FXYD蛋白与Na,K-ATP酶

Na,K-ATP酶最初被描述为一种能量转换的离子泵。近期研究显示Na,K-ATP酶有更多的生物学功能,特别是它参与一些信号转导通路,导致了一些生长相关基因表达的改变,最终影响细胞生长。FXYD蛋白家族成员是小分子膜蛋白,因其都有FXYD氨基酸序列而得名,7个家族成员具有与Na,K-ATP酶相关的组织或同功酶特异性,可调节其运输特性。

FXYD-3蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨FXYD-3(Mat-8)蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组化的方法检测20例正常口腔黏膜组织和57例口腔鳞状细胞癌组织中FXYD-3蛋白的表达并分析其临床意义。结果 FXYD-3蛋白在口腔鳞状细胞癌中的阳性表达率为37%(21/57),明显高于正常口腔黏膜组织中阳性表达率10%(2/20)(P<0.05)。FXYD-3蛋白的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、组织学分级和淋巴结转移情况均无相关性(P>0.05)。结论 FXYD-3蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达上调,可能只是口腔鳞状细胞癌发生阶段的一个早期事件,与肿瘤的浸润转移可能关系不大。

离子通道相关蛋白FXYD6功能区的原核表达及纯化

目的构建FXYD6蛋白功能区(FXYD6-ex)的原核表达质粒,并诱导FXYD6-ex在原核细胞中表达与纯化,以进一步研究FXYD6功能。方法用全长FXYD6 cDNA扩增FXYD6-ex,扩增产物插入克隆质粒载体pMD18-T Simple并用限制性内切酶酶切,将目的片段插入以限制性内切酶切后的表达质粒载体pET28a(+)中,经PCR电泳和测序证实后转化宿主大肠杆菌Rossetta,异丙基-β-8-D硫代半乳糖(IPTG)诱导重组蛋白表达,镍柱纯化重组蛋白,十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶和Western blot检测鉴定蛋白表达及纯化情况。结果成功构建pET28a(+)-FXYD6-ex大肠杆菌表达载体,并实现该蛋白在大肠杆菌中的高表达,分离纯化的产物纯度达90%。结论本研究成功对FXYD6-ex进行原核表达及纯化;此为后续制备该蛋白抗体库及进一步研究其具体功能奠定了良好基础。