E-cadherin和FSP-1/S100A4在胃癌及其癌前病变中的表达与临床病理意义

目的:采用免疫组织化学方法,检测E-cadherin与FSP-1/S100A4在胃癌及其癌前病变中的表达,并分析两者与胃癌临床病理因素的关系,探讨EMT在胃癌进展过程中的作用。方法:检测胃癌标本295例(其中139例配对正常胃黏膜作为对照)、肠上皮化生79例及异型增生16例中E-cadherin和FSP-1/S100A4蛋白的表达。结果:胃癌患者中E-cadherin的异常表达率为42.03%(124/295),正常胃黏膜、肠上皮化生和异型增生中未发现异常表达。胃癌中FSP-1/S100A4的阳性表达率(33.22,98/295)显著高于正常胃黏膜(0,0/139)、肠上皮化生(2.53%,2/79)和异型增生(0,0/16),P<0.05。正常胃黏膜、肠上皮化生和异型增生中FSP-1/S100A4的阳性表达率差异无统计学意义,均P>0.05。胃癌中FSP-1/S100A4的表达率在弥漫型胃癌组(41.88%,67/160)显著高于肠型胃癌组(24.11%,27/112),P<0.05。在浸润深度达浆膜及透浆膜组(36.89%,90/244)显著高于未侵及浆膜组(15.69%,8/51),P<0.05。FSP-1/S100A4的表达率与性别、年龄、Borrmann分型、WHO组织学分型及淋巴结转移均无显著相关性,均P>0.05。胃癌中FSP-1/S100A4的表达率在E-cadherin异常表达组(37.10%,46/124)高于正常表达组(30.41%,52/171),但差异无统计学意义,P>0.05。结论:与正常胃黏膜相比,E-cadherin在肠上皮化生和异型增生中未发现异常表达,而在胃癌中出现较高比率的异常表达,胃癌中E-cadherin的异常表达与Lauren分型相关。胃癌组织中FSP-1/S100A4的阳性表达率显著高于正常胃黏膜、肠上皮化生和异型增生,胃癌FSP-1/S100A4的阳性表达与胃癌的Lauren分型、浸润深度相关。本研究结果提示,胃癌组织细胞中存在着EMT,且EMT可能参与了胃癌的发展与侵袭。

早期生长反应因子1过表达促进肾小管上皮细胞转分化

目的:探讨早期生长反应因子1(Egr-1)在肾小管上皮细胞转分化中的作用。方法:(1)体外实验:用pcDNA3.1,pcDNA3.1/Egr-1转染肾小管上皮细胞株HK-2,qRT-PCR法、Western免疫印迹法检测Egr-1及转分化标志物E-cadherin、成纤维细胞特异性蛋白(Fsp-1)mRNA及蛋白水平的表达变化;用pcDNA3.1/Egr-1和siEgr-1或psilencer3.1共转染HK-2,Western免疫印迹法检测Egr-1、E-cadherin、Fsp-1蛋白水平的表达变化。(2)体内实验:建立大鼠慢性肾纤维化模型——5/6肾脏次全切除,造模成功后免疫组化法检测大鼠肾组织中Egr-1、E-cadherin、Fsp-1的表达。结果:(1)与转染空载体相比,HK-2细胞过表达Egr-1后,上皮细胞标志性蛋白E-cad-herin表达减弱,成纤维细胞标志性蛋白Fsp-1表达增强(P<0.05),提示出现肾小管上皮细胞转分化表型。而用小干扰RNA干扰掉Egr-1后,与空载体组及亲本细胞组相比,转分化表型得到逆转。(2)体内实验证实,与假手术组(SOR)相比,5/6肾脏次全切除肾组织中,转分化标志蛋白E-cadherin表达减弱、Fsp-1表达增加,同时肾小管上皮细胞Egr-1的表达明显升高,提示肾小管上皮细胞发生转分化,且其与Egr-1过表达密切相关。结论:Egr-1的过表达促进了肾小管上皮细胞转分化,参与肾间质纤维化的发生发展。

