基于中药特色技术传承概述广东芸香科道地药材

基于中药传统特色技术,文章通过现场观摩调研与文献检索,概述在十大广药中占有1/3的芸香科药物的药用历史、产地采收加工、性状鉴别特点。芸香科药物多含挥发油,具有芳香气,大部分具有宽中理气的功效,临床应用广泛。据考证,柚类橘红始自清代,此前使用橘类橘红;广陈皮主产区在新会地区,也称新会陈皮,药用时间至今约有600年;广佛手以肇庆高要地区产量多且质优,“佛手柑”的记载最早见于元朝。化橘红的传统加工方法是将化州柚的外层果皮切成角状,加工成7角的毛橘红药材,称为“毛七爪”;新会陈皮需在新会地区内陈化三年,方可称为“新会陈皮”。化橘红鉴别特点为表面密被柔软毡状细绒毛,有油点,气清香;新会陈皮“鬃眼”明显,对光照视呈半透明状,香气浓郁。广佛手切面的外皮呈黄色,肉呈白色,俗称“金边白肉”。文章基于中药传统理论、技术对广东地区芸香科道地药材进行概述,以期守正创新,使中药的传统特色技术得到传承发展。

胡兰贵运用四逆香佛二花汤经验

胡兰贵教授临床重视从肝论治疾病,认为各脏腑功能的正常活动,需赖肝主疏泄功能的正常和调节,肝气生机调畅,阳气舒通,阴气布散,五脏之气得以宣通,机体就呈现出勃勃的生机。四逆香佛二花汤具有疏肝理气养血,利水除湿通络之效。胡教授认为副乳、痹证、水肿等病的治疗重点在调理气机,佐以消痰,择药性平和之品,行气消痰而不伤正,可收“轻可去实”之功,故方用四逆香佛二花汤。根据患者体质,结合其主症病因,发挥中医辨证论治优势,以四逆香佛二花汤为基础方加减,针对一些肝郁诸症确有良好的疗效。

佛手化学成分和药理作用及其质量标志物(Q-Marker)预测分析

佛手为中国传统的药食两用植物,应用广泛且历史悠久。佛手中的化学成分主要有黄酮及其苷类、香豆素类、挥发油类、多糖类等,其传统功效为疏肝理气,和胃止痛,燥湿化痰,现代药理研究表明佛手在抗菌、抗肿瘤、降血脂等方面也有着较好的药理活性。整合归纳了佛手的化学成分和药理作用,并在此基础上结合质量标志物(quality marker,Q-Marker)理念,基于植物亲缘学、成分有效性、可测性等方面对佛手的质量标志物进行预测分析,为建立科学的佛手质量控制方法提供参考。

基于近红外光谱的佛手及其炮制品快速质量分析研究

目的基于近红外光谱结合化学计量学快速判别佛手生、制品并对内在成分含量进行预测,为佛手饮片质量控制提供依据。方法利用高效液相色谱法测定佛手饮片中莨菪亭、橙皮苷、6,7-二甲氧基香豆素、白当归素、5,7-二甲氧基香豆素、佛手柑内酯含量,利用近红外光谱采集样品光谱信息,结合化学计量学方法建立佛手生、制品定性和定量模型,快速判别佛手生、制品和预测成分含量。结果近红外技术偏最小二乘法-判别分析对佛手及其炮制品的分类鉴别达到100%正判率;对含量测定的6种成分中的3种(莨菪亭、5,7-二甲氧基香豆素、白当归素)的含量预测精度高,其中莨菪亭定量模型的决定系数(R2)为0.8951,校正均方根误差(RMSEC)为0.0320,预测均方根误差(RMSEP)为0.0175,验证集R2为0.8463,交叉验证均方根误差(RMSECV)为0.0541;5,7-二甲氧基香豆素定量模型的R2为0.9080,RMSEC为0.0242,验证集R2为0.7937,RMSEP为0.0446,RMSECV为0.0387;白当归素定量模型R2为0.9184,RMSEC为0.0276,验证集R2为0.7714,RMSEP为0.0275,RMSECV为0.0404。结论基于近红外光谱技术对佛手及其炮制品的鉴别和含量预测的方法具有可操作性,且简单快速,对样品无损害。为佛手及其炮制品质量控制和临床应用提供参考。

