RAGE阻断剂FPS-ZM1对糖基化终末产物所致大鼠脑部炎症反应的影响及机制

目的探讨RAGE受体特异性阻断剂FPS-ZM1对糖基化终末产物(AGEs)所致大鼠脑部炎症反应及认知功能的影响。方法将40只大鼠随机分为四组:生理盐水组(NC组)FPS-ZM1对照组、AGEs组和FPS-ZM1组,采用脑立体定位技术,向AGEs组及FPS-ZM1组大鼠两侧海马注射AGEs 5μl,以制造动物损伤模型,用同样方法向NC组及FPS-ZM1对照组注射等量生理盐水,以制造模型对照;造模前1 w以1 mg·kg-1·d-1FPS-ZM1向FPS-ZM1组和FPS-ZM1对照组大鼠进行腹腔注射,并连续4 w给药,AGEs组、NC组则同时注射相同体积生理盐水,造模3 w后对各组大鼠进行Morris水迷宫实验,检测各组大鼠逃逸潜伏期(EL);用Elisa检测各组大鼠海马区Aβ1~40,Aβ1~42的水平;用Western印迹检测各组大鼠RAGE,p-NF-κB和肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白的表达;用免疫组织化学法检测各组大鼠海马区TNF-α蛋白的表达强度。结果 AGEs组与其他各组相比,EL显著延长(P【0.01),且Aβ1~40、Aβ1~42浓度均显著升高(P【0.01);同时AGEs组RAGE、p-NF-κB和TNF-α的蛋白表达明显增强(P【0.01);FPS-ZM1干预后上述各指标均明显低于AGEs组。结论 FPS-ZM1作为RAGE受体特异性阻断剂,能作用中枢系统减少Aβ1~40,生成从而提高AGEs脑损伤大鼠的智能,并通过抑制脑组织p-NF-κB上调,减轻脑AGEs损伤引起的炎性反应。该药因能透过血脑屏障有望成为抑制阿尔茨海默样病变的有效措施。

RAGE阻断剂FPS-ZM1减轻异氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍

目的探讨RAGE阻断剂FPS-ZM1对异氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍的影响。方法将老龄大鼠60只，随机分为4组（n=15）：NS＋O2组、NS＋ISO组、FPS-ZM1＋ISO组及FPS-ZM1＋O2组。NS＋O2组及NS＋ISO组，侧脑室注射无菌0．9％氯化钠溶液10μL，FPS—ZM1＋ISO及FPS-ZM1＋O2组，侧脑室注射FPS—ZM110μL（5g/L）。侧脑室注射后24h，NS＋O2及FPS-ZM1＋O2组吸入含有30％氧气的空氧混合气体4h，FPS-ZM1＋ISO及FPS-ZM1＋ISO组吸入2％异氟醚＋100％氧气4h。用Morris水迷宫评测大鼠学习和记忆功能，用免疫组织化学技术观察海马CA1区RAGE及Aβ的表达。结果与NS＋O2组相比，NS＋ISO组第1～4天逃避潜伏期延长、探索时间缩短、海马CA1区RAGE表达上调、A8表达上调。与NS＋ISO组相比，FPS—ZM1＋ISO组第1—4天逃避潜伏期缩短，探索时间延长，RAGE表达下调、A9表达下调。结论RAGE阻断剂FPS—ZM1可改善异氟醚麻醉诱发老年大鼠认知功能障碍，其机制可能与其抑制海马CA1区Aβ沉积有关。

FPS-ZM1和mNGF对癫痫幼鼠脑内HMGB1和TRX表达的影响

目的研究晚期糖基化终末产物(RAGE)受体阻断剂FPS-ZM1和鼠神经生长因子(mNGF)对戊四氮致痫幼鼠海马区高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和硫氧还蛋白(TRX)表达的影响。方法取130只清洁级Wistar雄性大鼠幼崽,随机分为4组,即A组(空白对照组)、B组(癫痫对照组)、C组(mNGF干预组)和D组(FPS-ZM1干预组)。幼鼠腹腔注射戊四氮40 mg/kg建立癫痫模型,建模成功后,4组均连续干预1周,其中A组和B组腹腔注射等剂量生理盐水,C组和D组分别腹腔注射mNGF 4μg/kg、FPS-ZM1 1 mg/kg,干预结束后,各组分别于3、24、72 h时段麻醉后分离海马组织。采用Western-blot方法测定海马HMGB1的含量,ELISA法检测海马TRX的浓度。结果 A组大鼠未见惊厥发作,海马区HMGB1表达水平在各时段均明显低于B组、TRX浓度均高于B组,差别有统计学意义(P<0.001);D组和C组的HMGB1表达水平在各时段均低于B组、TRX浓度均高于B组,差别有统计学意义(P<0.05);D组的HMGB1表达水平在3、24 h时段较C组下降,差别有统计学意义(P<0.05),在72 h时段与C组的差别则无统计学意义(P>0.05)。结论 FPS-ZM1和mNGF具有减轻癫痫幼鼠脑损伤的作用,其机制可能是通过减轻大脑的炎症反应和氧化应激来实现的。

