α-天门冬氨酰二肽酶及其进化酶的FT-IR研究

用分子定向进化技术 ,在酶活力和热稳定性双重选择压力下 ,筛选到了一株Kcat/KM 是天然酶47倍的进化酶。用FT -IR方法 ,测定了α -天门冬氨酰二肽酶及其进化酶的酰胺I带图谱 ,定量估算了天然酶和进化酶的各种二级结构含量。天然酶中 ,β折叠结构含量为28.5 % ,α螺旋结构含量为33 % ,这与园二色谱测量α螺旋结构为33 %的结果有很好的一致 ,剩余的残基形成不同类型的转角和无规结构 ,其总含量为38.5 %。在进化酶中 ,β折叠结构含量为26.8 % ,α螺旋结构含量为31 % ,其它结构为不同类型的转角和无规结构,含量为42.2 %