文昌鸡促卵泡素受体(FSHR)基因外显子区域SNPs分析

寻找与鸡繁殖性能相关的遗传标记,为高繁殖力的标记辅助选择提供科学依据。本研究以促卵泡素受体(FSHR)基因作为影响鸡繁殖性状的候选基因,采用PCR-SSCP技术结合测序对FSHR基因部分包括所有外显子区域进行单核苷酸多态性检测和分析。结果发现,在区域2、区域4、区域6、区域9共4个区域存在SNPs位点。exon4编码区43bp处T→C突变,但没有导致翻译后氨基酸序列的改变,在exon2中编码区5′端—49bp处的C→T突变;exon6编码区3′端+12bp处的A→G突变;exon8编码区3′端+38bp处的G→T突变。促卵泡素受体(FSHR)是促卵泡素(FSH)的特异性受体,这些位点的单核苷酸多态性为下一步研究探讨FSHR基因对文昌鸡繁殖性能的遗传效应奠定了基础。

关元命门序贯针刺激活FSHR/cAMP/PKA通路促进早发性卵巢功能不全模型大鼠颗粒细胞增殖的机制研究

【目的】观察关元命门序贯针刺方案对早发性卵巢功能不全(POI)模型大鼠的治疗作用及机制。【方法】将雌性SD大鼠分为空白组、模型组、蛋白激酶A(PKA)抑制剂(H89)+针刺组、针刺组各12只。除空白组,其他3组大鼠采用雷公藤多苷片灌胃制备POI模型。模型成功建立后,空白组和模型组每日捆绑一次;针刺组大鼠在动情间期取关元穴针刺,在动情前期取命门穴针刺;H89+针刺组按照针刺组针刺方案干预,在每次针刺前30 min内腹腔注射H89。连续干预20 d。各组大鼠分别在干预后第1个动情间期和动情前期取材。酶联免疫吸附分析(ELISA)检测动情间期促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E2)水平,Western Blot法检测动情间期促卵泡激素受体(FSHR)、芳香化酶P450(P450arom)蛋白表达,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测动情间期和动情前期颗粒细胞活性,免疫组织化学法检测动情前期增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达水平。【结果】(1)与空白组比较,模型组和H89+针刺组血清FSH水平显著升高(P<0.01),E2水平显著降低(P<0.001);H89+针刺组FSH水平与模型组无差异(P>0.05),E2水平低于模型组(P<0.05);针刺组FSH水平低于模型组和H89+针刺组(P<0.05),与空白组无差异(P>0.05),E2水平显著高于模型组和H89+针刺组(P<0.01),仍低于空白组(P<0.05)。(2)模型组和H89+针刺组FSHR、P450arom蛋白表达均低于空白组(P<0.01);H89+针刺组FSHR蛋白表达水平与模型组无差异(P>0.05),P450arom蛋白表达水平低于模型组(P<0.05);针刺组FSHR、P450arom蛋白表达水平均高于模型组和H89+针刺组(P<0.05),但仍低于空白组(P<0.05)。(3)模型组和H89+针刺组GCs活性和PCNA平均光密度值均低于空白组(P<0.05);H89+针刺组GCs活性和PCNA平均光密度值均低于模型组(P<0.05);针刺组的GCs活性和PCNA平均光密度值显著高于模型组和H89+针刺组(P<0.05或P<0.01)。【结论】关元命门序贯针刺方案可通过上调促卵泡激素受体(FSHR)/环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)通路FSHR、P450arom蛋白的表达,调控性激素水平,提高GCs活性和促进GCs细胞增殖,从而改善POI。

波尔山羊FSHR5’端序列的SNP多态性及超排效果分析

为探索波尔山羊超排个体排卵数差异与个体遗传特性的相关性,对波尔山羊的FSHR基因(950 bp),分成四段分别设计引物进行PCR-SSCP多态性分析,结果发现一个SNP位点,导致5-’1出现两种基因型。序列分析显示该突变位点位于转录起始点上游-739bp处,属于远端转录启动调控区。统计分析表明AA型个体的平均排卵数与AB型个体的平均排卵数差异极显著(P<0.01),平均胚胎可利用率差异显著(P<0.05),这说明个体的超排潜力可能与其本身的FSHR基因的遗传特性有关。