RAGE阻断剂FPS-ZM1对心肌缺血再灌注损伤的作用研究

目的探讨晚期糖基化终末端产物受体(RAGE)阻断剂FPS-ZM1对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用及机制。方法将32只8~9周龄C57/B6小鼠随机分为4组:假手术组(sham组),FPS-ZM1对照组(FZM1组),缺血再灌注组(I/R组),FPS-ZM1干预组(FZM1+I/R组)。通过结扎冠状动脉前降支,建立小鼠心肌缺血再灌注模型。FPS-ZM1干预组小鼠手术前腹腔注射FPS-ZM1药物。采用小鼠心超仪检测血流动力学指标,运用苏木精-伊红(HE)染色法观察心肌组织的炎症程度,蛋白印迹法检测心脏组织中RAGE、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、P-ERK/ERK蛋白的表达。结果与sham组相比,I/R组心肌发生明显炎症,左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(LVFS)降低(P<0.05),RAGE、HMGB1(P<0.05)的表达水平明显增加;与I/R组相比,FPZM1+I/R组以上结果得到相反趋势。结论 FPS-ZM1能够通过抑制RAGE与HMGB1二者的结合,进而激活MAPK/ERK信号分子的表达来减轻MIRI的发生发展。

晚期糖基化终产物受体阻断剂FPS-ZM1减缓ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进展的作用

目的 研究晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)阻断剂FPS-ZM1对ApoE-/-小鼠高脂喂养后动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)进展的干预作用。方法 ApoE-/-小鼠随机分成对照组(普通喂养),AS模型组(高脂喂养),FPS-ZM1干预组(高脂喂养+FPS-ZM1干预),每组8只。取小鼠血测定血脂浓度;取小鼠主动脉根部切片油红O染色及苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色测量阳性斑块面积比(%)并观察AS病理形态学改变;组织蛋白免疫印迹实验以及免疫组化(immunohistochemistry,IHC)评估主动脉RAGE表达情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)浓度。结果 AS模型组小鼠总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。油红O染色及HE染色显示AS模型组小鼠主动脉斑块比例较对照组显著增加(P<0.01),而FPS-ZM1干预组小鼠斑块比例较AS模型组减少(P<0.01),差异有统计学意义。主动脉Western blot以及主动脉切片免疫组化均显示模型组小鼠RAGE较对照组表达显著增高(P<0.01),FPS-ZM1干预组小鼠RAGE较AS模型组表达降低(P<0.05)。AS模型组小鼠血浆TNF-α、PAI-1浓度较对照组均显著升高(P<0.01),FPS-ZM1干预后小鼠血浆TNF-α、PAI-1浓度较AS模型组降低(P<0.05),差异均有统计学意义。结论 RAGE阻断剂FPS-ZM1具有减缓AS进展的作用,其机制可能是通过降低炎症因子TNF-α和PAI-1浓度而发挥作用。本研究结果将为开发以RAGE为靶点的预防AS药物提供理论基础。

RAGE阻断剂FPS-ZM1对高糖环境人牙周膜成纤维细胞增殖、迁移的影响

目的:通过FPS-ZM1封闭RAGE功能,观察拮抗RAGE对于高糖环境下hPDLFs增殖、迁移的影响,探讨将RAGE作为药物靶点改善高糖环境下牙周膜损伤修复的可行性。方法:采用Western Blot检测高糖环境中hPDLFs细胞RAGE的表达,利用不同浓度FPS-ZM1体外培养hPDLFs细胞,分别通过CCK-8实验和划痕实验测定细胞的增殖能力和迁移能力。结果:高糖环境下hPDLFs的RAGE表达明显升高。FPS-ZM1对hPDLFs的增值有明显的促进作用,以250nM时促增值效果最好,且FPS-ZM1组细胞迁移能力大于无FPS-ZM1组。结论:在一定浓度范围内,FPS-ZM1能促进高糖环境hPDLFs的增殖和迁移。

RAGE抑制剂FPS-ZM1对db/db小鼠抑郁的影响及机制

目的阐明晚期糖基化终末产物受体(RAGE)抑制剂FPS-ZM1影响2型糖尿病模型(db/db)小鼠抑郁的分子机制。方法雄性6~8周龄db/db小鼠24只,随机分为2型糖尿病组(db/db)、糖尿病给药组[db/db+FPS,FPS-ZM1腹腔注射1.0 mg/(kg·d)]、糖尿病溶剂对照组(db/db+Oil,小鼠给予同等体积的玉米油腹腔注射)。另外8只同周龄的雄性db/m小鼠作为正常对照。给药12周后,悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠的抑郁样行为,TUNEL染色法检测小鼠海马区神经元的凋亡情况,免疫印迹技术检测小鼠海马区RAGE、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、白介素-1β(IL-1β)以及半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)的表达情况。结果db/db小鼠出现抑郁症状,FPS-ZM1能够改善其抑郁样症状;db/db小鼠海马区神经元的凋亡率显著高于db/m小鼠(P<0.01),FPS-ZM1能够显著降低db/db小鼠海马神经元的凋亡率(P<0.01);db/db小鼠海马区RAGE、NLRP3、IL-1β以及Caspase-1的表达显著高于db/m小鼠(P<0.01),FPS-ZM1能够抑制RAGE、NLRP3、IL-1β以及Caspase-1的表达。结论FPS-ZM1通过抑制RAGE及其下游NLRP3信号通路,降低海马神经元凋亡,改善糖尿病小鼠的抑郁症状。