搅拌摩擦加工处理对Mg-3Li-1Y合金组织与性能的影响

控制不同的工件进给速度与搅拌头旋转速度对Mg-3Li-1Y合金进行搅拌摩擦加工处理。结合合金显微组织分析与拉伸试验,研究搅拌摩擦加工工艺对Mg-3Li-1Y合金组织与性能的影响。试验结果表明,通过搅拌摩擦加工处理,Mg-3Li-1Y合金的显微组织明显细化并且力学性能明显提高。在工件进给速度相同时,搅拌头旋转速度越低,晶粒越细小;在搅拌头旋转速度相同时,工件进给速度越快,晶粒越细小。当搅拌头旋转速度U=400 r/min,进给速度V=150 mm/min时,Mg-3Li-1Y合金有最好的力学性能和晶粒细化效果。

原代培养过程中壳聚糖衍生物对CTCF/YB-1/C-myc和p53蛋白表达的影响

成功建立了人增生性瘢痕细胞和正常皮肤成纤维细胞的原代培养,并利用热休克蛋白(HSP47)和成纤维细胞特异蛋白(FSP)标记物进行了鉴定。研究发现,经过壳聚糖衍生物处理,人增生性瘢痕成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞在培养中均出现了不同类型的蛋白表达。多功能转录因子蛋白(CTCF)在壳聚糖衍生物处理的增生性瘢痕成纤维细胞中出现表达上调;在聚糖衍生物处理的正常皮肤成纤维细胞中数量无变化。YB-1结合蛋白在经壳聚糖处理的正常皮肤成纤维细胞与人增生性瘢痕细胞中的表达几乎无异,但在未经壳聚糖处理的细胞中表达不同。C-MYC和P53蛋白在壳聚糖衍生物处理的增生性瘢痕纤维细胞中表达上调,但在正常皮肤成纤维细胞中,无论是否经过壳聚糖衍生物处理,这两种蛋白都没有表达。上述4种蛋白在人增生性瘢痕细胞和正常皮肤成纤维细胞中表现出不同的表达方式,这种新型壳聚糖衍生物可能在控制人增生性瘢痕细胞和正常皮肤成纤维细胞生长和增殖过程中起着重要作用。这些蛋白因子的表达机制目前还不是完全清楚,有待于进一步研究。

防己黄芪汤对于足细胞功能蛋白基因表达的影响

目的观察防己黄芪汤及加减防己黄芪汤对于TGF-β1诱导的足细胞中P-cadherin、FSP-1基因表达的影响。方法培养足细胞,待其分化成熟后将其分成对应4组,模型组和正常组足细胞用含10%正常大鼠血清的培养液孵育,模型组及干预组用TGF-β1刺激,干预组在此基础上分别用含10%防己黄芪汤、10%加减防己黄芪汤大鼠含药血清的培养液孵育。采用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)技术检测P-cadherin,FSP-1的基因表达。结果与正常组相比,模型组P-cadherin的基因表达显著降低,FSP-1无显著差异;与模型组相比,干预组P-cadherin的基因表达则显著增高,正常组、模型组、及干预组FSP-1表达无显著差异。结论防己黄芪汤和加减防己黄芪汤具有维持肾小球足细胞的表型分子表达的作用。

