芦荟大黄素联合靶向抑制FOXC1基因对胶质瘤细胞生物学行为的影响

目的探讨芦荟大黄素(AE)联合siRNA-FOXC1靶向沉默FOXC1基因调控Wnt/β-catenin通路对胶质瘤细胞U251增殖、凋亡、迁移的影响。方法研究时间为2022年6月至2023年12月,地点为滨州医学院附属医院医学实验中心。选择靶向沉默FOXC1基因效率最高的siRNA序列(FOXC1-siRNA-2102),采用脂质体法转染细胞。采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度AE对胶质瘤细胞U251增殖的影响,并计算半数抑制浓度值(IC50)。CCK8法检测转染后24 h、48 h、72 h、96 h细胞增殖能力变化。将细胞分为对照组、AE组、siRNA-FOXC1组、AE+siRNA-FOXC1组,采用Annexin V-PE/7-AAD染色-流式细胞仪检测各组细胞凋亡的影响,Transwell小室检测各组细胞的迁移能力,qPCR法检测各组FOXC1基因的mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测各组FOXC1、β-catenin、C-myc蛋白表达水平。统计学方法采用F检验。结果随着AE剂量的增加,胶质瘤细胞U251增殖抑制率增高[对照组为(0.04±12.86)%,30μmol/L组为(24.45±6.96)%、60μmol/L组为(48.41±5.67)%、90μmol/L组为(60.63±9.96)%、120μmol/L组为(78.23±13.34)%],AE在U251细胞的IC50值为61.43μmol/L。随着时间延长,siRNA-FOXC1组、60μmol/L AE组、AE+siRNA-FOXC1组细胞增殖抑制率均高于对照组,其中AE+siRNA-FOXC1组最高;siRNA-FOXC1组、AE组、AE+siRNA-FOXC1组的凋亡率均高于对照组,其中AE+siRNA-FOXC1组的细胞凋亡率最高;siRNA-FOXC1组、AE组、AE+siRNA-FOXC1组的FOXC1 mRNA表达水平及β-catenin、C-myc、FOXC1蛋白表达均低于对照组,其中AE+siRNA-FOXC1组最低(均P<0.05)。siRNA-FOXC1组、AE组、AE+siRNA-FOXC1组细胞迁移能力均低于对照组,其中AE+siRNA-FOXC1组最低[对照组迁移细胞数为(193.00±14.17)个,AE组为(84.00±14.22)个,siRNA-FOXC1组为(80.67±5.69)个,AE+siRNA-FOXC1组为(36.33±11.59)个,差异有统计学意义(F=93.55,P<0.05)]。结论AE能抑制胶质瘤U251细胞增殖、迁移,促进细胞凋亡,其机制可能与FOXC1基因、Wnt/β-catenin通路有关。

Claudin-4、Foxc1、p53、EGFR、CK5/6及Ki-67在三阴性乳腺癌患者中的表达变化

目的探讨三阴性乳腺癌患者紧密连接蛋白-4(Claudin-4)、叉头框蛋白C1(Foxc1)、p53、表皮生长因子受体(EGFR)、细胞角蛋白5/6(CK5/6)及细胞增殖核抗原(Ki-67)的表达变化。方法选取2019年1月至2022年1月秦皇岛市妇幼保健院的90例三阴性乳腺癌患者作为观察组,以及同期90例非三阴性乳腺癌患者作为对照组。比较两组患者组织中Claudin-4、Foxc1、p53、EGFR、CK5/6及Ki-67阳性率,观察组不同年龄、肿瘤分期、组织学分级及淋巴结转移情况患者上述指标的阳性率,采用Spearman相关性分析组织Claudin-4、Foxc1、p53、EGFR、CK5/6及Ki-67与临床病理参数的关系。结果观察组组织Claudin-4、Foxc1、p53、EGFR、CK5/6及Ki-67阳性率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组中不同年龄及肿瘤分期患者的上述指标阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05),不同组织学分级及淋巴结转移情况者的上述指标阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,组织中Claudin-4、Foxc1、p53、EGFR、CK5/6及Ki-67与组织学分级及淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论三阴性乳腺癌患者组织中Claudin-4、Foxc1、p53、EGFR、CK5/6及Ki-67呈高表达,且与组织学分级及淋巴结转移情况密切相关。