卵泡刺激素受体在大鼠下颌下腺及胃的定位和分布研究

目的研究卵泡刺激素受体(FSHR)在大鼠下颌下腺和胃的定位、分布。方法采用免疫组织化学ABC法。结果大鼠下颌下腺浆液性腺上皮细胞,颗粒曲管及大于颗粒曲管的导管上皮细胞以及胃底腺壁细胞均呈FSHR免疫反应阳性,阳性物质主要位于细胞质内,细胞核呈阴性反应。结论大鼠下颌下腺、胃底腺壁细胞存在FSHR,卵泡刺激素可能通过FSHR的介导对上述两个器官功能进行调控。

二花脸猪FSHR座位PCR-SSCP标记与产活仔数的关系

采用PCR SSCP (PCR 单链构型多态性 )作为遗传标记 ,对二花脸猪促卵泡素受体 (FSHR)基因座位与产活仔数性状的关系进行了研究。结果表明 ,PCR SSCP分型共产生 2种等位基因 ,3种基因型。对不同标记基因型的二花脸猪群头胎产活仔数、头三胎产活仔数之和 ,及最高产活仔数进行单因子方差分析 ,发现该标记座位与最高产活仔数显著相关 ,其贡献率达 10 9%。基因效应分析表明 ,等位基因B的加性效应值为 0 37头 ,等位基因A的加性效应值为 - 0 6 0头。

文昌鸡FSHR基因多态性及其对繁殖性状的遗传效应

【目的】寻找与文昌鸡繁殖性能相关的遗传标记。【方法】以促卵泡素受体(FSHR)基因作为影响鸡繁殖性状的候选基因,采用PCR-SSCP技术结合测序分析,对FSHR基因所有外显子及部分内含子区域进行单核苷酸多态性(SNPs)检测,收集文昌鸡繁殖性能指标,分析FSHR基因多态性与繁殖性状的关系。【结果】共发现4个区域存在SNPs位点,分别为:区域4中exon 4编码区43bp处的T→C突变,但没有导致翻译后氨基酸序列的改变;区域2中exon 2编码区5′端-49bp处的C→T突变;区域6中exon 6编码区3′端+12bp处的A→G突变;区域9中exon 8编码区3′端+38bp处的G→T突变。对以上4个区域不同基因型与繁殖性状的相关性分析表明,文昌鸡FSHR基因第4外显子呈现的3种基因型(CC/CD/DD)多态性,与文昌鸡300日龄产蛋数及平均联产天数显著相关(P<0.05)),而且CD杂合基因型的300日龄产蛋数及平均联产天数显著高于其他基因型(P<0.05)。【结论】FSHR基因可作为影响文昌鸡产蛋数的候选基因。

莱芜黑山羊卵巢FSHr、LHr的免疫组化定位研究

为从形态学角度理解内分泌调节过程,揭示促性腺激素(GTH)对雌性哺乳动物卵巢调节作用机制,对处于非繁殖季节的莱芜黑山羊卵巢中FSHr、LHr分布进行免疫组化SABC方法定位.分别选取相邻的6张连续阳性切片,光镜观察、图像分析.结果显示:FSHr、LHr阳性细胞主要分布于卵泡颗粒细胞、膜细胞、卵母细胞、血管周围间质,尤其以在卵泡颗粒细胞、膜细胞的胞质中分布最多.原始卵泡卵母细胞中便有两种受体阳性物质分布,在各级卵泡中两种受体阳性细胞数量、染色强度随卵泡发育水平呈正向增加趋势.

