LncRNA FOXD3-AS1靶向miR-127-3p对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)叉头盒转录基因D3反义RNA1(FOXD3-AS1)对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法采用0.001 mol/L的AngⅡ处理人主动脉VSMCs。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测FOXD3-AS1和miR-127-3p的表达水平。CCK-8、流式细胞术、Transwell、Western印迹检测细胞活力、凋亡、迁移、侵袭及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证FOXD3-AS1和miR-127-3p的靶向调控关系。结果AngⅡ诱导后VSMCs细胞存活率、迁移和侵袭细胞数、FOXD3-AS1、p-PI3K和p-AKT表达显著升高,凋亡率、miR-127-3p表达显著降低(P<0.05)。抑制FOXD3-AS1表达或过表达miR-127-3p后,AngⅡ处理的VSMCs细胞存活率、迁移和侵袭细胞数、p-PI3K和p-AKT表达显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05)。FOXD3-AS1靶向负性调控miR-127-3p表达。抑制FOXD3-AS1能够逆转抑制miR-127-3p对AngⅡ处理的VSMCs细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及p-PI3K和p-AKT表达的影响(P<0.05)。结论抑制FOXD3-AS1能够降低AngⅡ诱导的VSMCs细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制可能与上调miR-127-3p和抑制PI3K/AKT信号通路有关。

Lnc-FOXD3-AS1通过激活SMAD1/5/8促进缺铁性贫血大鼠体内Hepcidin表达

目的:探讨长链非编码RNA FOXD3-AS1(lnc-FOXD3-AS1)对缺铁性贫血(IDA)大鼠模型Hepcidin表达调控作用。方法:无特定病原级(SD大鼠)接受反复放血和饲喂低铁饲料诱导IDA模型。将大鼠分为对照组、IDA组、IDA大鼠经lnc-FOXD3-AS1过表达治疗组(pcDNA-FOXD3-AS1+IDA组)、IDA大鼠经过表达空载体治疗组(pcDNA-null+IDA组)、IDA大鼠经pcDNA-FOXD3-AS1联合Smad1/5/8的激活抑制剂Compound C治疗组(pcDNA-FOXD3-AS1+Compound C+IDA组),每组n=8。试剂盒法检测各组大鼠血液中铁含量,用qRT-PCR法检测肝脏组织和血清中lnc-FOXD3-AS1的表达,western blot和ELISA法检测大鼠肝脏组织和血清Hepcidin以及SMAD1/5/8蛋白的表达和激活。结果:IDA组的大鼠IDA模型诱导成功。与对照组比,IDA组中大鼠肝脏组织和血清中铁含量维持在缺铁状态(均P<0.05),且Hepcidin、lnc-FOXD3-AS1和SMAD1/5/8的表达水平都显著降低(均P<0.05),另外SMAD1/5/8的磷酸化水平明显降低(P<0.05)。与pcDNA-null+IDA组比,pcDNA-FOXD3-AS1+IDA组的肝脏组织和血清中铁含量明显增加(均P<0.05),且Hepcidin、lnc-FOXD3-AS1和SMAD1/5/8的表达水平都显著升高(均P<0.05),另外SMAD1/5/8的磷酸化水平明显升高(P<0.05)。与pcDNA-FOXD3-AS1+IDA组比,pcDNA-FOXD3-AS1+Compound C+IDA组的肝脏组织和血清中铁含量明显减少(均P<0.05),且Hepcidin和和SMAD1/5/8的表达水平都显著降低(均P<0.05)。结论:lnc-FOXD3-AS1在IDA大鼠体内低表达,其通过激活SMAD1/5/8信号促进IDA大鼠体内Hepcidin的表达。本研究对于更深入地理解IDA发生的生物学网络机制具有重要意义。