五味子素通过调控FOXC1基因对结直肠癌细胞恶性生物学行为的作用机制

目的探讨五味子素通过调控叉头框转录因子C1(FOXC1)基因对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的作用机制。方法采用不同浓度(0、12.5、25、50μmol/L)五味子素处理HCT116细胞,筛选合适浓度细胞用于后续实验,随机分层法分为对照组(未做任何处理)、FOXC1-NC组(转染FOXC1模拟物阴性对照)、FOXC1组(转染FOXC1)、五味子素组(添加50μmol/L五味子素)、FOXC1+五味子素组(转染FOXC1,并添加50μmol/L五味子素),流式细胞仪检测HCT116细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Realtime-PCR检测FOXC1、上皮型钙黏附素(E-cadherin)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、波形蛋白(Vimentin)mRNA表达,Western blot检测FOXC1、MMP2、E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。结果与0μmol/L比较,在12 h、24 h、48 h时采用12.5、25、50μmol/L五味子素处理HCT116细胞,细胞活力均受到抑制(P<0.05),其中50μmol/L浓度处理48 h时,细胞存活率接近50%。与对照组、FOXC1-NC组相比,FOXC1组细胞凋亡率、E-cadherin mRNA及蛋白表达水平降低,侵袭细胞数与FOXC1、MMP2、Vimentin mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,五味子素组细胞凋亡率、E-cadherin mRNA及蛋白表达水平升高,侵袭细胞数与FOXC1、MMP2、Vimentin mRNA及蛋白表达水平下降(P<0.05);FOXC1+五味子素组细胞凋亡率、E-cadherin mRNA及蛋白表达水平高于FOXC1组,侵袭细胞数与FOXC1、MMP2、Vimentin mRNA及蛋白低于FOXC1组,而细胞凋亡率、E-cadherin mRNA及蛋白低于五味子素组,侵袭细胞数与FOXC1、MMP2、Vimentin mRNA及蛋白高于五味子素组(P<0.05)。结论五味子素可促进CRC HCT116细胞凋亡,抑制细胞侵袭,可能通过下调FOXC1及调节其下游E-cadherin、MMP2、Vimentin mRNA及蛋白表达来发挥抑癌作用。

分子化合物4-甲氧基苄基-N-甲基-4-苯乙烯酮-2-苯乙酰胺抑制肺癌细胞NCI-H1299转移的研究

探讨以转录因子叉头框C1(Forkhead box C1,FOXC1)蛋白结构为基础设计合成的标题化合物对肺癌细胞NCI-H1299的抑制作用。利用分子对接技术评估FOXC1与标题化合物的结合能力;MTT检测标题化合物对细胞增殖能力的影响;分别用5、10μmol/L标题化合物作用肺癌细胞NCI-H129912 h,Transwell实验检测标题化合物对细胞的迁移和侵袭能力的影响;构建稳定表达荧光素酶的肺癌细胞LUC-NCI-H1299,左心室注入小鼠体内构建转移瘤模型,分为对照组、低剂量(4 mg/kg)和高剂量(8 mg/kg)组,尾静脉注射治疗,观察化合物对肿瘤在体内转移的影响。结果表明FOXC1与标题化合物对接结合能为-6.9 kcal/mol,体外实验结果显示,化合物以剂量依赖方式抑制细胞增殖,其中低剂量和高剂量组对细胞的迁移和侵袭均有抑制效果,且高剂量组抑制效果更显著,体内研究发现,与对照组相比,标题化合物能有效抑制肺癌在体内的转移。综上,标题化合物与FOXC1能有效对接,在体外可抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,在体内可减少肺癌细胞的转移。

FOXC1在不同分子亚型乳腺癌中的表达及与临床病理特征的相关性研究

目的研究FOXC1在不同分子亚型乳腺癌中的表达情况及与临床病理特征的相关性。方法收集南京中医药大学附属医院2020-01—2022-09诊断为浸润性乳腺癌标本159例,应用免疫组化方法(SP法)检测不同分子亚型的乳腺癌组织中FOXC1的表达情况及其与临床病理特征的相关性。结果FOXC1阳性表达率在三阴性乳腺癌(TNBC)中最高,占87.27%(48/55),而在非TNBC分子亚型中均为低表达状态。在TNBC中,FOXC1阳性的染色强度均为中等到强阳性,而在其他三个亚型中,FOXC1的阳性强度有一例Her-2过表达型的病例显示强阳性表达以外,其余阳性均为比较低的弱阳性表达。FOXC1多发生于较为年轻的患者,也好发于组织学分级更高的乳腺癌中。同时,伴大汗腺分化的癌中FOXC1的阳性率低,其余类型则阳性率高。FOXC1的阳性表达与肿瘤的大小以及淋巴结转移情况等无相关性。结论FOXC1在三阴性乳腺癌中呈高表达状态,是一种高度特异性三阴性表型的标记物。

