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神经元特异的抗原NeuN与Fox3的研究现状 被引量:2
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作者 张元元(综述) 王光明(审阅) 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期305-308,共4页
NeuN作为神经元的标志,是一种神经组织特异的蛋白,可能参与神经系统的发育、分化和功能,但是其具体作用机制还不清楚。目前Neun在神经系统发育、病理诊断以及神经元退化、坏死等方面得到广泛应用。最近在免疫组化、基因沉默等研究中... NeuN作为神经元的标志,是一种神经组织特异的蛋白,可能参与神经系统的发育、分化和功能,但是其具体作用机制还不清楚。目前Neun在神经系统发育、病理诊断以及神经元退化、坏死等方面得到广泛应用。最近在免疫组化、基因沉默等研究中发现,Neun与Fox3基本重合,因此认为NeuN属于Fox1基因家族,命名为Fox3。 展开更多
关键词 NEUN fox3 标志 拼接
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甲状腺激素受体β基因对β淀粉样蛋白42诱导的小胶质细胞炎症和细胞凋亡作用机制 被引量:3
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作者 康涛 朱利娟 +2 位作者 曹冰清 薛延莉 杨谦 《陕西医学杂志》 CAS 2021年第10期1204-1209,共6页
目的:探究甲状腺激素受体β基因(Thrb)对β淀粉样蛋白42(Aβ_(42))诱导的小胶质细胞BV_(2)炎症反应、氧化应激和凋亡的作用及作用机制。方法:RT-PCR和Western blot实验检测不同浓度的Aβ_(42)对Thrb表达的影响;CCK-8实验检测Thrb对小胶... 目的:探究甲状腺激素受体β基因(Thrb)对β淀粉样蛋白42(Aβ_(42))诱导的小胶质细胞BV_(2)炎症反应、氧化应激和凋亡的作用及作用机制。方法:RT-PCR和Western blot实验检测不同浓度的Aβ_(42)对Thrb表达的影响;CCK-8实验检测Thrb对小胶质细胞BV_(2)增殖的影响;V-FITC/PI检测Thrb对BV_(2)细胞凋亡的影响;Western blot实验检测凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-9的蛋白表达水平;活性氧指示剂DCFH-DA检测活性氧(ROS)的水平。结果:Aβ_(42)显著抑制Thrb表达且具有剂量依赖性(P<0.05);过表达Thrb显著降低Aβ_(42)诱导的小胶质细胞BV_(2)的细胞凋亡率和炎症因子的水平(均P<0.05);过表达Thrb显著缓解Aβ_(42)诱导的小胶质细胞BV_(2)的氧化应激(P<0.05);Thrb显著促进Sirt 3和FOX3a的表达,相反,sh-Thrb显著抑制Sirt 3和FOX3a的表达(均P<0.05);Sirt 3/FOX3a通路参与Thrb对Aβ_(42)诱导的细胞损伤的保护机制。结论:Thrb能够缓解Aβ_(42)诱导的BV_(2)细胞的氧化应激和凋亡,降低细胞损伤,其作用是通过调控Sirt 3/FOX3a信号通路来实现的,这一结果能够为老年痴呆症的诊断和临床治疗提供分子基础。 展开更多
关键词 甲状腺激素受体β基因 阿尔兹海默症 Sirt 3/fox3a 细胞凋亡 氧化应激
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神经元特异核蛋白单克隆抗体的构建 被引量:1
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作者 王丽红 张香娜 +4 位作者 王楠楠 黄锦 杨百万 李兴 王光明 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第24期3393-3395,共3页
目的 根据Pubmed报道的FOX3cDNA序列,构建神经元特异核蛋白(Neun)单克隆抗体。方法 获得FOX3cDNA序列,设计引物,PCR扩增,利用pcDNATM3.3-TOPO TA将纯化后的PCR产物插入真核表达载体中,得到FOX3蛋白,然后利用该蛋白免疫小鼠,免疫后小... 目的 根据Pubmed报道的FOX3cDNA序列,构建神经元特异核蛋白(Neun)单克隆抗体。方法 获得FOX3cDNA序列,设计引物,PCR扩增,利用pcDNATM3.3-TOPO TA将纯化后的PCR产物插入真核表达载体中,得到FOX3蛋白,然后利用该蛋白免疫小鼠,免疫后小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,筛选后获得的杂交瘤细胞小鼠腹腔接种,收获腹腔积液后进行相关检测。结果 所获得的腹腔积液经免疫印迹检测,在(46~48)×103处显示两条带,免疫荧光检测后细胞核显示阳性信号。结论 根据FOX3cDNA序列构建的抗体与商业化的抗Neun抗体在免疫荧光和免疫印迹上表现一致,Neun与FOX3为同一基因。 展开更多
关键词 神经元特异核蛋白 fox3 单克隆抗体
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松果体及其褪黑素与大鼠乳腺癌Treg细胞和转录因子Foxp3表达的相关性 被引量:1
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作者 黄玉钿 陈义忠 +3 位作者 周瑞祥 郑曦 薛玉钦 吴进 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期870-874,共5页