新型尿液标志物在紫癜性肾炎患儿中的水平变化

目的·研究尿血管紧张素原(urinary angiotensinogen,UAGT)、尿成纤维细胞特异蛋白-1(fibroblast-specific protein-1,FSP-1)及尿凝血酶在紫癜性肾炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis,HSPN)患儿中的水平变化。方法·选取HSPN患儿(HSPN组,n=14)、过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)未合并肾脏受损患儿(HSP组,n=28)和尿检正常儿童(对照组,n=23);同时选取不同治疗阶段的HSPN患儿,包括未治疗组(n=10)、完成糖皮质激素(glucocorticoid,GC)冲击治疗组(GC组,n=9)和完成GC联合环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)序贯冲击治疗组(GC+CTX组,n=8)。收集以上患儿的一般临床资料及新鲜晨尿标本,运用试剂盒检测尿中UAGT、FSP-1及凝血酶水平,并测定尿肌酐(urinary creatinine,Ucr)用于校正。结果·HSPN组患儿UAGT/Ucr及FSP-1水平显著高于HSP组及对照组(均P<0.05);HSPN组患儿尿凝血酶水平与HSP组间差异无统计学意义,但2组水平均显著高于对照组(均P<0.05)。HSPN未治疗组患儿UAGT/Ucr水平与GC组间差异无统计学意义,但显著高于GC+CTX组(P=0.000);未治疗组尿FSP-1水平显著高于GC组(P<0.05),但与GC+CTX组间差异无统计学意义;尿凝血酶水平在HSPN患儿的3个组间差异无统计学意义。结论·UAGT/Ucr、FSP-1和凝血酶水平在HSPN患儿尿液中均明显升高,且UAGT/Ucr和FSP-1可能对患儿的疗效有一定的提示作用。

仙蟾片联合曲妥珠单抗和mFOLFOX6方案治疗老年HER2阳性晚期胃癌的临床研究

目的观察仙蟾片联合曲妥珠单抗和mFOLFOX6方案治疗老年表皮生长因子受体-2(HER2)阳性晚期胃癌的临床疗效。方法选取2011年1月—2014年1月在延安市人民医院就诊的老年HER2阳性晚期胃癌患者212例,随机分为对照组和治疗组,每组各106例。两组患者均给予mFOLFOX6方案化疗,每个治疗周期为21 d。对照组在此基础上于第1天静脉滴注注射用曲妥珠单抗8 mg/kg,然后每个周期第1天给予6 mg/kg。治疗组在对照组的基础上口服给予仙蟾片,4片/次,3次/d。两组患者均治疗6个周期。观察两组患者近期和远期疗效,同时比较治疗前后两组患者血清生化指标和不良反应。结果治疗后,对照组临床有效率和控制率分别为60.3%、78.3%,均显著低于治疗组的73.5%、89.6%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者血清纤维母细胞特异性蛋白-1(FSP-l)、骨髓相关蛋白-14(MRP-l4)、趋化因子受体-4(CXCR4)和基质衍生因子-1(SDF-1)均明显降低(P<0.05),且治疗组上述血清生化指标明显低于对照组(P<0.05)。远期疗效结果显示,对照组有效病例中平均无疾病进展生存时间(PFS)和总生存时间(OS)均分别明显小于治疗组患者,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,治疗组的不良反应发生率均明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论仙蟾片联合曲妥珠单抗和mFOLFOX6方案治疗老年人表皮生长因子受体-2(HER2)阳性晚期胃癌患者临床疗效较好,能够有效延长生存时间,具有一定的临床推广应用价值。

糖肾宁含药血清对高糖培养下足细胞上皮间质转分化的作用

目的:探讨糖肾宁含药血清对于高糖刺激下足细胞上皮间质转分化的影响。方法:将条件永生小鼠足细胞系分为正常对照组,高糖组,糖肾宁含药血清低、中、高剂量组,CCK-8法检测各组足细胞细胞活力,倒置显微镜观察各组足细胞细胞形态,鬼笔环肽-罗丹明染色观察各组足细胞细胞骨架变化,免疫荧光染色及Western blot法检测各组足细胞P-钙粘蛋白(P-cadherin)、成纤维细胞特异蛋白-1(FSP-1)蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,高糖组足细胞细胞活力降低(P<0.05),细胞形态变化及细胞骨架重构,P-cadherin蛋白表达下调(P<0.05),FSP-1蛋白表达上调(P<0.05);与高糖组比较,糖肾宁含药血清组足细胞细胞活力升高(P<0.05),细胞形态变化及细胞骨架重构减轻,P-cadherin蛋白表达上调(P<0.05),FSP-1蛋白表达下调(P<0.05)。结论:糖肾宁含药血清可以减轻高糖刺激引起的足细胞上皮间质转分化。