FOXP3^(+)肿瘤浸润性淋巴细胞与乳腺癌病理特征和预后的相关性研究

目的探讨FOXP3^(+)肿瘤浸润性淋巴细胞(TILs)与乳腺癌临床病理特征之间的相关性及其预后的意义。方法选取2009年1月至2013年5月期间首都医科大学附属北京世纪坛医院治疗的156例浸润性乳腺癌患者,采用免疫组化方法检测FOXP3^(+)和CD4^(+)的蛋白表达,记录患者的年龄、肿瘤大小、肿瘤分期、淋巴结转移情况、组织学分级、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体-2(HER-2)、Ki-67指数、无病生存(DFS)率和总生存(OS)率,探讨FOXP3^(+)TILs与临床病理特征之间的相关性,使用Kaplan-Meier曲线和Cox比例风险模型进行生存分析。结果156例浸润性乳腺癌患者的中位年龄为51岁(32~70岁),乳腺癌组织中,FOXP3^(+)高表达的患者51例(32.7%),FOXP3^(+)的表达在肿瘤的组织学分级(P=0.021)、PR(P=0.016)、HER-2(P=0.018)、Ki-67指数(P=0.042)、腋窝淋巴结转移(P=0.001)方面的差异均有统计学意义。CD4^(+)TILs的表达与所有患者的临床病理特征均无明显相关性。生存分析显示,FOXP3^(+)高表达患者的OS率低于FOXP3^(+)低表达患者的OS率(64.7%比87.6%,χ^(2)=15.3,P<0.001)。FOXP3^(+)高表达患者的DFS率也低于低表达患者的DFS率(56.9%比80.0%,χ^(2)=13.1,P<0.001),差异有统计学意义。在74例腋窝淋巴结转移阳性的患者中,FOXP3^(+)高表达患者的DFS率低于FOXP3^(+)低表达患者的DFS率,差异有统计学意义(χ^(2)=5.730,P<0.001)。在多因素Cox生存分析显示,FOXP3^(+)TILs是乳腺癌患者OS[HR=2.732(95%CI=1.174~6.207),P=0.023]和DFS[HR=2.092(95%CI=1.068~4.088),P=0.032]预后不良的独立影响因素。结论FOXP3^(+)高表达患者的OS率和DFS率均低于FOXP3^(+)低表达患者,FOXP3^(+)TILs可作为乳腺癌患者的独立不良预后因素。

结肠癌患者肿瘤浸润淋巴细胞表型与临床病理特征和肠道菌群的关系研究

目的探究结肠癌患者肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)表型与临床病理特征和肠道菌群的关系。方法选取2017年6月至2023年2月湖北省十堰市太和医院收治的76例结肠癌患者为结肠癌组,并选择同期体检的76例健康人为对照组。检测两组受试者TIL表型表达水平,荧光定量PCR检测肠道菌群,收集结肠癌患者临床病理资料。采用Spearman分析TIL表型与肠道菌群的相关性。结果与对照组相比,结肠癌组CD4^(+)T细胞水平显著升高[(28.05±5.48)%比(32.49±6.13)%],CD3^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞水平显著降低[(60.47±6.53)%比(53.17±6.37)%]、[(30.69±6.38)%比(24.85±6.42)%](P<0.05)。根据结肠癌患者CD3^(+)T细胞(52.62%)、CD8^(+)T细胞(25.87%)、CD4^(+)T细胞(31.94%)的中位值,将其分为CD3^(+)T细胞高表达38例,CD3^(+)T细胞低表达38例,CD8^(+)T细胞高表达38例,CD8^(+)T细胞低表达38例,CD4^(+)T细胞高表达38例,CD4^(+)T细胞低表达38例。有淋巴结转移、肿瘤分化程度越高、TNM分期越高,在CD3^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞高表达、低表达患者间差异有统计学意义(χ2=5.330、4.659、6.786;χ2=7.962、10.483、4.343;χ2=11.120、7.280、13.300;P<0.05)。与对照组相比,结肠癌组脆弱拟杆菌、大肠埃希菌、肠球菌数量显著增加[(6.58±0.83)lgN/g比(8.59±1.36)lgN/g]、[(7.36±1.04)lgN/g比(9.73±1.25)lgN/g]、[(7.21±1.08)lgN/g比(9.28±1.74)lgN/g],乳酸杆菌、双歧杆菌数量显著下降[(8.85±1.46)lgN/g比(6.34±1.22)lgN/g]、[(8.94±1.09)lgN/g比(6.17±1.32)lgN/g](P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,结肠癌患者脆弱拟杆菌、大肠埃希菌、肠球菌与CD3^(+)、CD8^(+)T细胞占比呈负相关(r=-0.482、-0.459、-0.532,P<0.05;r=-0.438、-0.472、-0.508,P<0.05),乳酸杆菌、双歧杆菌与CD3^(+)、CD8^(+)T细胞占比呈正相关(r=0.581、0.507,P<0.05;r=0.536、0.467,P<0.05),脆弱拟杆菌、大肠埃希菌、肠球菌与CD4^(+)T细胞占比呈正相关(r=0.483、0.495、0.461,P<0.05),乳酸杆菌、双歧杆菌与CD4^(+)T细胞占比呈负相关(r=-0.563、-0.579,P<0.05)。结论结肠癌患者TIL中表型CD3^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞与临床病理特征和肠道菌群存在一定关系。

