目的:本研究通过建立胆管癌大鼠模型,以法尼基衍生物X受体(farnesyl X receptor,FXR)为研究对象,初步探讨FXR在胆管癌大鼠胆管肿瘤组织中的表达状况,以期为治疗胆管癌找到新的方法.方法:取Wistar大鼠(■、体质量160g±8g)70只,随机...目的:本研究通过建立胆管癌大鼠模型,以法尼基衍生物X受体(farnesyl X receptor,FXR)为研究对象,初步探讨FXR在胆管癌大鼠胆管肿瘤组织中的表达状况,以期为治疗胆管癌找到新的方法.方法:取Wistar大鼠(■、体质量160g±8g)70只,随机分为2组,每组35只:普通饮食对照组(简称对照组)予以普通饮食、3'-甲基-4-二甲基氨偶氮苯(3'-Me-DAB)饮食实验组(简称实验组)予以含3'-Me-DAB饮食.经过20wk,建立胆管癌大鼠模型,取对照组胆管组织和实验组胆管肿瘤组织:(1)实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测胆管组织和胆管肿瘤组织的FXR基因表达的强度;(2)石蜡切片后用免疫组织化学SP法检测胆管组织和胆管肿瘤组织的FXR蛋白表达的强度.结果:(1)qRT-PCR结果显示:FXR/GAPDH比率在对照组胆管组织中为32,在实验组胆管肿瘤组织中为9,两组间的表达有统计学差异;(2)免疫组织化学SP法结果显示,对照组胆管组织FXR表达阳性率为72.6%,实验组胆管肿瘤组织FXR表达阳性率为21.3%,存在统计学意义(P<0.05).结论:实验组大鼠胆管肿瘤组织的FXR基因的表达较对照组胆管组织减少,提示我们在胆管癌的治疗中,FXR基因有成为新治疗靶点的可能.展开更多
目的:本研究通过建立高脂血症大鼠模型,以法尼基衍生物X受体(farnesyl X receptor,FXR)为研究对象,初步探讨FXR在高脂血症大鼠中的表达状况,为防治高脂血症提供新的依据和分子理论基础.方法:取♂Wistar大鼠70只,随机均分为2组,对照组予...目的:本研究通过建立高脂血症大鼠模型,以法尼基衍生物X受体(farnesyl X receptor,FXR)为研究对象,初步探讨FXR在高脂血症大鼠中的表达状况,为防治高脂血症提供新的依据和分子理论基础.方法:取♂Wistar大鼠70只,随机均分为2组,对照组予以普通饮食、实验组予以高脂饮食.喂食90 d,建立高脂血症模型后,取对照组和实验组肝脏组织:(1)应用逆转录-聚合酶链反应(RT-polymerase chain reaction,RTP C R)技术检测两组模型肝脏组织的F X R基因表达的强度;(2)石蜡切片后用免疫组织化学SP(streptavidin-perosidase)法检测两组模型肝脏组织的FXR蛋白表达的强度.结果:实验组胆固醇及甘油三酯含量明显高于对照组.(1)电泳结果显示:实验中肝脏组织扩增产物都出现了内参β-actin基因的425bp扩增带和FXR基因的283 bp扩增带,实验组FXR基因扩增带亮度强于对照组;(2)免疫组织化学SP法结果显示,实验组FXR表达阳性率为79%,对照组FXR表达阳性率为14.3%,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:实验组大鼠的FXR基因的表达较对照组明显增加,提示我们可发展作用于FXR的药物,为高脂血症及其相关疾病找到新的治疗方法.展开更多
目的:构建携带人脆性X相关基因1(Fragile X related genel,FXR1)与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的融合表达载体并进行表达,为研究FXR1基因在脆性X综合征中的作用机制奠定基础。方法:以重组质粒pYESTrp3...目的:构建携带人脆性X相关基因1(Fragile X related genel,FXR1)与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的融合表达载体并进行表达,为研究FXR1基因在脆性X综合征中的作用机制奠定基础。方法:以重组质粒pYESTrp3/FXR1为模板,PCR扩增FXR1基因,将扩增片段双酶切后连接到质粒pEGFP-N1中,形成重组表达载体pEGFP-N1/FXR1,并用脂质体法转染人胚肾细胞,荧光显微镜下观察GFP在细胞内的表达及Western Blotting检测FXR1的表达情况。结果:成功构建融合表达载体pEGFP-N1/FXR1,在人胚肾细胞实现表达,检测到融合蛋白EGFP/FXR1。结论:本实验成功构建EFGP和FXR1重组共表达载体并可在真核细胞中表达,为进一步研究FXR1在脆性X综合征中的作用机理奠定基础。展开更多