FOXD1、FOXD3蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及与临床特征和预后的相关性

目的分析食管鳞癌组织中叉头框转录因子D1(FOXD1)、叉头框转录因子D3(FOXD3)的表达情况及其与临床病理特征、预后的关系。方法收集本院2011年1月至2013年12月收治的105例食管鳞癌患者临床资料。比较食管鳞癌组织及癌旁正常组织中FOXD1与FOXD3的表达情况,并分析其与临床病理特征及与患者预后的相关性。结果食管鳞癌组织中FOXD1 mRNA相对表达量高于癌旁组织,而FOXD3 mRNA相对表达量低于癌旁组织(P<0.05)。并且癌组织中FOXD1阳性表达率显著高于癌旁正常组织,FOXD3阳性表达率低于癌旁正常组织(P<0.01)。FOXD1、FOXD3表达与患者年龄、病理分化程度无关(P>0.05),与患者肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度以及是否合并淋巴结转移相关,差异均具有统计学意义(P<0.05)。FOXD1表达阳性以及FOXD3表达阴性是影响食管鳞癌患者总生存的独立危险因素。结论FOXD1、FOXD3在食管鳞癌组织中异常表达,其表达与肿瘤恶性生物学行为有关,二者有望成为评估患者预后的潜在分子标志物。

CD44v6和FOXD3在人胃癌组织中的表达及临床意义

目的研究CD44v6和FOXD3蛋白在人胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化Envision二步法检测两种蛋白在100例人胃癌组织及40例癌旁正常胃黏膜组织和110例人胃癌组织芯片中的表达。结果传统病理切片中CD44v6蛋白在胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织的阳性表达率分别为88%、22.5%(P<0.001),与胃癌浸润深度、淋巴结转移、临床分期相关(P<0.001)。FOXD3蛋白在胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织的阳性表达率分别为22%、90%(P<0.001),与胃癌浸润深度、淋巴结转移、临床分期相关(P<0.001)。CD44v6与FOXD3表达呈显著负相关性(rs=-0.276,P<0.01)。CD44v6和FOXD3在110例胃癌组织芯片中的表达结果与以上传统切片中的表达情况相似。结论 FOXD3作为干细胞因子,其与胃癌生物学行为的关系以及与CD44v6的相关性提示FOXD3可能作为胃癌干细胞标记物。

乳腺浸润性导管癌中干细胞关键转录因子FoxD3的表达

目的探讨干细胞关键转录因子FoxD3在乳腺浸润性导管癌(invasive duct carcinomas,IDC)组织中的表达。方法采用免疫组化MaxVision法检测FoxD3、HER-2、Ki-67、ER和PR在79例乳腺IDC组织中的表达,HER-2结果附加荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)确诊。结果 FoxD3蛋白表达与患者年龄、病理分级、临床分期、HER-2状态和激素状态无明显相关(P>0.05)。与淋巴结未转移组相比,淋巴结转移组低表达FoxD3蛋白(P<0.05),HER-2和Ki-67表达明显增高。与三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)相比,其他型乳腺癌FoxD3表达明显增加。FoxD3蛋白与Ki-67增殖指数无明显相关性。结论 FoxD3低表达可能促进乳腺癌淋巴结转移,有可能成为治疗乳腺癌的重要靶点之一。

胃癌中FOXD3的表达及其与β-catenin表达的相关性

目的探讨FOXD3表达与胃癌临床病理学特征、预后及β-catenin表达的相关性。方法收集78例胃癌及癌旁组织,采用qRT-PCR法检测FOXD3 mRNA的表达,采用免疫组化EnVision法检测β-catenin的表达。结果FOXD3 mRNA在胃癌组织中的表达量为0.146±0.036,在癌旁组织中的表达量为-0.379±0.107,上调3.35倍(P=0.001)。FOXD3表达与胃癌分化程度和Lauren分型密切相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示,FOXD3高表达组总体生存率(overall survival,OS)比低表达组差(P=0.046)。Spearsman等级相关性分析结果显示,胃癌中FOXD3表达与β-catenin表达呈正相关(r=0.280,P=0.023)。结论FOXD3在胃癌组织中过表达并与胃癌组织分化程度、Lauren分型及预后密切相关,FOXD3可能通过Wnt/β-catenin信号促进胃癌的发生、发展,FOXD3可能是判断胃癌预后的分子标志物。