淋巴结核患者外周血CD4^+CD25^(high)FoxP3^+调节性T淋巴细胞以及血浆IFN-γ和IL-10水平及其临床意义

目的研究淋巴结核患者外周血CD4+CD25highFoxP3+调节性T淋巴细胞(Treg)和干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)水平的变化及临床意义。方法采用流式细胞仪对100例淋巴结核患者及30名正常人外周血CD4+CD25highFoxP3+Treg和IFN-γ、IL-10水平进行检测。结果淋巴结核患者组与正常对照组比较,外周血CD4+CD25highFoxP3+Treg和IL-10水平均升高(P<0.05),而IFN-γ水平则降低(P<0.05)。在干酪样型、增殖型和混合型3种类型的淋巴结核病之间各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论淋巴结核患者细胞免疫功能明显异常。CD4+CD25highFoxP3+Treg和IFN-γ、IL-10在淋巴结核的发病过程中发挥了重要作用。

宫颈癌患者外周血中CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T淋巴细胞及血清中IL-10、TGF-β的表达及其临床意义

目的探讨宫颈癌患者外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)、T淋巴细胞亚群以及血清IL-10、TGF-β1、TGF-β2细胞因子的表达及其临床意义。方法选取32例宫颈癌患者和24位健康体检者为研究对象,采用流式细胞术检测受试者外周血中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比例、T淋巴细胞亚群细胞比例;采用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-10、TGF-β1、TGF-β2的含量。结果与健康对照组相比,宫颈癌组外周血中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比值明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),T淋巴细胞亚群(CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、CD19^+)比例差异无统计学意义(P>0.05),血清IL-10含量明显增高,TGF-β2含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),TGF-β1的含量差异无统计学意义(P>0.05);宫颈癌组手术后、化疗后CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比例,血清IL-10、TGF-β1、TGF-β2含量均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg与TGF-β1之间存在正相关(r=0.673,P<0.01)。结论宫颈癌患者CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比值增高,且与TGF-β1含量呈正相关,可能在宫颈癌的肿瘤发生发展及肿瘤免疫逃逸中起着重要作用。

S180腹水癌小鼠肿瘤浸润淋巴细胞中CD4^+CD25^+Treg细胞在肿瘤逃逸中的作用

目的:研究肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25+Treg细胞及免疫监视功能的变化,探讨CD4+CD25+Treg细胞在肿瘤免疫逃逸中的作用。方法:建立小鼠S180腹水癌模型,采集S180腹水癌小鼠TIL、脾脏细胞及对照组小鼠脾脏细胞,采用流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞、CD8+T细胞、NK细胞的数量及NKG2D的表达水平,采用RT-PCR方法检测Foxp3 mRNA的表达水平,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测CD8+T细胞的杀伤功能。结果:与对照组小鼠比较,S180腹水癌小鼠脾脏、TIL中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达均明显增高(P<0.05),并且肿瘤组小鼠TIL中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达较肿瘤组小鼠脾脏均明显增高(P<0.05);TIL中CD8+T细胞数量明显增高(P<0.05),其杀伤功能却有所下降;TIL中NK细胞数量及NKG2D表达均明显增高(P<0.05)。结论:肿瘤局部CD4+CD25+Treg细胞数量增加、功能增强,可能是肿瘤逃避免疫监视的机制之一。