新鲜和干燥川佛手果和叶挥发油GC-MS分析

目的:对比分析川佛手果和叶中挥发油的成分。方法:采用水蒸气蒸馏法提取川佛手果和叶的挥发油,并用气质联用方法(GC-MS)检测挥发油的成分及相对含量。结果:川佛手果的挥发油鉴定出28种成分,以单萜烯类为主;叶的挥发油鉴定出32种成分,以单萜烯类和醛类为主。以鲜品为例,有22种共有成分,分别占果和叶挥发油总量的95.00%和97.84%;干燥后果、叶挥发油成分的总量及种类均有所下降。结论:川佛手果和叶挥发油种类极相似,但相对含量有较大差异。

不同产地佛手药材的化学成分比较研究

目的比较分析不同产地佛手药材的化学成分,并对不同产地的佛手药材进行种质评价。方法采用超高效液相色谱仪联用四级杆飞行时间质谱仪(UPLC/Q-TOF-MS)分析鉴定10个不同产地的佛手药材,并采用主成分分析统计处理试验数据,讨论区分不同产地佛手药材的特征性成分。结果结果表明10个不同产地的佛手药材中,福建、安徽、江苏等产地的佛手药材化学成分近似,而四川、云南、广西等产地的佛手药材具有相似性,产地广东梅州、广东潮州、广东肇庆的佛手药材相似,浙江的佛手药材化学成分与其他产地差异较大;找到了区分10种不同产地佛手药材贡献值较大的9种化学成分并进行了初步鉴定。结论 10个不同产地的佛手药材化学成分存在差异,可能与药材的产地不同密切相关;应用UPLC/Q-TOF-MS方法快速分析鉴别,为佛手药材质量控制提供了方法。

佛手抗菌活性及其药效成分橙皮苷对金黄色葡萄球菌的作用机制研究

目的探究佛手的抗菌活性和机制,为佛手抗菌药物的开发和中药的抗菌机制研究提供参考依据。方法采用琼脂二倍稀释法测定板蓝根水煎液、佛手水煎液、佛手挥发油和橙皮苷对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并通过菌体的生长曲线、胞外可溶性蛋白质含量和胞外核酸相对含量的测定研究橙皮苷对金黄色葡萄球菌的抗菌机制。结果佛手水煎液、佛手挥发油和橙皮苷对这4种菌的抗菌效果均强于板蓝根水煎液,其中以橙皮苷对金黄色葡萄球菌的抗菌效果最好,MIC为0.05mg/mL,MBC为0.2mg/mL;橙皮苷作用下金黄色葡萄球菌菌体生长显著缓慢,胞外可溶性蛋白质含量和胞外核酸相对含量增加。结论佛手对4种致病菌具有较好的抗菌活性,可通过改变金黄色葡萄球菌的细胞膜通透性来影响细菌的生长,从而达到抑菌效果。

不同产地广佛手药材HPLC指纹图谱的研究

目的:采用高效液相色谱法建立广佛手药材的指纹图谱,为其品质控制提供依据。方法:采用HPLC分析广佛手的指纹图谱。色谱柱:Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.3%乙酸溶液梯度洗脱;分析时间:60min;检测波长:283nm;柱温:25℃;流速:1.0mL/min。结果:建立了广佛手的指纹图谱,确定了13个共有峰。结论:该指纹图谱检测方法简便、重现性好,可作为广佛手药材质量控制的重要方法。

主成分分析对佛手最佳产地的探讨

【目的】分析不同产地佛手中生物活性成分分布规律,探索佛手最佳产地的优选方法,以确定最佳产地。【方法】采用三维高效液相色谱法,梯度洗脱,测定17批不同产地佛手中5种生物活性成分(柠檬油素、6,7-二甲氧基香豆素、橙皮苷、5-羟基-7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素、6-羟基-7-甲氧基香豆素)的含量,并对其进行主成分分析。【结果】所建模式合理,具有一定的可行性和可靠性,为探讨佛手最佳产地提供了一种新的方法。【结论】佛手最佳产地以广东肇庆为最佳。