FOXC1在非小细胞肺癌组织中的表达及预后意义

目的:探讨FOXC1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平及其预后意义。方法:将202例NSCLC及63例癌旁肺组织标本制作成组织芯片,采用免疫组织化学SP法检测FOXC1的表达,探讨其表达水平与临床病理特征及预后的关系。结果:NSCLC组织中高表达FOXC1(60.87%)的细胞比率显著高于癌旁肺组织(25.40%)(P<0.001);NSCLC中,FOXC1的表达与TNM分期及淋巴结转移显著相关(P<0.01);Kaplan-Meier生存分析显示FOXC1高表达的NSCLC患者生存期明显低于低表达的患者(P<0.001)。结论:FOXC1在NSCLC中的表达与肿瘤的发生、进展有关,检测FOXC1的表达有助于对患者预后的评价。

lncRNA FOXCUT-mRNA FOXC1基因对对乳腺癌增殖能力的影响

目的探讨转录因子叉头框蛋白C1(forkhead box Fox C1,FOXC1)基因和FOXC1基因启动子上游转录体(FOXC1 promoter upstream transcript,FOXCUT)对乳腺癌细胞增殖能力的影响。方法采用RNAi技术沉默乳腺癌MCF-7细胞中FOXC1及FOXCUT的表达,采用Real-time PCR和Western blot技术分别检测FOXC1及FOXCUT mRNA和蛋白的表达。采用CCK-8法检测FOXC1 siRNA和FOXCUT siRNA转染后MCF-7细胞增殖能力的变化。结果 Real-time PCR结果显示,FOXC1 siRNA转染MCF-7细胞后,FOXC1 mRNA的表达水平显著低于对照组( P <0.01),FOXCUT mRNA的表达水平无明显降低,而FOXCUT siRNA转染MCF-7细胞后,FOXC1 mRNA及FOXCUT mRNA的表达水平均显著降低( P <0.01);Western blot结果显示,FOXC1 siRNA和FOXCUT siRNA转染MCF-7细胞后,FOXC1的蛋白表达水平显著下调( P <0.01)。CCK-8检测结果显示,转染FOXC1 siRNA和FOXCUT siRNA后,MCF-7细胞的增殖活性明显受到抑制( P <0.01)。结论 FOXC1及FOXCUT可以通过FOXC1-FOXCUT“基因对”的形式调控乳腺癌细胞的增殖。

上调FOXC1的表达对SKOV3细胞增殖及侵袭的影响

目的:探讨上调FOXC1的表达对卵巢浆液性腺癌SKOV3细胞增殖及侵袭的影响。方法:分别以重组FOXC1慢病毒、慢病毒空载体稳定感染SKOV3细胞(实验组和载体对照组),并以未感染慢病毒的SKOV3细胞为空白对照组,分别应用qRT-PCR和Western blot法检测3组细胞中FOXC1 mRNA和蛋白的表达情况,应用CCK-8法检测3组细胞接种24、48、72 h后的增殖能力,用Transwell小室检测接种24 h细胞的体外侵袭能力。结果:实验组SKOV3细胞FOXC1 mRNA及蛋白的表达均较载体对照组及空白对照组升高(P<0.05)。与空白对照组及载体对照组相比,实验组SKOV3细胞感染不同时间的增殖活性均降低,侵袭能力亦降低(P<0.05)。结论:上调FOXC1的表达能够抑制SKOV3细胞的增殖及侵袭能力。