Th9、Th17、CD4^+CD25^+FoxP3^+调节性T细胞在慢性淋巴细胞白血病患者外周血中的变化

目的探讨慢性淋巴细胞白血病患者外周血中Th9、Thl7和CD4^+CD25^+FoxP3^+调节性T细胞及相关细胞因子的表达水平及意义。方法采用流式细胞仪检测36例CLL患者和45例健康对照组外周血Th9、Th17和Treg细胞的表达率,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测外周血中细胞因子IL-9、IL-17、TGF-β的表达水平。结果 1)CLL组患者外周血Th9、Th17细胞比例及细胞因子IL-9、IL-17浓度均明显高于健康对照组[(1.29±0.35)%vs(0.74±0.23)%,P<0.05;(2.15±0.46)%vs(1.08±0.37)%,P<0.05;(24.25±7.05)%vs(16.35±5.42)%,P<0.05;(11.47±3.99)%vs(7.36±2.85%),P<0.05]。CD4^+CD25^+FoxP3^+细胞比例及细胞因子TGF-β浓度明显低于对照组[(4.76±0.89)%vs(7.26±1.95)%,P<0.05;(3.82±1.39)%vs(6.82±2.01)%,P<0.05]。2)相关性分析:患者Th9、Th17细胞比例及IL-9、IL-17浓度与淋巴细胞计数负相关(γ_s=-0.374,P=0.034;γ_s=-0.382,P=0.032;γ_s=-0.445,P=0.011;γ_s=-0.413,P=0.024);患者Treg细胞比例及TGF-β浓度与淋巴细胞计数正相关(γ_s=0.416,P=0.023;γ_s=0.403,P=0.028)。结论慢性淋巴细胞白血病患者Th9、Th17与CD4^+CD25^+FoxP3^+调节性T细胞比例失衡,血清IL-9、IL-17和TGF-β水平变化,这些原因可能参与慢性淋巴细胞白血病的免疫发病过程。

探究CEACAM6与FOXP3对胰腺癌肿瘤浸润淋巴细胞和预后的影响

目的：分析在胰腺癌肿瘤浸润的淋巴细胞预后方面CEACAM6和FOXP3产生的影响。方法：搜集2015年12月至2016年12月在中南大学湘雅医院治疗的胰腺癌患者45例，通过免疫组织的化学法对患者胰腺癌组织之中RO、CEACAM6、CD45、FOXP3、CD8与CD3表达进行检测，同时探讨各种指标和病理特征、预后之间的相关性。结果：FOXP3的表达和CD45RO、CD3以及CD8阳性T细胞低浸相关，但是和CD4+T的细胞浸润没有显著相关性；CEACAM6高表达和CD45RO+T细胞、CD8+T细胞低浸润相关，和CD4+T细胞、CD3+T细胞浸润没有明显的关系。结论：肿瘤浸润的淋巴细胞浸润密度和胰腺癌预后、临床分期以及组织分化息息相关，CEACAM6与FOXP3和胰腺癌的恶性程度有着相关性，且都可以对肿瘤浸润的淋巴细胞进行抑制。