HPLC法测定广佛手中5,7-二甲氧基香豆素的含量

目的测定广佛手中5,7-二甲氧基香豆素的含量。方法采用HPLC法,色谱柱:LiChrosPherR100柱(250×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水(65∶35);检测波长:326nm;流速:1.0mL/min;柱温:35℃。结果在0.3528～1.7640μg检测范围之间,5,7-二甲氧基香豆素进样量与峰面积呈良好的线性关系,回归方程:Y=2403.73X-65.35,r=0.9998。平均回收率97.33%,RSD=1.47%。结论采用该法测定广佛手中5,7-二甲氧基香豆素的含量,方法简便、快速、准确、重现性好。

三种不同产地佛手的傅立叶变换红外光谱鉴别

建立快速鉴别不同产地佛手的方法。【方法】采用傅立叶变换红外光谱法(FTIR)直接测定3种不同产地的佛手,根据特征吸收峰的峰位、吸收强度及峰高比的量化指标I值,进行比较分析。【结果】每个产地的佛手峰高比I值都有固定的范围,广佛手为0．7～0．9,川佛手为1．3～1．6,金佛手为0．9～1．1,根据I值的大小可以初步判断其产地。【结论】FTIR为广佛手、川佛手、金佛手3种不同产地佛手鉴别的有效方法,该法具有无需分离提取,无需化学处理,简便、迅速、稳定、实用的特点。

不同采收期广佛手中5,7-二甲氧基香豆素的含量测定

目的通过测定不同采收期的广佛手中5,7-二甲氧基香豆素的含量,为合理开发利用广佛手资源提供参考。方法采用HPLC法测定其含量。选用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(55:45),检测波长326nm,流速1.0mL·min-1,柱温25℃。结果5,7-二甲氧基香豆素在0.50～5.00μg与峰面积具有良好的线性关系,平均回收率为97.72%,RSD为1.66%(n=9)。广佛手中5,7-二甲氧基香豆素的含量在7月和9月较低,8月中旬时最高。结论为确定广佛手的最佳采收期提供参考依据。

蒸制时间对佛手主要成分与抗氧化活性的影响

目的研究不同蒸制时间对佛手总黄酮、橙皮苷及5,7-二甲氧基香豆素成分及其抗氧化活性的影响。方法采用紫外分光光度法测定佛手总黄酮含有量;HPLC法测定橙皮苷及5,7-二甲氧基香豆素含有量;DPPH法检测这些化合物的抗氧化活性。结果 2.5 h蒸制时间对佛手总黄酮和橙皮苷的含有量均出现峰值,分别达到50.416 mg/g和1.038 mg/g,蒸制后5,7-二甲氧基香豆素含有量呈减少趋势,2.5 h蒸制下降最少,为1.628 mg/g。蒸制2.5 h的佛手抗氧化能力最强。结论蒸制时间对制佛手主要成分及抗氧化均有显著影响,且总黄酮和橙皮苷的量与其抗氧化活性之间具有相关性。

基于UPLC-Q-TOF-MS的广佛手化学成分快速鉴定研究

本研究应用超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱仪UPLC-Q-TOF-MS在正负离子模式下分离分析广佛手药材成分,采用Masslynx4.1软件及网络数据库Scifinder及Chemspider检索其一级、二级质谱数据,快速鉴定了广佛手药材的化学成分,共鉴定化学成分45种,其中首次从广佛手中鉴定了23种化合物。

尤昭玲教授对佛手的认识与临床应用经验

尤昭玲教授善于从中药的形、色、质、气、味等特征入手,以阐明中药的功用与主治。佛手色黄味酸微甜,归肝、脾、胃经。其形舒展或内收,象征药性张弛有度;其香气浓郁而果瓣绵厚,说明其擅长疏肝、燥湿而药性平和。妇女经、带、胎、产、杂病之关乎肝脾不和者,尤教授常配伍佛手以治之。