文摘目的:本研究通过建立胆管癌大鼠模型,以法尼基衍生物X受体(farnesyl X receptor,FXR)为研究对象,初步探讨FXR在胆管癌大鼠胆管肿瘤组织中的表达状况,以期为治疗胆管癌找到新的方法.方法:取Wistar大鼠(■、体质量160g±8g)70只,随机分为2组,每组35只:普通饮食对照组(简称对照组)予以普通饮食、3'-甲基-4-二甲基氨偶氮苯(3'-Me-DAB)饮食实验组(简称实验组)予以含3'-Me-DAB饮食.经过20wk,建立胆管癌大鼠模型,取对照组胆管组织和实验组胆管肿瘤组织:(1)实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测胆管组织和胆管肿瘤组织的FXR基因表达的强度;(2)石蜡切片后用免疫组织化学SP法检测胆管组织和胆管肿瘤组织的FXR蛋白表达的强度.结果:(1)qRT-PCR结果显示:FXR/GAPDH比率在对照组胆管组织中为32,在实验组胆管肿瘤组织中为9,两组间的表达有统计学差异;(2)免疫组织化学SP法结果显示,对照组胆管组织FXR表达阳性率为72.6%,实验组胆管肿瘤组织FXR表达阳性率为21.3%,存在统计学意义(P<0.05).结论:实验组大鼠胆管肿瘤组织的FXR基因的表达较对照组胆管组织减少,提示我们在胆管癌的治疗中,FXR基因有成为新治疗靶点的可能.
文摘目的:本研究通过建立高脂血症大鼠模型,以法尼基衍生物X受体(farnesyl X receptor,FXR)为研究对象,初步探讨FXR在高脂血症大鼠中的表达状况,为防治高脂血症提供新的依据和分子理论基础.方法:取♂Wistar大鼠70只,随机均分为2组,对照组予以普通饮食、实验组予以高脂饮食.喂食90 d,建立高脂血症模型后,取对照组和实验组肝脏组织:(1)应用逆转录-聚合酶链反应(RT-polymerase chain reaction,RTP C R)技术检测两组模型肝脏组织的F X R基因表达的强度;(2)石蜡切片后用免疫组织化学SP(streptavidin-perosidase)法检测两组模型肝脏组织的FXR蛋白表达的强度.结果:实验组胆固醇及甘油三酯含量明显高于对照组.(1)电泳结果显示:实验中肝脏组织扩增产物都出现了内参β-actin基因的425bp扩增带和FXR基因的283 bp扩增带,实验组FXR基因扩增带亮度强于对照组;(2)免疫组织化学SP法结果显示,实验组FXR表达阳性率为79%,对照组FXR表达阳性率为14.3%,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:实验组大鼠的FXR基因的表达较对照组明显增加,提示我们可发展作用于FXR的药物,为高脂血症及其相关疾病找到新的治疗方法.
文摘目的:构建携带人脆性X相关基因1(Fragile X related genel,FXR1)与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的融合表达载体并进行表达,为研究FXR1基因在脆性X综合征中的作用机制奠定基础。方法:以重组质粒pYESTrp3/FXR1为模板,PCR扩增FXR1基因,将扩增片段双酶切后连接到质粒pEGFP-N1中,形成重组表达载体pEGFP-N1/FXR1,并用脂质体法转染人胚肾细胞,荧光显微镜下观察GFP在细胞内的表达及Western Blotting检测FXR1的表达情况。结果:成功构建融合表达载体pEGFP-N1/FXR1,在人胚肾细胞实现表达,检测到融合蛋白EGFP/FXR1。结论:本实验成功构建EFGP和FXR1重组共表达载体并可在真核细胞中表达,为进一步研究FXR1在脆性X综合征中的作用机理奠定基础。