肿瘤浸润性淋巴细胞亚群的功能研究及其受体克隆

目的比较肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)各亚群体外特异性杀伤肿瘤功能,摸索TIL细胞表面受体(TCR)互补决定区3(CDR3)基因体外扩增的方法,为寻找TIL细胞中肿瘤特异性抗原受体奠定前期实验基础。方法从肺癌肿瘤组织中分离出TIL细胞,利用CD8、PD-1抗体将TIL细胞分群,实时无标记细胞功能分析技术(real time cellular analysis,RTCA)分析比较各亚群细胞特异性杀伤活性。利用巢式RT-PCR的方法建立TCR VαCDR3区基因体外扩增的方法。结果TIL细胞中CD3^+CD8^+(CTL)细胞亚群占75.7%,PD-1的表达约为29.7%;CD8^+PD-1^+TIL细胞亚群比CD8^+PD-1-TIL细胞具有更强的体外杀伤原代肿瘤细胞功能;巢式RT-PCR成功扩增出TCR Vα1CDR3区基因片段。结论CD8^+PD-1^+TIL细胞亚群具有较强的特异性杀伤肿瘤活性;建立了通过巢式RT-PCR体外成功获取TCR所有CDR3区基因片段的实验条件。

肝细胞癌组织中Foxp_(3)^(+)调节性T淋巴细胞表达水平及其与肿瘤免疫相关性研究

目的:探讨原发性肝细胞癌(HCC)组织中Foxp_(3)^(+)调节性T淋巴细胞(Foxp_(3)^(+)Treg)表达水平及其与肿瘤免疫的相关性。方法:选取40例HCC组织和40例癌旁组织,应用免疫组化方法检测肝癌组织和癌旁组织中的Foxp_(3)^(+)Treg和CD8^(+)细胞毒性T淋巴细胞(CD8^(+)CTL)的表达情况,分析Foxp_(3)^(+)Treg与CD8^(+)CTL的关系,最后分析肿瘤切除术后Foxp_(3)^(+)Treg表达水平的变化。结果:肝细胞癌组织、癌旁组织Foxp_(3)^(+)Treg、CD8^(+)CTL表达和Foxp_(3)^(+)Treg/CD8^(+)CTL比值对比差异有统计学意义(均P<0.01);不同性别、肿瘤位置、术前AFP水平、肿瘤病理分级的HCC患者Foxp_(3)^(+)Treg水平对比差异无统计学意义(均P>0.05),不同肿瘤大小的Foxp_(3)^(+)Treg水平对比差异有统计学意义(P<0.05);癌组织中Foxp_(3)^(+)Treg与CD8^(+)CTL呈负相关(r=0.425,P=0.024),Foxp_(3)^(+)Treg越多,CD8^(+)CTL越少;术后3个月进行跟踪监测发现,术后患者外周血中的Foxp_(3)^(+)Treg水平为(5.98±1.34)%,手术前为(9.67±2.25)%,术后明显低于手术前,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:肝细胞癌组织中Foxp_(3)^(+)Treg通过抑制CD8^(+)CTL的增殖,可抑制其抗肿瘤作用;通过手术可在一定程度上清除免疫抑制,Foxp_(3)^(+)Treg升高与CD8^(+)CTL降低可能参与肝肿瘤细胞免疫逃逸,因此可以通过检测Foxp_(3)^(+)Treg与CD8^(+)CTL来评价HCC患者的细胞免疫功能。

结直肠腺癌侵袭性前缘的生长方式及肿瘤细胞巢出芽和CD8^+T淋巴细胞浸润与其临床病理学特征的关系

目的:观察结直肠腺癌侵袭性前缘的生长方式,计数肿瘤细胞巢出芽的数量和CD8^+T淋巴细胞浸润的数量,探讨以上参数与相关临床病理学特征的关系。方法:收集2008年1月至2019年12月在河西学院附属张掖人民医院院行手术切除的126例原发性结直肠腺癌患者的石蜡包埋样本,运用免疫组织化学方法对126例病理切片进行染色,广谱CK用于标记肿瘤细胞巢出芽,CD8标记T淋巴细胞进行评估。结果:结直肠腺癌侵袭性前缘的浸润性生长方式,高级别肿瘤细胞巢出芽与肿瘤大小病理分期(pT)(P=0.029,P<0.001),淋巴结转移病理分期(pN)(P<0.001,P=0.023)及脉管浸润相关(P<0.001,P<0.001);高级别肿瘤细胞巢出芽与肿瘤组织学低分化程度相关(P<0.001);高级别CD8^+T淋巴细胞浸润可能与阻碍肿瘤细胞淋巴结转移相关(P=0.050)。结论:结直肠腺癌侵袭性前缘的浸润性生长方式,高级别肿瘤细胞巢出芽与患者预后相关,两种组织学形态特征易于观察,可重复性好,借助于广谱CK免疫组织化学染色,可作为判断患者预后的指征。