干细胞关键转录因子Foxd3在宫颈癌组织中的表达

目的:探讨宫颈癌中干细胞关键转录因子Foxd3的表达情况及意义。方法:采用RT-PCR方法检测21例宫颈癌组织及15例正常宫颈组织中的Foxd3 mRNA表达水平;采用组织芯片及免疫组织化学技术对31例宫颈癌组织和12正常宫颈组织中Foxd3的蛋白表达进行检测。结果:宫颈癌组织中Foxd3 mRNA的表达水平要高于正常宫颈组织(P<0.05),绝大多数的宫颈癌标本中都可见Foxd3蛋白在癌组织中表达,其表达概率要高于正常组织(P<0.05)。结论:宫颈癌组织中存在着干细胞性质的癌细胞,可能为宫颈癌治疗的一个潜在靶点。

FoxD3在胚胎发育和维持胚胎干细胞多能性的作用

学术背景:胚胎干细胞无论对转基因动物的制备还是对疾病的治疗都具有巨大的潜能,但前提是用于治疗的胚胎干细胞具有其特有的多能性和全能性,而FoxD3在胚胎发育和维持胚胎干细胞多能性都具有重要作用。目的:了解FoxD3在胚胎发育和维持胚胎干细胞多能性的作用。检索策略:应用计算机检索Pubmed 1996-09/2007-05期间的相关文章,检索词为"FoxD3",限定语言种类为英文。检索到67篇文章,排除重复的和与胚胎发育和胚胎干细胞相关性不大的文章,共纳入32篇文献。文献评价:32篇文献中分别涉及胚胎干细胞转录调节、FoxD3在胚胎发育和维持胚胎干细胞多能性的作用及其Foxd3在其他细胞中(骨髓细胞、神经嵴细胞、色素细胞)的功能等方面的内容。资料综合:胚胎干细胞具有其他细胞不可比拟的特性使胚胎干细胞应用广泛,要合理控制胚胎干细胞在体内和体外的分化,关键要了解那些控制胚胎干细胞命运的基因。FoxD3是叉头框(Forkhead box,Fox)家族中的一个转录调控因子,它对胚胎上胚层及其衍生物的形成和建立多潜能胚胎干细胞系具有重要作用,并与控制胚胎发育和胚胎干细胞多能性的其他转录调控因子有一定的联系。结论:FoxD3是维持胚胎上胚层细胞多潜能性和在体外建立胚胎干细胞系所必需的。

FoxD3与直肠癌患者临床病理特征的相关性研究

目的探讨FoxD3蛋白表达在原发性直肠癌中的意义。方法选取2005年6月至2010年6月该院收治的未行新辅助治疗而直接手术切除,且病理证实为原发性直肠癌的患者66例,共获得66份原发性直肠癌组织(研究组)和12份正常直肠黏膜组织(对照组)。比较2组FoxD3蛋白表达情况,分析FoxD3蛋白表达水平与临床病理特征的相关性。结果对照组FoxD3蛋白高表达比例明显高于研究组,差异有统计学意义(P<0.05)。在研究组中,FoxD3蛋白表达水平与原发性直肠癌患者的年龄、性别、分化程度、原发肿瘤浸润范围分期无相关性(P>0.05),而其与Dukes分期(P=0.001)、局域淋巴结分期(P=0.007)、远处转移分期(P=0.015)及3年生存期(P=0.038)显著相关。对于原发性直肠癌患者生存的独立预后因素,FoxD3蛋白低表达水平的风险比为3.589(95%CI 0.999～12.892,P=0.05)。结论在临床工作中,对FoxD3蛋白水平进行测定可能有助于对原发性直肠癌的发展、侵袭及转移程度进行评估,并且对预测患者的预后情况具有一定的参考价值。