不同采收期广佛手指纹图谱研究

[目的]建立不同采收期的广佛手指纹图谱,探索广佛手的最佳采收期。[方法]采用RP-HPLC法,Hypersil C18(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速1.0 ml/min,柱温30℃,检测波长283 nm。[结果]不同采收期广佛手成分的种类及含量存在一定的差异,9月份样品整体相似度高于7月份样品,广佛手以9月份采收为宜。[结论]该方法简便可行、重复性较好,可为质量控制以及实现规范化种植提供可靠的科学依据。

岭南特色饮片制佛手的质量标准研究

【目的】为制佛手饮片质量标准的制定提供参考依据。【方法】采用薄层色谱法对不同批次制佛手进行鉴别研究,采用高效液相色谱法对其橙皮苷、5,7-二甲氧基香豆素和5-羟甲基糠醛进行含量测定。【结果】在环己烷—乙酸乙酯(1.5∶1)的展开系统,以5,7-二甲氧基香豆素和5-羟甲基糠醛为对照品,14批制佛手饮品的薄层色谱在相同位置显示斑点一致;橙皮苷含量在0.142～0.788 mg/g之间;5,7-二甲氧基香豆素含量在0.642～1.747 mg/g之间;5-羟甲基糠醛含量0.028～0.901 mg/g之间。【结论】本研究所建立的薄层鉴别方法和高效液相色谱含量测定方法可应用于岭南特色饮片制佛手的质量控制及标准制定。

基于网络药理学的佛手干预2型糖尿病潜在靶点机制研究

目的基于网络药理学方法研究佛手干预2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的潜在作用靶点。方法利用TTD数据库、Drugbank数据库、OMIM数据库和DisGeNET数据库筛选T2DM相关基因,借助TCMSP数据库筛选佛手有效化学成分作为候选药效成分,通过COXPRESdb数据库及STRING筛选关键蛋白,运用Cytoscape 3.7.1软件构建疾病-药效成分-靶点-通路关系网络,使用DAVID 6.8数据库进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和KEGG通路富集分析,通过Vina将佛手候选药效成分与关键蛋白进行分子对接。结果①筛选得到181个疾病靶点候选基因、佛手6种有效成分、药效成分和疾病相关的25个关键蛋白,构建疾病-药效成分-靶点-通路关系网络;②GO功能富集分析得到GO条目57个(P≤0.05),其中生物过程条目43个,分子功能条目10个,KEGG通路富集得到10条通路(P≤0.05);③选取10个关键蛋白与佛手6个药效成分进行分子对接,结果显示其结合稳定。结论通过网络药理学研究发现,佛手通过6种有效成分,影响25个潜在靶点、10条相关通路,调节胆固醇生物合成和胰岛素分泌功能干预T2DM,为佛手作为"调肝启枢化浊"法主要药味治疗糖脂代谢病提供了依据,为其进一步的临床应用和深入研究开发提供了思路和线索。

传统方法提取佛手多糖的最佳工艺设计

目的:利用传统方法确定提取佛手多糖的最佳工艺条件。方法:以佛手多糖含量为指标,提取次数、提取时间、提取温度、料液比为因素,通过单因素试验确定因素水平,利用统计分析方法对提取佛手多糖的工艺进行优化研究。结论:传统方法提取佛手多糖的最佳工艺条件是:提取次数2次,浸提时间1.5h,提取温度100℃,料液比1:20,该方法可以为大规模工业生产佛手多糖提供依据。

中药材佛手的指纹图谱建立及在鉴别中的应用

目的采用HPLC法,研究建立佛手的指纹图谱,鉴别佛手药材。方法采用HPLC法,用C18柱(推荐使用规格:4.6×250mm,5μm),以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸做为流动相B,进行洗脱;检测波长为283nm,柱温为40℃;流速为1.0ml/min。结果运用梯度洗脱得到的色谱图各色谱峰分离较好,建立了佛手药材的HPLC指纹图谱,达到中药指纹图谱研究的技术要求。结论该方法重现性好,可行、有效,可作为佛手药材的鉴别方法。