FOXP3^+Treg细胞对浸润性乳腺癌患者新辅助化疗疗效的预测价值分析

目的观察新辅助化疗对浸润性乳腺癌患者外周血及组织中CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的影响,探讨FOXP3+Tregs对乳腺癌新辅助化疗疗效的预测价值。方法回顾性分析郑州大学第一附属医院2013年1月至2014年12月期间收治的73例治疗前均经病理活检证实的女性浸润性乳腺癌患者,采用TAC方案(多西他赛+阿霉素+环磷酰胺)新辅助化疗2个周期。采集新辅助化疗前1 d和化疗后第10天的外周静脉血,应用流式细胞仪检测外周血中CD4+、Treg细胞的变化;采用免疫组化法检测乳腺癌组织中FOXP3的表达,评估患者新辅助化疗后的疗效,并分析FOXP3+Tregs的高低与病理完全缓解率(p CR)之间的关系。结果乳腺癌患者新辅助化疗后外周血中Treg细胞明显下降,CD4+细胞及CD4+细胞/Treg细胞显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。化疗后57例有效组患者Treg细胞较16例无效组患者明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。p CR为17.8%,而FOXP3+Tregs高表达患者较低表达患者病理完全缓解率低(P=0.016)。结论新辅助化疗可降低乳腺癌患者外周血Treg细胞的比例;乳腺癌组织中Treg细胞FOXP3表达水平可预测乳腺癌新辅助化疗的疗效,将作为指导乳腺癌治疗的一个潜在指标。

肿瘤浸润淋巴细胞与EBV相关性胃癌侵袭及预后分析

目的探讨表达叉头框蛋白3(forkhead box P3,FOXP3)、CD8和CD4的浸润性淋巴细胞在EBV相关性胃癌进展及预后评估中的意义。方法采用免疫组化法检测61例EBV相关性胃癌及299例EBV阴性富于淋巴间质胃癌肿瘤浸润淋巴细胞中FOXP3、CD8和CD4的表达,计数阳性淋巴细胞,并分为高浸润组及低浸润组,分析其与临床病理特征及预后的相关性。结果EBV相关性胃癌组中FOXP3^+、CD8^+和CD4^+浸润性淋巴细胞数及CD8^+/CD4^+比值均大于EBV阴性胃癌组(P <0. 001)。EBV相关性胃癌FOXP3^+和CD8^+淋巴细胞高浸润组比低浸润组肿瘤浸润深度浅,脉管内癌栓形成率较低,5年生存率高(P <0. 05)。EBV阴性富于淋巴间质胃癌中FOXP3^+、CD8^+淋巴细胞浸润与预后无明显相关。结论 EBV相关性胃癌具有独特免疫微环境,FOXP3^+和CD8^+淋巴细胞浸润均与其肿瘤进展及预后相关。

浸润性膀胱癌组织中E2F3表达与CD8^+ T细胞浸润数量的相关性分析

目的探讨膀胱癌组织中E2F转录因子3(E2F3)表达与CD8^+T细胞浸润的特点及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的相关性。方法采用免疫组织化学染色法检测110例不同病理分期、分级的膀胱癌组织和相应正常膀胱组织中E2F3的表达情况及CD8^+T细胞浸润特征,Western blot法检测82例膀胱癌组织及相应正常膀胱组织中E2F3、CD8蛋白水平,直线相关分析方法分析E2F3表达与CD8^+T细胞浸润的相关性。结果膀胱癌组织中E2F3高表达,膀胱癌组织中E2F3表达随肿瘤分期、分级增加逐步增高,而相应肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目逐步减少,E2F3高表达组肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目显著低于E2F3低表达组。E2F3阳性率及CD8^+T细胞的浸润数量减少与肿瘤病理分期、分级、肿瘤大小、伴有淋巴结转移或远处转移等肿瘤临床侵袭性指标密切相关。相关性分析显示肿瘤E2F3表达水平与肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目呈负相关。生存分析表明E2F3高表达患者术后5年预后更差。结论膀胱癌组织中E2F3水平与肿瘤侵袭性关系密切,与肿瘤内CD8^+T细胞浸润数量呈负相关。

CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞与肿瘤及器官移植研究进展

CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞是新近发现的一种抑制机体疾病的一种调节性T细胞。CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可以调节机体T细胞稳态,抑制机体免疫耐受、肿瘤增殖和转移、控制感染及移植免疫耐受等作用,是肿瘤进展和转移的重要标志。转录因子叉头（Foxp3^＋）的表达在CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的发育、成熟及发挥抑制功能过程中起重要作用,是其重要的标志物。

Ⅳ期恶性肿瘤患者外周血CD4^+CD25^+FOXP3^+Treg细胞的测定

目的通过检测Ⅳ期恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg(Treg)细胞的情况,探讨Ⅳ期肿瘤患者免疫功能状态。方法选择本院肿瘤科收治的99例Ⅳ期恶性肿瘤患者和16例健康对照组,均在接受化疗前空腹抽取外周血样本并在流式细胞仪上做Treg细胞的测定。结果Ⅳ期恶性肿瘤患者外周血Treg细胞百分比水平为(9.99±7.73)%,健康对照组为(11.93±9.78)%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);若以患者的Treg细胞百分比平均值10%为基线,发现全组病例只有36.36%(36/99)的患者外周血Treg细胞百分比高于基线水平。结论Ⅳ期恶性肿瘤患者外周血Treg细胞整体水平低于健康人群;但部分病例存在百分比增高现象。

肺癌患者CD4^+ CD25^(high) Foxp3^+调节性T细胞的格局变化及意义

目的:研究肺癌患者外周血(PBMC)及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25h ighFoxp3+调节性T细胞(Treg)的比例改变,探讨其在抗肿瘤免疫中的调节作用。方法:分离肺癌患者PBMC及TIL,FACS分析CD4+/CD8+T细胞的比值及CD4+CD25h ighT细胞占CD4+T细胞的比例。Real-tim e PCR检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在PBMC及TIL中的表达。结果:肺癌患者PBMC及TIL中CD4+/CD8+比值降低;而CD4+CD25h ighT细胞在CD4+T细胞中所占比例升高;Foxp3基因仅在TIL中高表达,而在PBMC中低或不表达,表明肿瘤局部的CD4+CD25h ighT细胞主要是CD4+CD25h ighFoxp3+Treg。结合临床资料分析显示Treg在肺腺癌比例较高。结论:CD4+CD25h ighFoxp3+Treg在肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中明显升高,可能与其通过细胞与细胞间接触抑制CD8+T细胞的杀伤效应,最终发挥免疫抑制效应相关。

肺癌和乳腺癌患者外周血中CD4^+CD25^+T细胞及foxp3 mRNA的变化特点及临床意义

目的:探讨肺癌、乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平的变化及临床意义。方法:应用流式细胞术检测9例肺癌、9例乳腺癌患者及10例非肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例,应用RT-PCR技术检测人外周血PBMCfoxp3基因的表达。结果:流式细胞术检测显示,肺癌及乳腺癌患者外周血PBMC中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例[(21·30±11·26)%]高于非肿瘤患者[(14·19±8·56)%](P<0·05),肺癌及乳腺癌患者外周血PBMC中foxp3mRNA的表达水平高于非肿瘤患者表达水平(P<0·05),肺癌和乳腺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例增加。结论:CD4+CD25+调节性T细胞在维持自身免疫稳定的同时对肿瘤免疫具有抑制作用,该细胞群比例的增加可能参与肿瘤的发生。