FOXA1及FOXD3蛋白联合检测对胃癌临床诊断及患者生存率的意义

目的探讨FOXA1及FOXD3蛋白联合检测对胃癌临床诊断及患者生存率的意义。方法选取2015年1月至2017年1月间沈阳医学院附属中心医院收治的100例胃癌患者作为观察组,100例非胃癌者作为对照组。采用免疫组织化学染色法检测受试者通过胃镜检查采集的组织样本FOXA1及FOXD3蛋白表达水平,分析FOXA1及FOXD3蛋白检测对胃癌的临床诊断价值;对患者随访两年,分析FOXA1及FOXD3蛋白表达水平与患者生存率的关系。结果FOXA1、FOXD3在胃癌患者中的阴性表达率显著高于非胃癌患者(P<0.05),FOXA1、FOXD3蛋白联合检测有助于胃癌患者的临床诊断。FOXA1或FOXD3阳性表达胃癌患者生存率显著优于FOXA1或FOXD3阴性表达胃癌患者(P<0.05);FOXA1和FOXD3任一表达阳性胃癌患者生存率显著优于FOXA1及FOXD3指标双阴性胃癌患者(P<0.05)。结论采用FOXA1及FOXD3蛋白联合检测可提高胃癌临床诊断的敏感度,且FOXA1和FOXD3阳性表达常提示患者预估生存期较长。

FOXD3的空间结构和理化性质分析

FOXD3(Forkhead box D3)作为一个有价值的肿瘤预后标志物,其抑癌机制和预后价值仍未被完全阐明。为了全面认识FOXD3,本研究利用生物信息学手段,对FOXD3蛋白的氨基酸序列同源性、理化性质、组织表达、亚细胞定位、空间结构及蛋白质相互作用网络进行了预测和分析。结果表明:人FOXD3蛋白是酸性不稳定的亲水蛋白,在进化过程中高度保守,无信号肽和跨膜区域,属于FH超家族。该蛋白定位于细胞核的可能性最大,主要二级结构为无规卷曲。经GO分析和KEGG通路分析可知,与FOXD3相互作用的蛋白主要是转录因子,参与调控细胞干性的蛋白质和调控肿瘤细胞特性的蛋白质。本文结果为进一步研究FOXD3的功能及抑癌机制提供一定的参考。

FOXD3在肺癌细胞中的作用

目的研究FOXD3对肺癌细胞系A549增殖和迁移的影响。方法在TCGA数据库中对FOXD3在多种肿瘤中的表达情况进行分析。使用在线数据库GEPIA评估FOXD3mRNA表达对患者预后影响。构建FOXD3过表达肺癌细胞系并进行功能学实验检测FOXD3在肺癌中的作用。使用STRING数据库对FOXD3参与的调控网络进行预测。结果通过比对肿瘤的表达谱显示,FOXD3在肿瘤中具有差异性表达,其中FOXD3在皮肤黑色素瘤(SKCM)中表达上调,FOXD3在肿瘤中表达下调的有:结肠腺癌(COAD)、直肠腺癌(READ)、睾丸生殖细胞瘤(TGCT)。使用GEPIA数据库对肿瘤患者生存进行研究发现FOXD3与肺鳞癌(LUSC)、皮肤黑色素瘤(SKCM)、肾上腺皮质瘤(ACC)以及低分化胶质瘤(LGG)肿瘤患者总生存期有关。FOXD3能够抑制肺癌细胞增殖和迁移侵袭能力;通过使用STRING数据库发现FOXD3能够参与多种基因的表达调控。结论FOXD3过表达抑制肺癌细胞增殖和迁移侵袭能力并与患者预后密切相关,因此FOXD3能够作为指示肺癌良好预后的标志,并且为肿瘤治疗提供新思路。