沉默FOXC1基因对鼻咽癌细胞系5-8F凋亡和周期的影响

目的:探讨沉默叉头框C1(forkhead boxC1,FOXC1)基因对鼻咽癌细胞系5-8F凋亡和细胞周期的影响。方法:利用si RNA技术在5-8F细胞中沉默FOXC1基因,通过流式细胞仪检测细胞凋亡和周期的变化,应用Western blot方法检测相关蛋白Bcl-2、CyclinD1的表达。结果:FOXC1基因沉默后5-8F细胞的凋亡率明显增高,且Bcl-2蛋白表达减弱(P<0.05),处于G1期的细胞数减少,处于S期的细胞数增多,同时降低了CyclinD1蛋白的表达(P<0.05)。结论:沉默FOXC1基因可能通过下调Bcl-2表达促进5-8F细胞凋亡,又可能通过调节CyclinD1的表达影响5-8F细胞周期分布,这说明FOXC1在鼻咽癌进展中的作用值得进一步研究。

上皮性卵巢癌组织中FOXC1 mRNA表达变化及其启动子区甲基化情况观察

目的观察卵巢上皮性肿瘤中FOXC1 mRNA表达变化及其启动子区甲基化情况。方法选择30例上皮性卵巢癌(A组)、14例交界性卵巢上皮性肿瘤(B组)和21例良性卵巢上皮性肿瘤患者(C组),取其手术切除卵巢组织标本,用RT-PCR法检测FOXC1 mRNA,用甲基化特异聚合酶链反应方法(MSP)结合琼脂糖凝胶电泳检测FOXC1基因启动子区甲基化状态及频率。结果 A、B、C组FOXC1 mRNA相对表达量分别为0.38±0.16、0.61±0.18、1.19±0.17,A组低于B组,B组低于C组(P均<0.05)。A组卵巢癌组织中FOXC1 mRNA相对表达量与临床分期及分化程度无关,与淋巴结转移有关(P<0.05)。A、B、C组卵巢组织中FOXC1基因启动子区甲基化频率分别为66.7%、50.0%、9.5%,A组高于B组,B组高于C组(P均<0.05)。A组FOXC1基因启动子区甲基化、未甲基化者FOXC1 mRNA相对表达量分别为0.32±0.14、0.45±0.17,P<0.05。结论上皮性卵巢癌组织中FOXC1 mRNA表达下降,FOXC1 mRNA表达与上皮性卵巢癌淋巴结转移有关。FOXC启动子区甲基化状态与其mRNA表达抑制相关。

FOXC1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中FOXC1蛋白的表达与临床病理参数的相关性。方法采用免疫组织化学Max VisionTM一步法检测86例NSCLC组织及20例肺良性病变组织中FOXC1蛋白的表达情况,并分析其与临床病理参数之间的相关性。结果 FOXC1蛋白表达定位于NSCLC癌细胞的胞质及胞核内;其在NSCLC组织及肺良性病变组织中的高表达率分别为62.79%（54/86）和25%（5/20）,差异有统计学意义（P=0.002）;其表达与淋巴结转移、TNM分期密切相关,FOXC1蛋白在有淋巴结转移的NSCLC组中的高表达率为81.25%（39/48）,在无淋巴结转移组中高表达率为39.47%（15/38）,差异有统计学意义（P=0.000）;Ⅲ期NSCLC组中高表达率为77.8%（28/38）,明显高于Ⅰ~Ⅱ期组中高表达率（52%,26/50）（P=0.015）;而与分化程度、组织学类型、肿瘤大小、性别、年龄、吸烟等均无明显相关性（P均〉0.05）。结论 FOXC1蛋白可能在肺癌的侵袭、转移过程中发挥重要的作用,可能为抑制NSCLC的侵袭转移提供新的治疗靶点和方向。

FOXC1蛋白在子宫颈癌及子宫内膜癌中的表达及意义

目的:探讨FOXC1蛋白表达与子宫颈癌及子宫内膜癌的临床病理特征间相关性。方法:采用免疫组化S-P法检测54例子宫颈癌及23例子宫内膜癌石蜡组织中FOXC1蛋白的表达。结果:FOXC1蛋白分别在29(53.7%)例子宫颈癌组织及20(87.0%)例子宫内膜癌组织中均有表达,且定位在细胞浆。FOXC1阳性表达与宫颈癌组织学分级相关(P<0.05),与宫颈癌的病理分型,FIGO(国际妇产科联盟International Federation of Gynecology and Obstetrics)临床分期,宫颈肌层浸润及盆腔淋巴结转移之间无明显相关性(P>0.05)。FOXC1蛋白表达与子宫内膜癌病理类型,组织学分级,FIGO手术病理分期,肌层浸润深度,宫颈受累情况及附件受累,盆腔淋巴结转移之间均无明显相关性(P>0.05)。结论:FOXC1蛋白可能参与了子宫颈癌的发生及发展过程,它可能与子宫内膜癌发生发展过程无关。

