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香蕉红素氧还蛋白基因在酵母双杂交系统中的自激活检测
1
作者
程萍
冯仁军
+3 位作者
袁克华
张丽丽
祁君凤
张银东
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2010年第2期47-50,共4页
利用PCR方法扩增香蕉红素氧还蛋白基因的保守结构域序列CdRD和开放性阅读框序列FRD,并在其上下游分别引入NdeⅠ和SalⅠ酶切位点,双酶切后与同样经NdeⅠ和SalⅠ双酶切的诱饵质粒载体pGBKT7连接,构建重组诱饵质粒pGBKT7-CdRD和pGBKT7-FRD...
利用PCR方法扩增香蕉红素氧还蛋白基因的保守结构域序列CdRD和开放性阅读框序列FRD,并在其上下游分别引入NdeⅠ和SalⅠ酶切位点,双酶切后与同样经NdeⅠ和SalⅠ双酶切的诱饵质粒载体pGBKT7连接,构建重组诱饵质粒pGBKT7-CdRD和pGBKT7-FRD,并将此两重组诱饵质粒转入酵母菌株AH109中进行营养缺陷型分析检测毒性及自激活。结果表明,成功构建了重组诱饵质粒pGBKT7-CdRD和pGBKT7-FRD,并且其无自激活报告基因作用,对酵母菌株也无毒性作用。这说明此两个重组诱饵质粒可用于酵母双杂交系统,为从香蕉叶片cDNA文库中筛选获得与香蕉红素氧还蛋白基因的保守结构域序列CdRD和开放性阅读框序列FRD相互作用的受体蛋白基因奠定了基础。
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关键词
香蕉红素氧还蛋白
CdRD
基因
frd基因
酵母双杂交
自激活作用
下载PDF
职称材料
题名
香蕉红素氧还蛋白基因在酵母双杂交系统中的自激活检测
1
作者
程萍
冯仁军
袁克华
张丽丽
祁君凤
张银东
机构
海南大学农学院
中国热带农业科学院热带生物技术研究所
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2010年第2期47-50,共4页
基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助(项目编号:ITBBZD0735)
文摘
利用PCR方法扩增香蕉红素氧还蛋白基因的保守结构域序列CdRD和开放性阅读框序列FRD,并在其上下游分别引入NdeⅠ和SalⅠ酶切位点,双酶切后与同样经NdeⅠ和SalⅠ双酶切的诱饵质粒载体pGBKT7连接,构建重组诱饵质粒pGBKT7-CdRD和pGBKT7-FRD,并将此两重组诱饵质粒转入酵母菌株AH109中进行营养缺陷型分析检测毒性及自激活。结果表明,成功构建了重组诱饵质粒pGBKT7-CdRD和pGBKT7-FRD,并且其无自激活报告基因作用,对酵母菌株也无毒性作用。这说明此两个重组诱饵质粒可用于酵母双杂交系统,为从香蕉叶片cDNA文库中筛选获得与香蕉红素氧还蛋白基因的保守结构域序列CdRD和开放性阅读框序列FRD相互作用的受体蛋白基因奠定了基础。
关键词
香蕉红素氧还蛋白
CdRD
基因
frd基因
酵母双杂交
自激活作用
Keywords
Musa acuminata rubredoxin ( MaRD )
CdRD
frd
yeast two-hybrid
self-activation
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
香蕉红素氧还蛋白基因在酵母双杂交系统中的自激活检测
程萍
冯仁军
袁克华
张丽丽
祁君凤
张银东
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2010
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