转录组测序分析FOXD3基因对胃癌细胞调控的分子机制

目的探讨FOXD3在胃癌细胞中可能调控的基因,阐明其在胃癌发生、发展过程中的可能机制。方法 通过慢病毒感染技术建立FOXD3基因过表达MKN45细胞系及对照组MKN45细胞系,利用转录组测序技术检测两组细胞的基因表达谱,通过生物信息学方法比较两组细胞间的差异表达基因(DEGs),分析DEGs的基因本体论(GO)功能富集及京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集情况,并构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络。结果FOXD3基因过表达后,筛选出586个DEGs,其中343个DEGs表达上调,243个DEGs表达下调。GO功能富集结果显示,DEGs主要参与正向调控RNA聚合酶Ⅱ启动子转录、双向调控细胞增殖、细胞黏附、炎症反应等生物学过程。KEGG通路主要富集在PI3K-Akt信号通路、肿瘤相关通路、焦点粘连等。从PPI网络中筛选出前10个靶向基因AGT、BDKRB2、NMUR2、SAA1、CHRM1、ADRA1B、CXCL1、CXCR4、CXCL8、GNAI1,并揭示这些基因参与了G蛋白偶联受体信号通路、神经活性配体-受体相互作用、钙离子信号通路、趋化因子信号通路等重要途径。结论本研究一定程度上揭示了FOXD3基因可介导多个靶向基因,影响多条通路及生物学过程参与胃癌的发生、发展的可能分子机制,但仍需进一步进行研究验证。

香青兰总黄酮通过调控lncRNA FOXD3-AS1对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响

目的探讨香青兰总黄酮对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的影响及可能机制。方法不同浓度(25、50、100μg/mL)的香青兰总黄酮作用于ox-LDL诱导的HUVEC、ox-LDL诱导转染FOXD3-AS1小干扰RNA的HUVEC或香青兰总黄酮作用于ox-LDL诱导的转染FOXD3-AS1过表达载体的HUVEC后,检测细胞中MDA、SOD和GSH-Px水平,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达水平,RT-qPCR检测FOXD3-AS1表达水平。结果ox-LDL诱导HUVEC细胞后,细胞中MDA水平、细胞凋亡率、Bax蛋白和FOXD3-AS1表达升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);而香青兰总黄酮干预后,ox-LDL诱导的HUVEC细胞中MDA水平、细胞凋亡率、Bax蛋白和FOXD3-AS1表达降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。干扰FOXD3-AS1表达后,ox-LDL诱导的HUVEC细胞中MDA水平、细胞凋亡率和Bax蛋白表达降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。过表达FOXD3-AS1后,香青兰总黄酮处理的ox-LDL诱导的HUVEC细胞中MDA水平、细胞凋亡率和Bax蛋白表达升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。结论香青兰总黄酮可能通过下调FOXD3-AS1表达减轻ox-LDL诱导的HUVEC氧化应激和凋亡,保护细胞免受ox-LDL损伤。

FOXD3-AS1与miR-135a-5p的相互作用及对肾细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探究FOXD3-AS1与miR-135a-5p的相互作用及对肾细胞癌(RCC)ACHN细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法选取本院2017年1月—2019年12月RCC手术切除癌组织和癌旁组织60份,RT-qPCR检测组织和细胞中FOXD3-AS1和miR-135a-5p表达水平;ACHN细胞分别或联合转染si-NC、si-FOXD3-AS1-1、si-FOXD3-AS1-2、miR-NC、miR-135a-5p mimic、pcDNA3.1-FOXD3-AS1和miR-135a-5p inhibitor;行Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;行划痕闭合实验检测各组细胞迁移能力;行双荧光素酶实验检测靶向关系。建立裸鼠RCC移植瘤模型,分为si-FOXD3-AS1组和si-NC组,每组6只,建模后30 d处死测定移植瘤质量,采用免疫组织化学法检测Ki-67和E-cadherin阳性表达率。结果与癌旁组织比较,癌组织中FOXD3-AS1表达显著上升,miR-135a-5p表达显著下降(P<0.01)。FOXD3-AS1干扰显著降低细胞活力、侵袭数目和划痕闭合率(P<0.01)。FOXD3-AS1与miR-135a-5p存在靶向关系,FOXD3-AS1干扰可促进miR-135a-5p水平进而抑制ACHN细胞增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05,P<0.01)。在裸鼠实验中,FOXD3-AS1干扰抑制移植瘤生长,抑制Ki-67和E-cadherin阳性表达(P<0.01)。结论FOXD3-AS1通过下调miR-135a-5p促进RCC细胞增殖、迁移和侵袭,FOXD3-AS1和miR-135a-5p可能成为RCC治疗的潜在靶标。