FOXC1和FOXCUT在肝细胞癌组织中的表达及与预后的关系

目的:探讨肝细胞癌组织中FOXC1基因以及上游启动子非编码蛋白FOXCUT的表达情况,并进行相关性分析。方法:选取2013年9月至2015年6月我院收治的肝细胞癌患者62例作为研究对象,取其手术过程中切除的癌组织及癌旁组织,采用qPCR法检测FOXC1 mRNA、lncRNA FOXCUT在肝细胞癌中的表达,采用免疫组化法测定临床石蜡切片中FOXC1蛋白的表达,分析FOXC1、FOXCUT与临床病理特征的关系,Pearson法分析FOXC1与FOXCUT之间相关性,Kaplan-Meier法分析肝细胞癌组织中FOXC1、FOXCUT表达与患者生存率的关系。结果:两组FOXC1、FOXCUT在肝细胞癌中表达水平存在明显差异,与癌旁组织相比,癌组织中FOXC1、FOXCUT表达水平均升高(P<0.05);FOXC1、FOXCUT表达与肝细胞癌临床参数分析显示FOXC1、FOXCUT与性别、年龄、肿瘤大小差异无统计学意义(P>0.05),FOXC1、FOXCUT在有淋巴结转移、分化程度低、TNM分期为III-IV期、有肝硬化患者中表达量高于无淋巴结转移、分化程度中高、TNM分期为I-II期、无肝硬化患者(P<0.05);Pearson法分析结果显示FOXC1与FOXCUT表达水平为显著正相关;Kaplan-Meier法分析结果显示FOXC1阳性表达组3年内存活率低于阴性表达组(28.0%vs 62.0%),FOXCUT高表达组3年内存活率低于低表达组(22.0%vs 51.2%)(P<0.05)。结论:FOXC1和FOXCUT在肝细胞癌组织中高表达,二者有极大相关性,FOXC1和FOXCUT高表达不利于预后。

沉默FOXC1基因对人胰腺癌细胞增殖的影响

目的:研究小干扰RNA(small interfering R N A,s i R N A)沉默人胰腺癌Capan-2、PANC-1细胞中叉头框蛋白C1(fork head box C1,FOXC1)基因对胰腺癌细胞增殖能力的影响及作用机制.方法:以胰腺癌细胞、原发胰腺癌组织为研究对象,实时定量逆转录聚合酶链反应(quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测FOXC1 m RNA在胰腺癌细胞及组织中的表达情况;将人胰腺癌细胞分为2组:FOXC1s i R N A组(实验组)、N C s i R N A组(阴性对照组),脂质体转染法将FOXC1 si RNA转染入胰腺癌细胞,q RT-PCR、Western blot技术检测胰腺癌细胞FOXC1 m RNA及蛋白表达变化,5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,Ed U)细胞增殖法检测各组胰腺癌细胞增殖情况;流式细胞技术(flow cytometry,FCM)检测各组胰腺癌细胞的周期分布,Western blot技术分析周期相关蛋白P21、P53、Cyclin D1蛋白表达情况.结果:q RT-PCR结果提示:相比正常胰腺上皮细胞和癌旁胰腺组织,FOXC1 m RNA在胰腺癌细胞及胰腺癌组织中表达较高(P<0.05);q RT-P C R及Westernblo t结果显示FOXC1 si RNA有效沉默了胰腺癌细胞F O X C1基因的转录和表达,E d U细胞增殖实验提示:沉默了胰腺癌细胞F O X C1基因表达后,胰腺癌细胞胞的增殖能力明显下降,较阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);F C M结果显示:沉默了胰腺癌细胞FOXC1基因表达后胰腺癌细胞被阻滞在G0/G1期,较阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示:较阴性对照组,P21、P53表达水平无明显变化,Cyclin D1表达水平下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论:FOXC1 si RNA能够有效沉默人胰腺癌Capan-2、PANC-1细胞FOXC1基因的表达,抑制其增殖,将细胞周期阻滞于G0/G1期,提示FOXC1影响细胞增殖可能是通过调控细胞周期实现的,其机制可能是部分通过调控细胞周期蛋白Cyclin D1的表达而实现.