目的探讨松果体及其褪黑素(MLT)对乳腺癌大鼠外周血中调节性T(Treg)细胞产生及乳腺癌组织中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Fox) p3表达的影响。方法选用雌性清洁级SD大鼠150只,随机平均分为正常组、荷瘤对照组、松果体摘除并荷瘤+生理盐水... 目的探讨松果体及其褪黑素(MLT)对乳腺癌大鼠外周血中调节性T(Treg)细胞产生及乳腺癌组织中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Fox) p3表达的影响。方法选用雌性清洁级SD大鼠150只,随机平均分为正常组、荷瘤对照组、松果体摘除并荷瘤+生理盐水组、松果体摘除并荷瘤+7. 5 mg·kg-1·d-1MLT组、松果体摘除并荷瘤+15 mg·kg-1·d-1MLT组,所有荷瘤组接种大鼠乳腺癌细胞,建立荷瘤大鼠模型,接种癌细胞后第10天采外周血并取瘤体,分别应用流式细胞术、免疫组织化学法检测乳腺癌大鼠外周血中CD4+CD25+Treg细胞比例及乳腺癌组织中Foxp3+Treg细胞数量的变化。结果松果体摘除使乳腺癌外周血中Treg细胞比例上升(P<0. 01),补充MLT后外周血Treg细胞比例下降(P<0. 05)且随剂量增加而下降(P<0. 01);松果体摘除使乳腺癌组织中Treg细胞数量上升(P<0. 01),补充MLT后Treg细胞数量下降(P<0. 05),但无剂量依赖性。结论松果体摘除增加乳腺癌外周血和组织中Treg细胞的产生,补充MLT能逆转上述作用,MLT抑制Treg细胞的产生可能具有拮抗乳腺癌发生发展的作用。 展开更多
关键词 松果体 褪黑素 乳腺癌 调节性T(Treg)细胞 叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Fox)p3
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六味地黄丸通过PI3K/Akt/FoxO3a通路调控自噬对SAMP8小鼠记忆功能的影响 被引量:11
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作者 宋军营 丁蕊 +4 位作者 李俊霖 蔡菊 袁永 贾亚泉 张振强 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第17期1-8,共8页
目的:探讨六味地黄丸通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框转录因子O3a(FoxO3a)通路调控自噬对快速老化小鼠8型(SAMP8)小鼠记忆功能的影响。方法:6月龄SPF级抗快速老化亚系小鼠(SAMR1)雄性小鼠6只设为正常组,6月龄SPF级SA... 目的:探讨六味地黄丸通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框转录因子O3a(FoxO3a)通路调控自噬对快速老化小鼠8型(SAMP8)小鼠记忆功能的影响。方法:6月龄SPF级抗快速老化亚系小鼠(SAMR1)雄性小鼠6只设为正常组,6月龄SPF级SAMP8雄性小鼠24只随机均分为模型组、多奈哌齐组(0.747 mg·kg^(-1))、六味地黄丸高、低剂量组(2.700、1.350 g·kg^(-1)),灌胃给药2个月。Morris水迷宫法检测各组小鼠学习和记忆能力;尼氏染色观察小鼠皮层、海马神经元;免疫组化(IHC)检测皮层、海马微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)阳性表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠皮层自噬关键分子酵母ATG6同系物(Beclin1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、自噬相关基因5(ATG5)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、Caspase-9、Akt、p-Akt、FoxO3a、p-FoxO3a的蛋白表达水平。结果:与正常组小鼠比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05,P<0.01),穿越平台次数、目标象限停留时间显著减少(P<0.01);皮层、海马神经细胞数量明显减少、体积缩小,分布疏散,LC3B阳性表达显著增多(P<0.01);皮层Beclin1、ATG5表达显著升高(P<0.01),Bcl-2表达水平降低(P<0.01),Caspase-3、Caspase-9表达水平显著升高(P<0.01),p-Akt/Akt、p-FoxO3a/FoxO3a表达水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组小,3 d逃避潜伏期明显缩短(P<0.05,P<0.01);穿越平台次数显著增加(P<0.01);目标象限停留时间显著增加(P<0.01);多奈哌齐组皮层海马神经元神经细胞数量增多,六味地黄丸高、低剂量组小鼠神经元数目及尼氏体明显增加且分布致密,细胞损伤程度较低;多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组皮层、海马LC3B阳性表达显著降低(P<0.01);六味地黄丸高、低剂量组Beclin1表达显著降低(P<0.01),多奈哌齐组和六味地黄丸低剂量组ATG5表达显著降低(P<0.01),多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组皮层Bcl-2表达水平显著升高(P<0.01),Caspase-3表达水平显著降低(P<0.01),Caspase-9表达明显降低(P<0.05,P<0.01),p-Akt/Akt、p-FoxO3a/FoxO3a表达水平显著升高(P<0.01)。结论:六味地黄丸有效改善了快速老化SAMP8 AD模型小鼠的学习记忆能力,保护神经元,其机制可能与调控PI3K/Akt/FoxO3a信号通路,下调自噬相关因子ATG5、Beclin1和LC3B表达和减少凋亡有关。 展开更多
关键词 六味地黄丸 阿尔茨海默病 自噬 凋亡 叉头框转录因子O3a(Fox O3a)
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