过AngⅡ诱导心肌细胞损伤模型,并将细胞分为对照组、AngⅡ组、中药组,中药组给予10%芪参颗粒含药血清MEM培养基培养细胞,对照组及AngⅡ组给予10%普通大鼠血清MEM培养基培养,培养6 h后,各组细胞加入150 nmol/L AngⅡ孵育24 h。Western Blot法检测心肌细胞SIRT1/PGC-1α/FNDC5通路及线粒体稳定相关蛋白表达,免疫荧光法观察心肌细胞ROS及SIRT1、PGC-1α蛋白表达情况。结果:体内研究结果显示,与假手术组比较,模型组小鼠心功能显著降低(P<0.01),心肌细胞显著肥大,细胞间可见大量胶原纤维沉积,SIRT1、PGC-1α、FNDC5、Mitofusin 2、COXⅣ蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组小鼠心功能及相关蛋白表达水平显著改善(P<0.01,P<0.05)。体外研究结果显示,与对照组比较,AngⅡ组心肌细胞SIRT1、PGC-1α、FNDC5、Mitofusin 2、COXⅣ蛋白表达水平显著降低(P<0.01),ROS水平显著升高;经芪参颗粒含药血清预培养后各蛋白表达(P<0.01)及ROS水平均显著改善。结论:芪参颗粒能有效防治慢性心力衰竭,其作用机制可能是通过调控SIRT1/PGC-1α/FNDC5通路介导的线粒体稳态实现。