lncRNA FOXC2-AS1逆转骨肉瘤细胞对阿霉素耐药性的影响

目的探讨沉默长链非编码RNA FOXC2-AS1(lncRNA FOXC2-AS1)对人骨肉瘤细胞阿霉素(ADM)耐药性的影响及可能作用机制。方法采用ADM长期浓度梯度递增法体外建立ADM耐药细胞株MG-63/ADR,利用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测MG-63和MG-63/ADR细胞中FOXC2-AS1的表达水平,采用阴性对照序列和si-FOXC2-AS1序列转染MG-63/ADR细胞作为si-NC组和si-FOXC2-AS1组,另设空白对照组。MTT实验和平板克隆形成实验检测各组细胞对ADM的敏感性,并计算半数抑制浓度(IC50)。Western blotting法检测各组细胞中Notch-1及下游靶因子Hes-1、Hey-1、Hey-2蛋白水平。结果体外成功建立MG-63/ADR耐药细胞株,1、5、25、125、625、3125、15 625 ng/ml ADM对MG-63/ADR细胞的增殖抑制率分别为(5.90±0.48)%、(9.86±0.85)%、(16.75±2.21)%、(29.84±2.98)%、(50.45±4.96)%、(54.82±5.33)%和(57.69±5.76)%,明显低于MG-63细胞。ADM对MG-63和MG-63/ADR的IC50分别为106.55 ng/ml和685.47 ng/ml。MG-63/ADR耐药指数为6.43。si-FOXC2-AS1组FOXC2-AS1的相对表达量为0.44±0.12,低于空白对照组(1.43±0.22)和si-NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。1、5、25、125、625、3125和15 625 ng/ml ADM对si-FOXC2-AS1组MG-63/ADR细胞的增殖抑制率分别为(6.36±0.40)%、(13.41±1.05)%、(32.45±2.69)%、(49.73±4.14)%、(64.82±4.67)%、(77.56±5.79)%和(79.50±5.62)%,明显高于空白对照组。转染si-FOXC2-AS1后MG-63/ADR细胞对ADM的敏感性增加了4.25倍。si-FOXC2-AS1组经ADM(100 ng/ml)作用96 h后,MG-63/ADR细胞克隆形成率为(27.64±7.28)%,低于空白对照组的(76.07±17.91)%和si-NC组的(69.83±15.71)%,差异有统计学意义(P<0.05)。si-FOXC2-AS1组MG-63/ADR细胞中Notch-1及其下游分子Hes-1、Hey-1、Hey-2蛋白的表达水平分别为0.67±0.15、0.52±0.10、0.45±0.12和0.38±0.11,均低于空白对照组和si-NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论沉默lncRNA FOXC2-AS1表达通过抑制Notch-1信号通路的活化,进而增加MG-63/ADR细胞对ADM的敏感性。

FOXC1基因在口腔鳞状细胞癌中的表达

目的研究FOXC1基因在口腔鳞状细胞癌中的表达及功能。方法采用免疫组化、实时定量荧光聚合酶链反应、蛋白印迹法检测23例鳞状细胞组织中FOXC1的表达,并采用Q-PCR在口腔鳞癌细胞中验证FOXC1的表达;采用MTS、单细胞克隆及细胞划痕实验检测FOXC1基因下调以后在口腔鳞癌细胞中的功能。结果 FOXC1在23例口腔鳞癌组织免疫组化中有10例强阳性表达,10例中阳性表达,3例弱阳性表达,而在对照组织中22例阴性,1例弱阳性。23例鳞癌组织PCR结果有19例过表达,Western Blot结果与IHC和PCR结果一致,鳞癌细胞内结果与组织内结果一致。当FOXC1的表达被siRNA干扰下调时,FOXC1的表达降低。在口腔鳞癌Tca8113中,siRNA干扰FOXC1的下调可以抑制体外细胞增殖和细胞迁移能力。结论 FOXC1可能与口腔鳞癌的发生发展相关,有可能成为口腔鳞癌患者潜在的新型生物标志物及治疗靶标。