卵泡刺激素受体基因与多囊卵巢综合征关系的初步研究

目的:探讨卵泡刺激素受体基因第7、10(A)外显子基因突变与多囊卵巢综合征(PCOS)发病的关系。 方法:提取56例PCOS患者及38例对照者的外周血基因组DNA,采用PCR及RFLP(限制性片段长度多态性)方法研究FSHR第7、10(A)外显子基因多态性。 结果:PCOS组FSHR第7外显子49/49型96.43%,86/49型3.57%,第10(A)外显子128/128型98.21%,128/216型1.79%,与对照组相比较,其基因型分布差异无显著性(P>0.05)。PCOS组第7外显子49型等位基因频率为98.21%,86型等位基因频率为1.79%,第10(A)外显子128型等位基因频率为99.11%,216型等位基因频率为0.89%。结论:中国人群存在以上两位点突变,但突变率在PCOS组及对照组不存在差异。PCOS组LH /FSH比值、高雄激素血症与等位基因86型、216型存在一定的相关趋势。

山羊促卵泡素受体基因研究进展

促卵泡素受体(FSHR)作为影响动物繁殖力的主效基因,已在不同物种中被广泛和持续地研究。作者归纳和分析了山羊FSHR基因的结构及其蛋白质的结构、作用机制、表达范围和规律,总结了该基因单核苷酸多态性的遗传效应,发现山羊FSHR基因的生物信息和基因效应相关研究比较深入,且近期在信号传导方面的研究证实FSHR基因是卵泡形成和发育过程中的关键因素;与不同种群繁殖性能的关联分析提示,FSHR基因的某些单核苷酸突变位点可作为遗传标记辅助选择的依据,但不同山羊种群中的突变效应仍需进一步证实。

FSHR与COX-2在皮性卵巢肿瘤中的表达及其关系探讨

目的探讨卵泡刺激素受体（FSHR）、还氧化酶-2（COX-2）在卵巢恶性上皮性肿瘤中的表达及相互关系。方法采用免疫组化方法检测35例卵巢恶性上皮性肿瘤中FSHR、COX-2的表达水平，并同时选取25例卵巢良性上皮性肿瘤以及25例正常卵巢组织作为对照，分析FSHR、COX-2的表达在9口巢恶性肿瘤中的临床意义。结果FSHR在卵巢恶性上皮性肿瘤中的表达水平显著高于在良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织中的表达（均P〈0．05），COX-2在9口巢恶性上皮性肿瘤组织中的表达水平显著高于正常卵巢组织（P〈0．05），FSHR与COX-2两者的表达呈显著正相关（r=0．692，P〈0．05）。结论卵巢恶性上皮性肿瘤组织中FSHR与COX-2的表达有相关性，选择性应用COX-2抑制剂，进而阻断卵泡刺激素（FSH）的作用，有希望成为治疗卵巢癌的新方法。

河流型与沼泽型水牛FSHR基因密码子偏好性分析

为了确定河流型与沼泽型水牛促卵泡素受体(FSHR)基因密码子的使用模式,试验采用PCR产物直接测序法对9头河流型水牛、15头沼泽型水牛、6头大额牛和6头中甸牦牛的FSHR基因编码区序列进行了群体变异检测和单倍型划分,并结合已发表的普通牛、野牛、山羊、绵羊、人和黑猩猩的同源序列,对河流型与沼泽型水牛FSHR基因密码子使用的偏好性及与其他物种的差异进行了探讨。结果表明:两类水牛FSHR基因的密码子使用特征较为相似,河流型与沼泽型水牛分别有28个和27个偏好使用的密码子,对于编码Pro的4个密码子CCC、CCA、CCU和CCG而言,河流型水牛偏好使用CCC和CCA,而沼泽型水牛偏好使用CCC。水牛与其他物种共同偏好使用的密码子有20种,均偏好使用以G/C结尾的密码子。基于密码子的同义密码子相对使用度(RSCU)构建的聚类树显示河流型水牛与沼泽型水牛先聚为一类,再与大额牛、牦牛聚为一类,普通牛与山羊、绵羊和野牛聚为一类,人和黑猩猩聚为一类,揭示聚为一类的物种间在密码子使用上的偏好性较相似。

卵泡刺激素及其受体与卵巢上皮性癌关系的研究进展

卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)通过其受体(FSHR)而发挥促卵巢上皮癌细胞增殖、生长和转移的作用,也可通过蛋白激酶A和磷脂酰肌醇(-3)激酶信号通路促进癌细胞的生长和转移。FSH还可能和卵巢癌对化疗的耐受有一定关系。FSHR的基因多态性与卵巢上皮癌有关,FSHR存在变异,致其信号转导途径也存在差异。本文就FSH及FSHR与卵巢上皮性癌关系的研究进展进行综述。

