miR-153-3p通过靶向FZD3调控胃癌SGC7901细胞的增殖、侵袭与迁移

目的:探讨miR-153-3p对胃癌SGC7901细胞增殖、侵袭和迁移的作用及其机制。方法:收集2018年5月至2020年6月宁夏医科大学总医院收治的60例胃癌患者的癌和配对癌旁组织标本,以及人胃癌细胞系NCI-N87、AGS、SNU-5、SGC7901和胃上皮细胞GES-1,qPCR法检测miR-153-3p在胃癌组织与细胞中的表达水平。将miR-153-3p mimic及mimic对照序列转染至SGC7901细胞,用CCK-8、克隆形成、流式细胞术、TUNEL、Transwell和划痕愈合实验分别检测上调miR-153-3p对SGC7901细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。构建裸鼠SGC7901细胞移植瘤模型,观察miR-153-3p对肿瘤生长的影响。通过生物信息学数据库和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-153-3p与FZD3靶向关系,WB法检测miR-153-3p对FZD3蛋白及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达的影响。结果:miR-153-3p在胃癌组织和细胞中表达水平分别显著低于癌旁组织和GES-1细胞(均P<0.01),以SGC7901细胞中表达水平最低。上调miR-153-3p显著抑制SGC7901细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并提高细胞凋亡率(均P<0.01),同时上调细胞中E-cadherin表达而下调N-cadherin、MMP2和MMP9表达(均P<0.01)。在体内实验表明,静脉注射miR-153-3p mimic显著降低移植瘤体积和瘤组织中Ki-67表达而上调P57表达(均P<0.01)。机制分析表明,miR-153-3p靶向结合FZD3基因的3′UTR区域,上调miR-153-3p会抑制FZD3表达并上调β-catenin、TCF-4和cyclin D1水平(均P<0.01)。结论:miR-153-3p靶向FZD3并通过Wnt/β-catenin信号通路调控胃癌SGC7901细胞的增殖、侵袭和迁移。

中国北方汉族人群VANGL1、FZD3和FZD6基因交互作用与神经管缺陷的关系

目的探讨VANGL1、FZD3和FZD6基因单核苷酸多态性（SNPs）位点间的交互作用对中国北方汉族人群神经管缺陷（NTDs）患病风险的影响。方法选取VANGLI基因2个SNPs（rs4839469和rs34059106），FZD3基因2个SNPs（rs2241802和rs28639533）以及FZD6基因3个SNPs（rs827528、rs3808553和rs12549394），采用PCR扩增和测序的方法对135例NTDs患者和135例正常对照者进行基因分型，使用多因子降维法软件（MDR）分析基因-基因交互作用。结果VANGLI基因rs4839469位点基因型分布在病例组与对照组之间有差异（P〈0．05），FZD6基因rs3808553位点基因型分布在病例组与对照组之间有差异（P〈0．05）；MDR分析结果显示VANGLI、FZD3和FZD6基因交互作用存在于两位点模型（rs4839469-rs3808553）（OR=3．18，95％CI：1．85～5．44；X^2=18．39，P〈0．0001），3位点模型（rs4839469-rs2241802-rs3808553）（DR=4．17，95％CI：2．43-7．14；X2=28．5，P〈0．0001）以及4位点模型（rs4839469-rs2241802-rs827528-rs3808553）（OR=7．34，95％CI：3．98～13．54；X2=45．3，P〈0．0001）。结论VANGL1、FZD3和FZD6基因存在交互作用，并可能增加NTDs的发病风险。

FZD3基因和蛋白在大肠癌中的表达

目的:探讨WNT信号通路受体FZD3mRNA及蛋白在大肠癌细胞及组织中的表达。方法:取正常大肠细胞株CCD18-Co、大肠癌细胞株SW480和SW620,以WNT信号通路PCR芯片筛选大肠癌细胞株中差异性表达的基因,并选择FZD3基因采用Taqman PCR法进行验证其在大肠癌细胞中的高表达,同时比较FZD3蛋白在大肠癌组织、腺瘤组织及癌旁正常组织的表达。结果:与大肠正常细胞株CCD18-Co比较,19个基因在大肠癌细胞株SW480和SW620中表达上调,其中FZD3基因为CCD18-Co的195倍和105倍;验证结果显示,与大肠正常细胞株CCD18-Co FZD3比较,FZD3 mRNA在SW480和SW620细胞株中较中升高820倍和622倍,验证了FZD3mRNA在大肠癌细胞株中的高表达;免疫组化结果显示,FZD3蛋白在大肠癌组织中表达为100%,大肠腺瘤中的表达为88%,而癌旁正常组织中仅为17.5%,与癌旁正常组织相比,FZD3蛋白在大肠癌组织中免疫组化分数高6.6倍(P<0.01);FZD3蛋白的高表达与肠癌TNM分期显著相关(P<0.005)。结论:FZD3可能在大肠癌的发生、发展中起到潜在癌基因的作用。