过表达FOXC1基因对口腔鳞状细胞癌增殖凋亡及迁移能力的影响

目的:探讨FOXC1基因过表达对口腔鳞癌细胞SCC-9增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法:运用PCR技术对目的基因FOXC1进行扩增,进一步应用基因重组技术,将靶基因克隆入慢病毒载体,构建含有FOXC1基因的重组慢病毒载体。将构建载体转染至SCC-9细胞,分别应用流式细胞术、R T-PCR以及Wester n blot检测SCC-9细胞中FOXC1 m R NA和蛋白表达水平,验证转染效率。最后通过Annex in V/7-AAD、CCK-8细胞活力检测、细胞周期检测及细胞划痕试验分别评估FOXC1基因过表达对SCC-9细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。结果:与空白对照组及空载体对照组相比,实验组(过表达FOXC1组)细胞FOXC1的m RNA及蛋白表达水平均较有所升高(P<0.05);实验组SCC-9细胞的增殖和迁移能力均有所减弱,凋亡细胞比例显著增加(P<0.05)。结论:过表达FOXC1基因能够在一定程度上抑制口腔鳞癌细胞SCC-9增殖和迁移能力,促进肿瘤细胞凋亡。

FOXC1在复发性乳腺浸润性导管癌中的表达及其意义

目的:探讨FOXC1蛋白表达与复发性乳腺浸润性导管癌的临床病理特征间相关性。方法:采用免疫组化S-P法检测42例复发性乳腺癌石蜡组织中FOXC1蛋白的表达。结果:FOXC1蛋白在21例(50%)乳腺浸润性导管癌中表达,定位于胞核。FOXC1阳性表达与乳腺浸润性导管癌组织学分级相关(P<0.05),与复发性乳腺癌患者的耐药情况及患者辅助化疗后的PFS相关(P<0.05),与乳腺癌患者的年龄,淋巴结转移的数量以及原发肿块的大小无明显的统计学相关性(P>0.05)。结论:FOXC1蛋白参与了复发性乳腺癌的耐药机制,但其可能与乳腺癌原发肿瘤的发生发展及淋巴结转移无关。

胃癌多药耐药细胞中FOXC1的表达及其意义

目的探讨FOXC1在胃癌耐药细胞中的表达情况及对胃癌细胞药物敏感性的影响。方法采用q RT-PCR、Western Blot法检测胃癌多药耐药细胞SGC7901/ADR、SGC7901/VCR及亲本细胞SGC7901中FOXC1的表达;应用si RNA下调胃癌多药耐药细胞SGC7901/ADR、SGC7901/VCR中FOXC1的表达后以MTT法检测上述细胞IC50值的变化。结果 FOXC1在胃癌多药耐药细胞SGC7901/ADR、SGC7901/VCR表达显著高于亲本细胞SGC7901,当下调其表达后,SGC7901/ADR、SGC7901/VCR对多种化疗药物的敏感性显著升高。结论 FOXC1参与胃癌多药耐药过程,但其相关分子机制有待进一步深入研究。

FOXC 1在鼻咽癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的：探讨FOXC1在鼻咽癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法收集的101例鼻咽癌组织标本及64例慢性鼻咽黏膜炎性组织标本，采用免疫组织化学SP方法检测鼻咽癌组织及慢性鼻咽黏膜炎性组织中 FOXC1的表达，并分析其表达与患者年龄、性别、临床分期和淋巴结转移的关系。结果FOXC1在鼻咽癌和鼻咽黏膜炎性组织中的表达主要定位于细胞核，但鼻咽癌组织中 FOXC1阳性表达率（84.16％）明显高于慢性鼻咽黏膜炎性组织中FOXC1阳性率（44．44％），差异有统计学意义（χ2＝65．213， P＜0．05）；FOXC1阳性表达率与患者性别、年龄及临床分期无明显关系，差异无统计学意义（P＞0．05），但随着临床分期的增高，FOXC1阳性表达率有随着增高的趋势；有淋巴结转移鼻咽癌患者 FOXC1阳性表达率（86．36％）明显高于无淋巴结转移的鼻咽癌患者FOXC1阳性表达率（69．23％），差异有统计学意义（χ2＝102．568，P＜0．05）。结论 FOXC1在鼻咽癌组织中表达明显上调，在鼻咽癌的发生发展过程中可能发挥着重要的作用，对临床诊断鼻咽癌具有指导意义。