长链非编码RNA FOXD3-AS1在部分肿瘤细胞中的表达及分子机制

长链非编码RNA(LncRNAs)是一组长度大于200个核苷酸的非编码RNA。因为缺少明显的开放阅读框,LncRNAs的蛋白质编码能力非常有限或无编码能力,但越来越多的研究报道表明,LncRNAs在肿瘤的复杂调控网络中有很大的作用,如肿瘤的增殖、侵袭等。LncRNA叉头盒D3反义RNA1(FOXD3-AS1),由4个外显子组成,位于FOXD3启动子上游染色体1p31.3处。LncRNA FOXD3-AS1最近被发现在各种恶性肿瘤中表现出异常的表达,包括结直肠癌、乳腺癌、胶质瘤、神经母细胞瘤、甲状腺癌等多种恶性肿瘤中均有异常表达,其调控的作用可能与肿瘤患者的生存和预后有关,在本文中,我们总结了目前关于LncRNA FOXD3-AS1在肿瘤进展中的生物学功能和分子机制。

长链非编码RNA FOXD3-AS1在急性髓系白血病中的表达及功能

目的探究长链非编码RNA FOXD3-AS1(LncRNA FOXD3-AS1)在急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(PBMCs)中表达及在AML中的功能。方法选择2015年1月-2017年6月血液科收治AML(非M3型)患者73例作为观察组,选择另选择同期健康志愿者75例作为对照组。采集两组观察对象骨髓标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测骨髓PBMCs中LncRNA FOXD3-AS1表达情况,分析LncRNA FOXD3-AS1表达与AML患者临床病理特征及预后的相关性;将Kasumi-1细胞按照随机数字表法分为Control组、干扰LncRNA RNA FOXD3-AS1表达(si-FOXD3-AS1)组,及LncRNA RNA FOXD3-AS1阴性对照组(si-NC),分别检测各组Kasumi-1细胞增殖、细胞周期、迁移侵袭与凋亡。结果与对照组比较,AML组患者PBMCs中LncRNA FOXD3-AS1表达水平显著升高[(1.58±0.42)vs(1.05±0.18)],差异有统计学意义(P<0.05);LncRNA FOXD3-AS1表达水平与AML患者危险度分层、白细胞计数(WBC)水平、血红蛋白(Hb)水平、血小板(PLT)水平有关(P<0.05),与年龄、性别、FAB亚型无关(P>0.05);LncRNA FOXD3-AS1高表达组AML患者3年存活率(48.41%)显著低于低表达组存活率(68.55%),差异有统计学意义(P<0.05);与si-NC组比较,si-FOXD3-AS1组细胞增殖活性、S期及G2/M期细胞比例、细胞迁移与侵袭显著降低,G0/G1期细胞比例与细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论LncRNA FOXD3-AS1在AML患者骨髓PBMCs中高表达,与患者危险度分层等病理特征及不良预后有关,抑制LncRNA FOXD3-AS1表达可显著抑制AML细胞增殖、迁移与侵袭。

胃癌组织中CD44v6和FOXD3的表达与临床意义

目的 探讨CD44v6和FOXD3蛋白在胃癌组织中的表达,分析两者与胃癌临床病理生物学行为的关系及两者之间的相关性。方法 采用免疫组织化学染色(Envision二步法)对80例胃癌组织、30例癌旁正常胃黏膜组织中CD44v6和FOXD3的表达进行检测。结果 胃癌组织中CD44v6的阳性表达率61.25%显著高于癌旁正常组织26.67%,而FOXD3蛋白在胃癌组织中阳性表达率40.0%则明显低于癌旁正常胃黏膜组织90.0%,差异有统计学意义(P<0.05);CD44v6和FOXD3蛋白在胃癌组织中的表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移、浸润程度等因素有关(P<0.05),与性别、肿瘤直径、年龄等因素无相关性(P >0.05);经Spearman等级相关分析,CD44v6﹑ FOXD3蛋白在胃癌组织中的表达差异有统计学意义,两者为明显负相关性(r s=﹣0.447,Z==2.053,P=0.040)。结论 CD44v6﹑ FOXD3蛋白可成为胃癌干细胞标记物,两者的联合检测可作为预测胃癌生物学行为的客观指标。其协同作用可纯化CSCs,利于对肿瘤进行CSCs靶向治疗,抑制胃癌浸润转移,从而改善预后。