德国牧羊犬FSHR基因第1外显子的克隆与序列分析

为了研究德国牧羊犬卵泡刺激素受体(FSHR)基因多态性,试验以警用德国牧羊犬的基因组为模板,根据GenBank报道的拳师犬FSHR基因第1外显子序列设计引物,应用PCR技术,克隆和测定FSHR基因第1外显子序列,并进行BLAST比对分析。结果表明:30只受试犬基因遗传同源性高达100%,6只受试犬基因遗传同源性达99.6%,存在1处有义突变(SNP T89C)。

不同卵巢储备患者促性腺激素受体表达及影响因素分析

目的探讨不同卵巢储备女性颗粒细胞促卵泡激素受体(FSHR)、促黄体生成素受体(LHR)mRNA相对表达水平与获卵情况的关系,以及与其他促排卵治疗过程中相关指标的影响。方法收集850例患者卵泡液及颗粒细胞。纳入患者分为卵巢功能正常组(n=419)、预期低反应组(n=255)、多囊卵巢综合征(PCOS)组(n=176)。采用反转录-实时定量PCR(qRT-PCR)法测定FSHR、LHR、抗苗勒管激素(AMH)及AMHⅡ型受体(AMHRⅡ) mRNA的表达,分析以上指标在不同卵巢储备患者中表达差异及影响因素。结果 (1) 3组患者在年龄、体质量指数(BMI)、窦卵泡数(AFC)、基础激素水平、用药情况、FSHR mRNA及获卵数等方面差异均有统计学意义(P<0.05)。(2) PCOS组促排卵后卵巢高反应患者FSHR mRNA表达量低于正常反应患者(P<0.05)。(3)对卵巢功能正常组患者FSHR mRNA主要与AMHmRNA(r=0.404,P<0.001)、LHR mRNA(r=0.388,P<0.001)呈正相关,预期低反应组患者FSHR mRNA主要与LHR(r=0.415,P<0.001)呈正相关,PCOS患者FSHR mRNA主要与AMHRⅡmRNA(r=0.311,P<0.001)呈正相关。结论不同卵巢储备患者促性腺激素(Gn)受体表达量存在差异,且Gn受体与AMHmRNA表达具有显著相关性,可能与卵巢储备异常发病机制相关,临床Gn用药可参考Gn受体表达情况进行选择。

长三角地区重度少弱精子症与卵泡刺激素受体基因单核苷酸多态性相关性研究

目的:研究卵泡刺激素受体(FSHR)基因Thr307Ala(rs6165)和Asn680Ser(rs6166)单核苷酸多态性(SNP)基因型分布情况及其与中国长三角地区重度少弱精子症的关联性。方法:外周血提纯DNA,PCR扩增后直接测序分析200名已育男性(已生育组)和150名重度少弱精子症不育男性(不育组)FSHR基因Thr307Ala和Asn680Ser位点的SNP,并用χ2检验进行相关性分析。结果:FSHR基因Thr307Ala和Asn680Ser多态性位点的基因型分布在已生育组和不育组间无统计学差异(P>0.05)。Thr-Asn/Ala-Asn和Thr-Ser/Thr-Ser双倍型在已育男性与重度少弱精子症患者间分布差异有统计学意义(P<0.05),组间FSHR的单倍型Thr-Asn和Ala-Asn之间亦有统计学差异(P<0.05)。结论:FSHR基因Thr307Ala和Asn680Ser的2个多态性位点特定的单倍型和双倍型与男性不育有一定的相关性。

