异氟烷对FVB/N小鼠和C57BL/6小鼠超声心动图参数的影响

目的评价异氟烷对FVB/N小鼠和C57BL/6小鼠超声心动图参数的影响。方法使用Visual Sonics Vevo770高分辨率小动物超声仪测量雄性FVB/N小鼠和C57BL/6小鼠超声心动图参数,比较异氟烷对两种品系小鼠心功能及心脏结构的影响。结果 FVB/N小鼠在1%和2%异氟烷麻醉下,心脏收缩功能和心脏结构指标均正常,但FVB/N小鼠在1%异氟烷麻醉下容易觉醒,不易获取清晰稳定的图像;C57BL/6小鼠在1%异氟烷麻醉下能够维持良好的收缩功能,但在2%异氟烷麻醉下,C57BL/6小鼠的收缩功能明显被抑制。结论 2%异氟烷麻醉适用于FVB/N小鼠,1%异氟烷麻醉适用于C57BL/6小鼠。

重组人纽表位肽12生物学活性测定方法的研究

目的:建立适用于重组人纽表位肽12体外质量控制的生物学活性测定方法,用于该制品的生物学活性评价。方法:采用小鼠,比较不同品系、给药浓度、给药周期等条件下应用ELISA方法检测出的小鼠相应抗体水平,确定最佳实验条件,以建立相应的体外活性测定方法。结果:FVB/N转neu基因小鼠(TgN MMTVneu 202 Mul,Jackson Lab.,USA)对重组人纽表位肽12的反应存在量——效关系,并确定了最佳测定条件和给药剂量,用抗体阳转百分率作为评价指标,样品测定重复性较好,CV％值为6.7％(n=4),结果可靠。结论:已建立的FVB/N转neu基因小鼠测定重组人纽表位肽12生物学活性的方法可用于重组人纽表位肽12生物学活性的常规评价。

AKT基因介导的小鼠非酒精性脂肪肝模型的建立

目的通过尾静脉高压注射含有AKT/SB基因质粒的方法,构建一种新型的小鼠非酒精性脂肪肝模型。方法将40只雌性FVB/N小鼠随机分为正常组(n=15),模型组(n=15),对照组(n=5),治疗组(n=5)。正常组与模型组分别给予尾静脉高压注射生理盐水和AKT/SB质粒,于第1、2、3周分批处死,每批处理5只。对照组与治疗组给予尾静脉高压注射AKT/SB质粒,第3周治疗组开始予以白藜芦醇灌胃(0.04g/kg),对照组予以等量0.5%CMC-Na溶液灌胃,第5周处死全部对照组和治疗组小鼠。检测小鼠体重,肝湿重,肝指数,血清ALT、AST、TG、TC水平及肝组织中脂肪合成相关蛋白的表达水平,肝脏组织切片进行病理学观察,用以评价不同组别小鼠的病理生理变化。结果模型组小鼠2周后就出现肝功能损伤,脂质代谢紊乱,肝脏脂肪变性明显增加,并出现纤维化和明显的炎性浸润,且造模时间越长,病变程度越严重。治疗组小鼠和对照组小鼠相比,血清中ALT、AST、TC水平均有不同程度的下降,肝组织中脂肪合成相关蛋白的表达水平有所下降,且肝脏切片染色观察脂肪形成明显减少。结论通过尾静脉高压注射方法在肝脏表达AKT基因,FVB/N小鼠在3周内可形成病变程度逐步加重的非酒精性脂肪肝模型。

塞来昔布通过c-Myc及Akt/mTORC1信号通路延缓c-Myc诱导小鼠肝细胞癌的发展

目的探讨塞来昔布对c-Myc诱导小鼠肝细胞癌发展的作用及其机制。方法选取FVB/N小鼠,尾静脉高压注射c-Myc建立肝细胞癌模型,将小鼠分为4组(每组7只):正常组、模型组、塞来昔布低、高剂量组(150、300 mg·kg^-1)。给药干预6周后采集样本,测定小鼠体重和肝重,比较各组小鼠肝脏和肝脏指数差异;HE检测小鼠肝脏组织病变情况;IHC检测小鼠肝脏组织中Ki67蛋白表达情况;West-ern blot检测小鼠肝组织中c-Myc、p-Akt T308、p-Akt S473、p-4EBP1蛋白的表达水平。结果与正常组相比,模型组肝脏重量和肝重指数明显增大;肝脏组织多核、固缩现象明显;细胞核大量Ki67阳性染色;c-Myc和p-Akt T308、p-Akt S473、p-4EBP1蛋白表达明显增加。不同剂量塞来昔布干预后能明显抑制和改善上述指标的变化。结论塞来昔布可以通过调控c-Myc及Akt/mTORC1信号通路延缓c-Myc诱导小鼠肝细胞癌的发展。

Mxi1基因敲除小鼠遗传背景的转换研究

目的对FVB/N品系Mxi1基因敲除(knock out,KO)(Mxi1^(^(-/-)))小鼠进行遗传背景转换,为研究疾病发病机制提供更多种类的基因修饰小鼠。方法将FVB/N品系杂合子小鼠(Mxi1^(+/-))与异性C57BL/6品系野生型(wild type,WT)小鼠(Mxi1^(+/+))杂交,获得杂合子F1代后将其与C57BL/6品系Mxi1+/+小鼠回交,再选择F2杂合子与C57BL/6品系Mxi1^(+/+)小鼠回交,依此再回交8次后,子代互交。利用鼠尾DNA进行基因型鉴定及微卫星DNA(msDNA)检测,组织信使RNA(mRNA)和组织蛋白检测背景转换效率。结果基因型鉴定为Mxi1^(-/-)的互交子代小鼠msDNA检测结果与WT型C57BL/6小鼠一致,与FVB/N小鼠不同。PCR和Western印迹结果显示,随机选取的任意自交子代纯合子小鼠体内不表达Mxi1的mRNA和蛋白质,成功获得C57BL/6品系Mxi1^(-/-)小鼠。结论通过杂交-回交的方式成功获得的新品系Mxi1^(-/-)小鼠能稳定地将突变基因传递给子代。这一成果为疾病动物模型的建立提供了更多的选择。