沉默FOXD3-AS1调控miR-335-3p/PTEN对H_(2)O_(2)作用的神经细胞损伤的影响

目的探讨FOXD3-AS1对过氧化氢(H_(2)O_(2))作用的神经细胞损伤的影响及分子机制。方法PC12细胞随机分为Control组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+si-FOXD3-AS1组、H_(2)O_(2)+si-NC组、H_(2)O_(2)+miR-335-3p组、H_(2)O_(2)+miR-NC组、H_(2)O_(2)+si-FOXD3-AS1+anti-miR-335-3p组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测FOXD3-AS1和miR-335-3p的表达水平;蛋白质印迹法检测PTEN蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒检测细胞中CAT、SOD的活性以及MDA的含量;双荧光素酶报告实验检测FOXD3-AS1、miR-335-3p、PTEN的靶向关系。结果H_(2)O_(2)作用的神经细胞中FOXD3-AS1及PTEN表达水平升高,miR-335-3p表达水平降低,细胞活力降低,细胞凋亡率升高,CAT、SOD活性降低,MDA含量升高(P<0.05)。沉默FOXD3-AS1或过表达miR-335-3p后,PTEN表达水平降低,细胞活力升高,细胞凋亡率降低,CAT、SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05)。抑制miR-335-3p可逆转沉默FOXD3-AS1对H_(2)O_(2)处理的PC12细胞损伤的作用。FOXD3-AS1靶向miR-335-3p,miR-335-3p靶向PTEN。结论沉默FOXD3-AS1通过调控miR-335-3p/PTEN轴减轻H_(2)O_(2)作用的神经细胞损伤。

LncRNA FOXD3-AS1在卵巢癌SKOV3细胞中的表达及对SKOV3细胞恶性生物学行为的影响

目的探究LncRNA FOXD3-AS1在卵巢癌SKOV3细胞中的表达及影响SKOV3细胞恶性生物学行为的作用机制。方法收集2020年10月~2021年6月我院病理科经过临床确诊的55例卵巢癌患者,利用RT-qPCR技术分析卵巢癌组织、癌旁组织、SKOV3细胞和IOSE80细胞中FOXD3-AS1、miR-325和CDCA5的表达;siRNA靶向敲降FOXD3-AS1和CDCA5的表达,通过细胞克隆形成实验、细胞迁移实验和Western blot检测SKOV3细胞增殖、迁移及其EMT能力。miRanda、TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析LncRNA FOXD3-AS1与miR-325、miR-325与CDCA5之间的关系。miR-325 inhibitor转染细胞,或pcDNA-FOXD3-AS1与miR-325 mimics共转染细胞后分析SKOV3细胞增殖、迁移和EMT情况。结果与IOSE80细胞、癌旁组织对比,SKOV3细胞、卵巢癌组织内LncRNA FOXD3-AS1、CDCA5表达上调(P<0.01),miR-325表达下调(P<0.01)。siRNA靶向敲降FOXD3-AS1和CDCA5的表达抑制了SKOV3细胞增殖、迁移与EMT;LncRNA FOXD3-AS1的下游作用靶点为miR-325,miR-325的作用靶点为CDCA5;pcDNA-FOXD3-AS1与miR-325 mimics共转染细胞后部分逆转了miR-325 mimics转染细胞对SKOV3细胞增殖、迁移和EMT的抑制作用。结论LncRNA FOXD3-AS1在卵巢癌SKOV3细胞中表达上调及通过miR-325/CDCA5轴影响SKOV3细胞恶性生物学行为。