FSH受体基因多态性在中国IVF人群中分布及与卵巢反应性关系的研究

目的:探讨IVF-ET/ICSI患者中FSH受体(FSHR)基因多态性对控制促排卵中卵巢反应性及妊娠结局的影响。方法:分析行IVF-ET/ICSI的223例患者资料,其中长方案174例,短方案37例,微刺激方案12例。通过PCR扩增、纯化、基因测序分别测得223例患者FSHR体基因在外显子10上第680位及307位的基因型,根据不同基因型分为Asn680/Asn680、Ser680/Ser680、Asn680/Ser680;Thr307/Thr307、Ala307/Ala307、Ala307/Thr307各3组。比较223例患者不孕因素在各组的分布;比较174例长方案促排卵患者不同FSHR基因型亚组的卵巢反应及妊娠结局。结果:223例患者中,FSHR基因680位点上Asn/Asn组占52.0%,Ser/Ser组占12.1%,Asn/Ser组占35.9%,307位点上Ala/Ala组占12.1%,Thr/Thr组占48.4%,Ala/Thr组占39.5%。174例长方案患者中Ser680/Ser680组及Ala307/Ala307亚组的基础FSH值显著高于其它2个基因型组(P<0.05);FSH受体基因680、307位点多态性的改变在OHSS发生上无预测作用(P>0.05),但OHSS发生组中SS680的分布频率(4.6%)明显低于非OHSS组(15.1%)。FSHR基因680、307位点多态性的改变与临床妊娠率无相关性。结论:FSHR基因680、307位多态性的分布存在差异,FSHR基因多态性Ser680和AA307可能与卵巢反应性有关,FSHR基因680、307位多态性与临床妊娠率无关。

卵泡刺激素受体基因多态性与西北地区汉族妇女卵巢反应性的关系

目的探讨卵泡刺激素受体基因(FSHR)-29(rs1394205)和Asn680Ser(rs6166)位点多态性与西北地区汉族妇女控制性超排卵(COH)中卵巢反应性的关系。方法采用限制性酶切技术对卵巢高反应患者45例,卵巢低反应患者27例和卵巢正常反应的对照69例的FSHR基因-29(rs1394205)位点和第10号外显子Asn680Ser(rs6166)位点进行分型,并通过Fisher’s精确检验的方法分析基因型和等位基因的分布频率。结果 1FSHR基因-29位点基因型、等位基因频率在三组间分布无差异。2Asn680Ser位点基因型、等位基因频率在卵巢高反应组与正常对照组间无统计学差异(P>0.05);Ser/Ser基因型频率在卵巢低反应中占40.7%,与正常对照组差异有统计学意义(P<0.01);携带G等位基因者发生卵巢低反应的风险增加(OR=2.37,%95 CI=[1.25-4.52])。结论 FSHR Asn680Ser位基因多态性与西北地区汉族妇女COH中的卵巢低反应相关。当Asn680Ser(rs6166)位点G等位基因的存在增加卵巢低反应的风险。

卡拉库尔羊卵巢中促性腺激素受体蛋白的分布

在自然发情情况下,取10只卡拉库尔羊卵巢,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)方法观察卡拉库尔羊卵巢中促卵泡素受体(FSHR)、促黄体素受体(LHR)分布情况。分别选取连续的5张阳性切片,图像分析。结果显示:FSHR、LHR阳性细胞主要分布于卵泡颗粒细胞、膜细胞和卵母细胞。卡拉库尔羊原始卵泡卵母细胞中便有2种受体阳性细胞分布,在各级卵泡中2种受体阳性细胞数量随卵泡发育水平呈正向增加趋势。

卵泡刺激素受体基因的点突变和单核苷酸多态性

卵泡刺激素受体(FSHR)是由FSHR基因编码的G蛋白耦联受体蛋白,由胞外区、跨膜区及胞内区3部分构成。胞外区与FSH特异性结合组成FSH/FSHR系统,在人类生殖过程中发挥着重要作用。FSHR基因上突变基因分为活性突变和失活突变2种,失活突变可能导致原发或继发性闭经、高促性腺激素性功能障碍、卵巢早衰及生精功能障碍等生殖疾病,活性突变主要与卵巢过度刺激综合征(OHSS)关系密切。FSHR基因的点突变出现概率非常小,大部分仅有1次报道,而大多数FSHR基因突变为单核苷酸多态性。卵巢和睾丸的正常发育及发挥功能均依赖于完整的FSHR介导,FSHR突变对两性生殖表型的影响存在着差异。