CD4^+CD25^+Treg在急性淋巴细胞白血病患者外周血中的表达及其体外实验研究

目的初步探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+ regulatory T cells,CD4+CD25+Treg)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)患者化疗前及化疗缓解后外周血中的表达水平,并研究患者血清能否诱导外周血CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+Treg。方法①采用流式细胞术分别检测ALL初诊组、化疗完全缓解或部分缓解组及正常对照组外周血中CD4+CD25+T细胞所占比例,然后通过荧光定量RT-PCR检测各组外周血中转录因子Foxp3mRNA的表达水平,并逐层分析比较。②采集正常人外周血单个核细胞后,对照组用正常人血清,实验组用患者血清并分别设浓度梯度进行培养,72h后采用流式细胞术、荧光定量RT-PCR分别检测CD4+CD25+T细胞和Foxp3mRNA表达。结果ALL化疗缓解组CD4+CD25+T细胞及Foxp3mRNA表达水平均明显高于ALL初诊组和正常对照组(P<0.05),后两者之间CD4+CD25+T细胞水平无统计学差异(P>0.05),但ALL初诊组Foxp3mRNA含量较正常对照组明显升高(P<0.01),差异具有统计学意义;并且血清培养对照组CD4+CD25+T细胞水平及Foxp3mRNA含量均明显低于实验组(P<0.05),且其表达并不随血清浓度的增加而升高。结论CD4+CD25+Foxp3+Treg在ALL初诊组及化疗缓解组患者外周血中比例明显升高,且初步表明患者血清中的可溶性物质可诱导外周血CD4+CD25+T细胞转化为CD4+CD25+Treg,提示CD4+CD25+Treg可能是ALL免疫抑制的一个重要原因。

结核患者外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达与巨噬细胞凋亡的临床意义

目的探讨结核病患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T淋巴细胞(Treg)表达与单核巨噬细胞(MΦ)凋亡的可能关系及临床意义。方法用流式仪测定29例活动性结核、17例肺外结核患者治疗前及治疗后3、6个月PBMC中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达及MΦ凋亡率,并与20例健康对照者(健康对照组)进行比较。结果活动性结核患者PBMC中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达明显高于健康对照组和治疗后患者,且复治患者高于初治患者,肺外结核高于肺结核;患者MΦ凋亡率明显高于健康对照组(P<0.01),初治组明显高于复治组(P<0.01)。活动性结核患者PBMC中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达与MΦ凋亡呈负相关。结论 CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg表达升高,MΦ凋亡下降,提示与结核病呈慢性感染有关。

扶肺煎对Lewis肺癌移植瘤生长及肿瘤微环境中Foxp3^(+)Tregs、Foxp3、IL-10、TGF-β的影响

目的研究扶肺煎对C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤生长及肿瘤微环境中Foxp3^(+)Tregs、Foxp3、IL-10、TGF-β的影响。方法选取雄性C57BL/6小鼠建立Lewis肺癌移植瘤模型,随机分为6组:模型组,扶肺煎低、中、高剂量组,顺铂组和扶肺煎中剂量联合顺铂组,每组8只。观察小鼠的一般情况及移植瘤大小。给药第15天后剥离肿瘤组织,计算各组抑瘤率;FCM检测肿瘤微环境中Foxp3^(+)Tregs数量;免疫组化法检测Foxp3表达量;ELISA检测外周血细胞因子IL-10、TGF-β的表达水平。结果与模型组比较,各组平均瘤重均减小,顺铂组、扶肺煎中剂量联合顺铂组缩小明显(P<0.01),扶肺煎中剂量联合顺铂组抑瘤率最高(64.23%);扶肺煎中剂量联合顺铂组移植瘤中Foxp3^(+)Tregs数量减少(P<0.05),其余各实验组Foxp3^(+)Tregs数量减少均无统计学意义;扶肺煎高剂量组、顺铂组、扶肺煎中剂量联合顺铂组移植瘤中Foxp3表达量下降(P<0.01)。扶肺煎中剂量组、扶肺煎高剂量组、顺铂组、扶肺煎中剂量联合顺铂组外周血中细胞因子IL-10、TGF-β水平下降(P<0.01),IL-10下降幅度大。与顺铂组相比,扶肺煎中剂量联合顺铂组IL-10水平下降(P<0.01)。结论扶肺煎能有效抑制肺癌移植瘤的生长,对调控移植瘤微环境中Foxp3^(+)Tregs数量影响不明显,对干预肿瘤微环境中Foxp3、TGF-β具有一定影响,对IL-10的影响十分显著。